马齿苋用于中药药理学实践研究

马齿苋用于中药药理学实践研究

张文静

山东协和学院 商学院 山东济南 250107 

摘要：探究不同剂量马齿苋对牛蛙离体心脏收缩张力的影响,以拓展中药药理学实践教学,培养学生的实践能力、创新能力和动手能力。采用斯氏离体蛙心灌流法制备离体蛙心模型,分别灌流不同剂量的马齿苋,记录心脏收缩张力变化。结果发现：不同剂量的马齿苋均能增强离体心脏收缩力,其中,0.2%剂量的差异显著。因此,马齿苋能有效增强离体牛蛙心脏收缩张力,同时应用于楚雄医药高等专科学校中药专业中药药理学实践教学,可以取得良好的教学效果。

关键词：马齿苋；离体心脏；心肌收缩力；实践教学现代盐化工

马齿苋（Portulaca oleracea L.）别名爪子菜、长命菜、豆瓣菜等,分布于云南全省,多生于潮湿杂草地、荒地、田边、路边,含有多种化学成分,主要有生物碱类、萜类、香豆素类、黄酮类、有机酸类等成分,具有抗炎、镇痛、抑菌、降血糖、降血脂、抗肿瘤、抗氧化等作用。研究发现,马齿苋对正常离体心脏和离体衰竭心脏的心肌收缩力均有明确的增强作用。本课题主要在此基础上进一步研究马齿苋对离体心脏的作用,以获得最适宜的给药浓度与剂量。

1 实验材料

1.1 实验动物

健康牛蛙60只,雌雄不限,体重（250±50）g,购于当地水产品市场,并由楚雄医药高等专科学校生物学教师鉴定为健康合格牛蛙,课题组成员均已参加云南省实验动物从业人员专业培训,并获得实验动物研究资格,整个实验过程符合实验动物伦理学规范。

1.2 药物与试剂 

马齿苋全草,采于云南省楚雄医专校园周边,经该校中药鉴定室鉴定为中药材马齿苋；任氏液；纯化水。
1.3 主要仪器

数显式鼓风干燥箱（101A-3,上海沪粤明科学仪器有限公司）；计算机（启天B4550-B031,联想有限公司）；电子天平（Scout SE型,奥豪斯仪器有限公司）；多功能红外炉（MC-HI8SO11,中山市家福来电器有限公司）；肌张力传感器、生物机能实验系统（BL-420S,成都泰盟公司）；中药保健壶（JK-23,广东时珍电器有限公司）；恒温水浴锅（HWS-28,上海一恒）；蛙心夹、蛙心套管（成都泰盟公司）。

2 实验方法

2.1 药物制备

2.1.1 五种马齿苋水煎液的配制（按实验小组自行制备）

由老师带队组织学生参与新鲜马齿苋的采摘,每小组1~2名学生,采摘后取全草,洗净烘干后,剪成小段,称取5 g,加适量纯化水浸泡约30 min,大火煎煮至沸腾后,改为小火继续煎煮30 min,过滤,药渣再加适量纯化水煎煮15 min,过滤。合并两次过滤液,于水浴上浓缩配制成 50.0 m L,冷却后置于冰箱冷藏保存,用纯化水稀释成0.1%、0.2%、0.4%、0.8%、1.6% 5种马齿苋溶液。2.1.2  任氏液的配制 按参考文献[4]的配方配制任氏液。配方：Na Cl 6.50 g/L,KCl 0.14 g/L,NaHCO3 0.20 g/L,NaH2PO4 0.01 g/L,葡萄糖2.00 g/L,Ca Cl2 0.12 g/L。

2.2 不同质量分数马齿苋对离体蛙心心肌收缩力的影响

取60只牛蛙,随机分为对照组、0.1%马齿苋组、0.2%马齿苋组、0.4%马齿苋组、0.8%马齿苋组、1.6%马齿苋组,每组10只。所有牛蛙均用脊髓破坏针从枕骨大孔处插入破坏蛙。

