微生物检验培养基质量控制方法研究

微生物检验培养基质量控制方法研究

梁铖

阿勒泰地区质量与计量检测所,新疆 阿勒泰 836599

摘要：在产品质量检验中，微生物是衡量产品卫生质量的重要指标，也是筛选产品是否符合备用要求的重要依据。微生物检验中影响检验结果的因素包括取样过程、检验试剂的质量、检验环境的控制、检验人员的操作规范和培养条件的控制等。各项指标直接影响测试结果的准确性。基于此，本文对检测试剂培养基对微生物检验的影响进行了研究和探讨，为实验室今后开展检验工作和控制培养基提供参考。

关键词:微生物检验；培养基；质量管理

随着科技的进步，各种微生物检测试剂被细分，检测工作更加快捷方便。但在检测过程中，尤其是微生物的分离培养过程中，会出现分离困难、生化反应不明显等现象，此时培养基的质量起着决定性的作用。培养基是保证微生物繁殖和维持微生物活力的物质，是微生物生存的场所。它的存在状态主要是液态、半固态或固态。如果培养基的质量不能满足微生物生存的条件，那么微生物检验结果就会受到影响，因此控制培养基的质量对保证检验结果的准确性具有重要意义。基于此，就培养基的选择、验收、配制过程中的注意事项做如下分析。

1培养基的选择和接受

1.1培养基的采购

除了实验过程的特殊要求外，实验室使用的培养基基本上选择市场上方便快捷的商业合成培养基。商业培养基具有以下优点:(1)不需要实验室人员准备，节省时间和费用；(2)不会有其他物质的污染，避免对实验结果的物质干扰；(3)操作误差小等。而市场上的合成培养基质量参差不齐，不同厂家的培养基对同一样品的检测结果可能相差很大。因此，实验室在采购过程中要注重质量，选择通过质量管理体系认证、信誉度高、知名度高、质量有保证的厂家的产品。选择质量有保证的培养基是出具准确检测结果的基础。

1.2培养基的验收

将培养基应用于实验过程，必须经实验室验收后才能使用。培养基购买后，应由专业人员验收，认真核对并记录培养基的名称、数量、批号和有效日期。同时，应检查相应培养基的质量检验报告，确保其具有良好的理化指标和微生物性能测定指标，使每种培养基的质量都能溯源。做好入库保管前的各项检验工作。

培养基在实验室投入使用前，必须经过检测，确保各项指标符合使用标准，主要是理化指标和微生物性能指标。

1.2.1理化指标测试

理化指标检验主要是指培养基的pH值、颜色、澄清度、稳定性的检测。在具体的检测过程中，工作人员要对这些外部因素进行具体的研究，观察是否符合商家提供的质检标准。要控制好这些因素，保证培养基的质量，就需要生产厂家在生产过程中对原料、生产工艺和生产技术进行控制。如有问题，工作人员应及时更换培养基，同时与厂家沟通，督促厂家调整自己的生产工艺，控制原料质量，保证培养基质量。一旦在检验过程中发现任何问题，工作人员应立即停止使用培养基，因为微生物检验过程中培养基微小的质量差异都会对检验结果产生巨大的影响。

1.2.2性能指标测试

使用培养基进行微生物实验时，必须保证除实验微生物外，没有其他微生物能够存活，以免影响最终的实验结果。培养基投产前，工作人员要专门测试培养基的生长速度、选择性和特异性，确保实验过程中没有外界因素对实验结果产生不利影响。生长速率是指实验菌株在培养基上的存活率，培养基对实验菌株的生长速率，保证微生物能在培养基上长时间存活，不断繁殖，便于以后观察和实验。选择性是指培养基对其他非实验生物的抑制作用，以避免其对最终检测结果的不利影响。特异性是指培养基的指示能力。实验菌株在培养机制中会形成相应的菌落，菌落的外部形态必须与实验数据和以往经验一致，否则培养基会出现质量问题。在具体实验过程中，实验者要控制培养基的质量。具体方法包括定量方法、半定量方法和定性方法。半定量方法和定性方法应用广泛。

2培养基制备过程中的注意事项

2.1准备要求

一般要求

为了保证实验结果的准确性，培养基的配制必须按照相应的要求进行，并记录配制记录、培养基名称等外界条件，以保证培养基的质量，保证实验的顺利完成。

实验用水

在实验过程中，对培养基用水的配制有严格的要求。pH值要中性，水温要保持在25℃左右。除规定要求外，水中的菌落不能影响实验，具体菌落总数应根据相应标准确定，以检查水质污染情况。为了避免这种情况，实验中一般使用蒸馏水，这样可以减少其他因素的干扰。

