温州医学院 浙江温州 325027
摘要:本文研究了双歧杆菌联合嗜酸乳杆菌对肠道菌群的影响。试验设对照组、动物双歧杆菌组、嗜酸乳杆菌组,动物双歧杆菌联合嗜酸乳杆菌组。通过经口给予小鼠不同受试物,比较实验前后自身及组间双歧杆菌、乳杆菌、肠球菌、肠杆菌、产气荚膜梭菌的变化情况。研究双歧杆菌联合嗜酸乳杆菌对肠道菌群的影响。结果给样后受试物组小鼠肠道双歧杆菌和乳杆菌含量均高于对照组,差异具有显著性(P<0.05,P<0.01),受试物组小鼠肠道双歧杆菌和乳杆菌明显高于给样前,差异具有显著性(P<0.05,P<0.01);该试验未见对小鼠体重、肠杆菌、肠球菌及产气荚膜梭菌有影响。结论 双歧杆菌、嗜酸乳杆菌均可有效调节肠道菌群功能,且二者联合使用效果更好。
关键词:双歧杆菌;嗜酸乳杆菌;肠道菌群
肠道的健康很大程度上有赖于菌群平衡。然而随着长期大量使用广谱抗生素 ,在杀灭敏感病原菌的同时,也杀灭了敏感的生理性细菌,造成暂时或持久的肠道菌群失调,发生肠功能障碍,表现出明显的临床症状[1]。对于肠道菌群失调者,经口补充益生菌制剂是直接有效调节肠道菌群的办法。目前研究最多的是乳酸菌,双歧杆菌等。本试验研究了动物双歧杆菌、嗜酸乳杆菌及二者联合使用对肠道菌群的影响。
1材料和方法
动物双歧杆菌粉、嗜酸乳杆菌粉,含量均为3×1010cfu/g。
选用SPF级昆明种雌性小白鼠48只,体重18~22g。
电子天平、 生物安全柜、恒温培养箱。
1.2试验方法与剂量
小鼠分为四组,即正常对照组、动物双歧杆菌组(3×107cfu/kg)、嗜酸乳杆菌组(3×107cfu/kg)和双歧杆菌联合嗜酸乳杆菌组(动物双歧杆菌+嗜酸乳杆菌3×107cfu/kg+3×107cfu/kg),每组12只,单独喂养。实验时用纯净水配制成菌液,分别供不同组动物灌胃使用,每天1次,连续灌胃14 d。对照组灌服无菌纯净水。
在给予受试样品之前,无菌采取小鼠粪便0.1 g,10倍系列稀释,选择合适的稀释度分别接种在各培养基上。培养后,以菌落形态、革兰氏染色镜检、生化反应等鉴定计数菌落,计算出每克湿便中的菌数,取对数后进行统计处理。最后一次给予受试样品之后24小时,与实验前同样方式取直肠粪便,检测肠道菌群。受试样品给予14天后进行检测未见效果,将给样时间延长至30天,取直肠粪便检测肠道菌群。比较实验前后自身及组间双歧杆菌、乳杆菌、肠球菌、肠杆菌、产气荚膜梭菌的变化情况。
1.3试验数据统计
用SPSS 10.0 软件包进行统计分析;
2 结果
2.1 受试物对小鼠体重的影响
由表1可见,实验组实验前后与对照组体重比较,差异均无显著性意义 (P>0.05),表明受试物对小鼠的体重无明显影响。
表1受试物对小鼠体重的影响( ±SD)
组别 (g/kg·BW) | 动物数 (只) | 初始体重 (g) | 终体重 (g) |
对照组 | 12 | 19.93±0.46 | 29.01±1.74 |
动物双歧杆菌组 | 12 | 20.15±0.58 | 28.69±1.69 |
嗜酸乳杆菌组 | 12 | 20.06±0.39 | 29.14±1.88 |
动物双歧杆菌联合嗜酸乳杆菌组 | 12 | 19.97±0.43 | 28.95±1.82 |
2.2 受试物对小鼠肠道肠杆菌、肠球菌的影响
由表2可见, 给样前后肠杆菌、肠球菌在各剂量组与对照组间比较无显著性差异(P>0.05);各剂量组肠杆菌、肠球菌给样前后进行自身比较均无显著性差异(P>0.05)。
