原发性肺隐球菌病(PC)的病理诊断和超微结构特点

原发性肺隐球菌病 (PC) 的病理诊断和超微结构特点

甘中华 唐波 段莉

西南医科大学附属中医医院病理科 四川省泸州市 646000

摘要：目的 探讨原发性肺隐球菌病(PC)的病理诊断和超微结构特点。方法 研究对象选择到我院接受治疗的27例原发性肺隐球菌病(PC)患者，研究时间从2019年5月到2021年4月，对其临床病理资料加以回顾，然后进行光镜和化学染色方面的观察，11例行电镜检查。结果 在27例患者里面，其中开胸探查的共25例，非干酪性肉芽肿病变以及肺穿刺活检明确诊断分别有25例和2例，胶样病变2例，所有这些患者经检测均发现存在新型隐球菌（CN）。奥尔辛蓝（AB）检出率为66.7%，过碘酸雪夫染色（PAS）检出率为100％， Grocott 六胺银（GMS）染色隐球菌检出率为100％，黏液卡红（MC）检出率为87.0％

。通过透射电镜进行观察，CN均由荚膜形成，而且大多数结构相对简单，细胞出现一定程度退变，还有一定比例的隐球菌存在线粒体和细胞核；除此之外，CN检出率为91.7％。结论 原发性肺隐球菌病影像学以及临床症状特征不是非常明显，在诊断过程中最常用的手段就是开胸肺活检以及穿刺。在实际应用中可以将电镜与光镜观察进行有效结合，同时一定用MC、GMS 以及PAS组织化学染色的方法，有助于全面提升原发性肺隐球菌病的临床诊断准确率。

关键词：原发性肺隐球菌病；病理诊断；超微结构；组织化学染色

Pathological diagnosis and ultrastructural characteristics of primary pulmonary cryptococcosis (PC)

GAN zhong-hua TANG bo DUAN li

(The Affiliated Traditional Chinese Medicine Hospital of Southwest Medical University, 646000, Luzhou ,Sichuan ,China)

Corresponding author: DUAN li Email:ganzh868@126.com

Abstract: Objective To investigate the pathological diagnosis and ultrastructural characteristics of primary pulmonary cryptococcosis (PC).Methods The subjects were 27 patients with primary pulmonary cryptococcosis (PC) who were treated in our hospital from May 2019 to April 2021. The clinicopathological data were reviewed, and then the light microscope and 11 cases were examined by electron microscope.Results Among the 27 patients, there were 25 cases of thoracotomy exploration, 25 cases of non caseous granulomatous lesions and 2 cases of lung biopsy, and 2 cases of colloidal lesions. All these patients were found to have Cryptococcus neoformans (CN). The detection rates of Alcian blue (AB), Schiff periodate staining (PAS), Grocott silver hexamine (GMS) and mucin carmine (MC) were 66.7%, 100%, 100% and 87.0%, respectively.Conclusion The imaging and clinical symptoms of primary pulmonary cryptococcosis are not very obvious. The most commonly used means in the diagnosis process are thoracotomy, lung biopsy and puncture. In practical application, electron microscopy and light microscopy can be effectively combined. At the same time, MC, GMS and PAS histochemical staining methods can be used to comprehensively improve the accuracy of clinical diagnosis of primary pulmonary cryptococcosis.

Keywords:Primary pulmonary cryptococcosis; Pathological diagnosis; Ultrastructural; Histochemical staining

肺隐球菌病（PC）属于临床上发病率较低的一种肺部真菌性疾病，主要原因在于受到新型隐球菌（CN）感染。原发性PC指的是隐球菌首先伤害到肺脏或者仅对脏腑产生侵犯，目前国内在这方面的报道数量较少。因为影像学以及临床症状整体不是非常明显，在诊断过程中经常出现误诊的现象，经常被诊断为肿瘤或者肺癌等[1]。在光镜下识别隐球菌孢子难度非常大，由于各种因素很可能出现误诊或者漏诊的现象。本文主要对27 PC进行透射电镜以及光镜等方面的观察，主要对病理特征以及超微结构展开深入探讨，在这基础上全面提升整体鉴别以及诊断水平。

1 材料和方法

1.1病例来源

研究对象选择到我院接受治疗的27例原发性肺隐球菌病(PC)患者，对其临床病理资料加以回顾，开胸探查的共25例，非干酪性肉芽肿病变以及肺穿刺活检明确诊断分别有25例和2例，胶样病变2例。所有患者都要对胸部进行X线检查，其中24例进行CT扫描，其中15例进行ECT67Ga肺显像[2]。