2.1.1五种马齿苋水煎液的配制（按实验小组自行制备）

由老师带队组织学生参与新鲜马齿苋的采摘,每小组1~2名学生,采摘后取全草,洗净烘干后,剪成小段,称取5 g,加适量纯化水浸泡约30 min,大火煎煮至沸腾后,改为小火继续煎煮30 min,过滤,药渣再加适量纯化水煎煮15 min,过滤。合并两次过滤液,于水浴上浓缩配制成 50.0 m L,冷却后置于冰箱冷藏保存,用纯化水稀释成0.1%、0.2%、0.4%、0.8%、1.6% 5种马齿苋溶液。

2.1.2 任氏液的配制

按参考文献[4]的配方配制任氏液。配方：Na Cl 6.50 g/L,KCl 0.14 g/L,NaHCO3 0.20 g/LNaH

2PO4 0.01 g/L,葡萄糖2.00 g/L,Ca Cl2 0.12 g/L。

2.2 不同质量分数马齿苋对离体蛙心心肌收缩力的影响

取60只牛蛙,随机分为对照组、0.1%马齿苋组、0.2%马齿苋组、0.4%马齿苋组、0.8%马齿苋组、1.6%马齿苋组,每组10只。所有牛蛙均用脊髓破坏针从枕骨大孔处插入破坏蛙。

3实验结果

图1的结果表明,马齿苋对牛蛙离体心脏的灌流具有明显的正性肌力作用,且呈现良好的量效关系。在一定范围内,离体蛙心收缩张力随马齿苋质量分数的增加而增强。当质量分数为0.2%时,正性肌力作用最显著；当质量分数高于0.8%时,心肌收缩力随质量分数增加而有所减弱,但仍高于正常值；当质量分数增加至1.6%时,心肌收缩张力反而减弱,提示大剂量马齿苋可能产生心脏毒性,进而出现抑制作用。因此,学生在实践课上主要观察了正常离体心脏收缩,借鉴了李蓉等用缺钙任氏液导致心衰的研究,再用0.2%马齿苋进行解救,获得了良好的教学效果。

4结论与讨论

马齿苋对离体牛蛙心脏收缩力有明显的增强作用,尤其是在质量分数为0.2%时,作用最显著。21世纪,高等教育的战略目标是培养具有一定科研创新能力的人才,因此,培养学生的科研能力和创新能力具有重要意义。本实验更好地体现了研究性教学,强调了教师研究性地教与学生研究性地学的有机融合,充分体现了创新教育理念。开展研究型教学有利于学生综合能力的提升、有利于学生创新能力的培养、有利于学生学习能力的提高。近三年,楚雄医药高等专科学校教师利用身边的药材让学生全程参与中药药理学课程教学,课时设置为4学时,关于新鲜药材的采摘、净制、煎煮的方法和药液的配制等,都由各实验小组自行解决,由教师进行指导。从离体蛙心标本的制备到实验结果的处理与分析,教师通过视频投影的方式边示教边讲解,在一定程度上提高了学生的参与度,也培养了学生沟通与分工合作和思考问题、解决问题的综合能力,同时也激发了学生的专业热情。结果分析出来后,小组之间还会互相比对实验结果,出现差异的小组还会互相找原因,直到理解实验过程中每一步的重要性。

参考文献：

[1] 朱兆云.云南天然药物图鉴[M].云南：云南科技出版社,2003.

[2] 陈维维,张小莉,桑晓林.马齿苋保肝作用的研究进展[J].中医临床研究,2017（35）：142-144.

[3] 李蓉,朱疆,付围,等.马齿苋对离体心脏药理作用实验研究[J].中医药导报,2021（4）：20-22,35.

[4] 李仪奎.中药药理实验方法学[M].2版.上海：上海科学技术出版社,2006.

[5] 张琦弦.培养本科生科研创新能力的探索型实验设计[J].实验技术与管理,2018（4）：192-194.

[6] 张伟.单片机与接口技术课程研究型教学模式研究[J].西南师范大学学报（自然科学版）,2018（6）：190-194.

[7] 何进,唐清,陈雯莉,等.基于创新能力培养的“微生物学”研究型教学模式探索[J].微生物学通报,2018（3）：635-641.