2.2准备步骤

培养基的配制分为称量、溶解、包装三个步骤。称重过程中应注意空气湿度。在具体实践过程中，要选择湿度低的房间，防止培养基受潮滋生细菌。另外，在具体称重过程中，要正确使用天平，准确进行定量选择。应使用专业的称重和测量仪器，以防止交叉感染。包装器皿尽量使用玻璃容器，但不建议使用铜制品和铁制品的容器，因为这些容器本身在制备过程中会向培养基中释放铁离子，对细菌的生长和菌落菌株的控制非常不利。溶解时要注意温度，适当加热，分步骤、多层次加水，保证培养基能充分融合。包装过程是将培养基分装到不同的容器中，需要注意的是容器至少要比培养基大1/5。

2.3灭菌要求

灭菌是保证培养基质量的关键步骤。灭菌方法分为干热灭菌和湿热灭菌。这两种方法各有优势，但一般选择湿热灭菌。在实际操作中，要保证培养基的质量，灭菌要以不损害培养基质量为前提。具体操作条件为121℃灭菌15~20min。灭菌后，应采用特定的检测方法检测灭菌效果。不同培养基的灭菌方法有差异，有的只需要高温加热煮沸即可。因此，工作人员在具体检查过程中要注意具体问题具体分析。

2.4存储

培养基的保存首先要保证处于适合菌种生长的温度，不能过高也不能过低。灭菌后应立即将容器盖盖紧，避免空气中的水分或细菌落入培养基中，影响实验观察。此外，应确保培养基能在其有效期内用完，以免影响最终结果。培养基使用后，每个培养菌株和培养基都要做好标记，便于以后观察和选择。

3微生物实验室培养基检验质量控制操作方法

食品安全与人们的健康密切相关。随着生活水平的提高，人们对食品微生物检验提出了更高的要求。食品微生物检验受多种因素影响，因此有必要对影响因素进行控制。室内质量控制是指对影响实验室检验质量的因素进行规划和持续评估。影响实验室检测结果的因素包括检测人员、实验耗材等方面[4]。人员素质是保证检验质量的根本因素。检查员应避免实验错误，实验室应根据工作需要分配检查员。微生物检验方法必须统一可靠。目前实验室选择国家行业标准规定的有效检测方法，从知名技术机构公布的方法中选取。

自制培养基应按处方准确记录，不同厂家生产的不同批次产品质量不同。培养物中原料成分要控制，自制培养基成分要单独添加。随着微生物检验行业的发展，商品化的干培养基已经得到微生物检验行业的认可，专业的培养基生产厂家应该有规范的生产工艺，保证质量合格。检验用微生物药物培养基应由专业生产厂家生产，生产厂家应提供培养基名称、批次、使用前pH值等信息。培养基不能在铁锅中水合，以免影响微生物的生长。为防止新玻璃瓶受热释放碱性物质，容器应大于复水后培养基总体积的2倍。使用不含抑制微生物生长物质的蒸馏水，加入适量含抗菌物质的培养基进行水化。

培养基组分溶解均匀后包装灭菌，含琼脂的粉状培养基溶解前浸泡。如果用设备煮沸培养基，用小火加热，烧焦的培养基会产生有毒物质。根据制造商提供的说明，培养基通过湿热灭菌。培养基中使用的水和干粉含有大量的微生物，以避免微生物的繁殖和营养物质的消耗及有毒物质的产生。注明分装培养基的配制时间等[5]。高温会破坏培养基的营养成分，降低琼脂凝胶的强度。一些营养成分在加热时会发生反应，从而降低可溶性磷酸盐的浓度。与还原糖氨基酸等发生化学反应，高温下反应生成有毒物质。湿热灭菌需要控制温度和时间。

4结论

在微生物检测过程中，培养基的质量直接影响微生物检测的结果。做好培养基的质量控制，对提高微生物检验效果有很大帮助。通过对培养基选择、验收、配制过程中注意事项的分析，为实验室今后控制培养基提供参考。

参考文献

[1]杨云斌,杜斐颖,牛涛.食品中微生物检验用培养基的使用及质量控制探讨[J].食品安全质量检测学报,2018,5(9):1055-1058.

[2]中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会.GB4789.28-2013食品安全国家标准食品微生物学检验培养基和试剂的质量要求[S].北京:中国标准出版社,2014.

[3]许阳.论食品微生物检验中培养基的质量控制[J].疾病监测与控制杂志,2015,5(9):331-332.

[4]李芬.食品卫生微生物检验中培养基的质量控制[J].世界最新医学信息文摘,2018,18(89):161,164.

[5]孙葳,王超,赵虹.浅谈食品微生物检验中培养基质量控制[J].食品安全导刊,2018,33(89):115.