1.2一般资料

在所有的27例患者里面，其中男女患者数量分别为18例和9例，年龄最小25岁，最大72岁，经计算可知年龄平均值为（48.25±1.28）岁。

1.3病理检查

手术过程中有19例实施肺冷冻切片，其中肺切除标本以及肺穿刺标本数量分别为25例和2例，通过4%的中性甲醛对其进行固定，然后用石蜡给于包埋，随后分别对其进行组织化学染色，除了奥尔辛蓝（AB）、黏液卡红（MC）之外，还包括 酸雪夫（PAS）染色以及Grocott等，最后对其展开光镜观察。

1.4电镜检查

对其中的9例手术标本通过浓度为2.5%的戊二醛进行固定，固定完成之后开始脱水处理，然后用环氧树脂618对所有手术标本实施包埋，并对其进行半薄切片，然后精准定位，利用醋酸铀及柠檬酸铅就行染色，最后通过透射电镜进行详细观察[3]。

1.5统计学方法

对所得数据通过SPSS22.0软件展开全面分析，计数资料以及计量资料分别通过（%）与（x±s ）展示出来，然后分别通过X²与t进行检验，P<0.05说明两组数据对比存在统计学差异。

2 结果

2.1临床特点

该疾病最常见的症状就是发热咳嗽，还有的患者会咳血或者痰血。通过影像学检查之后可以发现，X线胸片有19例患者存在球形或者单个结节的影像，囊性病灶数量为2例，斑片状影像数量为2例，多类型的结节影像2例2例；其中存在毛刺的患者有12例，形成空洞的患者共计7例。对所有患者进行胸部CT扫描，可以发现存在密度大小不一样的结节影像或者团块，其中有视力存在支气管炎的现象，经过对比后认为有7例患者存在肺癌，不确定为肺癌的共10例，普通炎症以及良性肿瘤的数量共7例。ECT67Ga肺显像结果显示，所有患者中有15例存在异常浓聚灶，有肺癌的患病可能性。

2.2形态特征

通过支气管肺穿活检以及经皮刺穿，最终发现确诊数量分别为1例，剩余25例全部为开胸肺活检病理诊断。

2.3随访

对其中的23例患者进行长期随访，其中发现出现隐球菌脑膜炎的数量共3例，有1例患者痊愈，1例患者死亡；4年之后再次进行随访，所有患者均未出现复发，其中有1例完全治愈，6例11年后再次复发，剩余20例5年之后随访没有出现复发现象。

3 讨论

近几年隐球菌病发病率越来越高，尤其在国外属于AIDS患者患病率最高的一种并发症，国内也属于一类传染性疾病的一种。本文对27例患者进行研究，在诊断方面由于技术受限，仍存在一定程度的挑战性。目前在诊断PC的过程中使用率最高的方法就是开胸肺活检或者穿刺，尤其及时进行检查与诊断相当重要[4]。

通过本文研究可以看出，原发性肺隐球菌病影像学及临床症状特征表现的不是相当突出，在临床诊断过程中仍然使用传统的穿刺以及开胸肺活检等方法。不过也可以考虑将光镜以及电镜观察手段加以结合，然后再综合使用MC、GMS 及PAS组织化学染色等相关方法，通过多种方式的有效结合，有助于全面提升原发性肺隐球菌病的诊断率，帮助主治医生及时制定个性化的治疗方案。

参考文献：

[1]李小梦,蒋露晰,谷汝孟,穆德广.18例免疫功能正常的原发性肺隐球菌病患者临床分析[J].国际流行病学传染病学杂志,2021,48(01):51-54.

[2]袁成,丁明.血清隐球菌荚膜多糖抗原检测和呼吸介入方法在肺隐球菌病中的诊断价值[J].中国真菌学杂志,2021,16(06):379-383.

[3]洪葆,章益民,顾蓓青,宋迪静,王晓瑾,孙亚红,刘磊,孙虹.隐球菌抗原-胶体金免疫层析法对基层医院肺隐球菌病的快速诊断作用[J].中国乡村医药,2021,28(24):44-45.DOI:10.19542/j.cnki.1006-5180.005822.

[4]先俊,黄超文,邓冏睿,仝金斋.经高通量测序及快速现场评价诊断原发性肺隐球菌病1例并文献复习[J].甘肃医药,2021,40(10):951-953.DOI:10.15975/j.cnki.gsyy.2021.10.033.

通信作者：段丽，Email：ganzh868@126.com