表2受试物对小鼠肠道肠杆菌、肠球菌的影响(CFU/g,log ±SD)
组别 (g/kg·BW) | 动物数 (只) | 肠杆菌 | 肠球菌 | ||
给样前 | 给样后 | 给样前 | 给样后 | ||
对照组 | 12 | 6.84±0.89 | 7.03±0.74 | 6.26±0.58 | 6.17±0.37 |
动物双歧杆菌组 | 12 | 6.77±0.93 | 6.93±0.69 | 6.31±0.75 | 6.22±0.44 |
嗜酸乳杆菌组 | 12 | 6.85±0.90 | 6.76±0.81 | 6.29±0.83 | 6.13±0.35 |
动物双歧杆菌联合嗜酸乳杆菌组 | 12 | 6.81±1.02 | 6.78±0.75 | 6.33±0.69 | 6.16±0.48 |
2.3 受试物对小鼠肠道双岐杆菌、肠道乳杆菌的影响
由表3可见,给样后动物双歧杆菌组、嗜酸乳杆菌组的小鼠肠道双岐杆菌、肠道乳杆菌含量均显著高于对照组(P <0.05);动物双歧杆菌联合嗜酸乳杆菌组小鼠肠道双岐杆菌、肠道乳杆菌含量均显著高于对照组(P <0.01);三个受试物组双歧杆菌、肠道乳杆菌明显高于给样前,差异具有显著性(P <0.05,P <0.01)。
表3受试物对小鼠肠道双岐杆菌、乳杆菌的影响(CFU/g,log ±SD)
组别 (g/kg·BW) | 动物数 (只) | 双岐杆菌 | 乳杆菌 | ||
给样前 | 给样后 | 给样前 | 给样后 | ||
对照组 | 12 | 7.93±0.17 | 8.02±0.22 | 7.88±0.21 | 7.97±0.28 |
动物双歧杆菌组 | 12 | 8.03±0.19 | 8.47±0.25*# | 7.84±0.25 | 8.39±0.35*# |
嗜酸乳杆菌组 | 12 | 7.91±0.25 | 8.43±0.27*# | 7.87±0.31 | 8.43±0.29*# |
动物双歧杆菌联合嗜酸乳杆菌组 | 12 | 7.94±0.28 | 8.65±0.31**## | 7.91±0.28 | 8.71±0.39**## |
*与对照组比较,P﹤0.05,**与对照组比较,P﹤0.01;#给样前后自身比较,P﹤0.05,##给样前后自身比较,P﹤0.01。
2.6 受试物对小鼠肠道产气荚膜梭菌的影响
给样前后均未检出产气荚膜梭菌。
3讨论
大量研究表明,益生菌在对维持肠道微生物平衡[2-3] 和提高机体免疫功能[4] 等方面具有积极的作用。本试验结果表明经口给与小鼠动物双歧杆菌、嗜酸乳杆菌,及2者联合给与后,均能显著增加小鼠肠道双岐杆菌、肠道乳杆菌含量,可有效调节肠道菌群功能,且二者联合使用效果更好。
参考文献:
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[2] 辛娜,张乃锋,刁其玉,等.芽孢杆菌制剂对断奶仔猪生长性能胃肠道发育的影响[J].畜牧兽医学报,2012,43(6):901-908
[3] 孙笑非,温俊.益生菌调节肠道菌群的作用机制及研究进展[J].饲料研究 ,2010 ,(4):56-58.
[4] 姜艳美,王加启,邓露芳,等.益生菌对宿主机体免疫调节作用研究进展[J].乳业科学与技术,2008,(3):139-142.