高效液相色谱法在药品检验中的应用价值

高效液相色谱法在药品检验中的应用价值

廖锦红

海南森祺制药有限公司570216

【摘要】目的：高效液相色谱法（HPLC）在药品检验中的应用价值。方法：取我单位银杏黄酮类药物，分别使用薄层色谱法及高效液相色谱法检测，观察其各项成分的分离率及山萘素的回收率。结果：与薄层色谱法组，HPLC法组的99.13%回收率偏高。与薄层色谱法组，HPLC法组的槲皮素、山萘素、异鼠李素分离率、纯度均偏高。结论：在药品检验中使用HPLC法的检验效果高于薄层色谱法，能够增加对山萘素、异鼠李素、槲皮素的分离率，改善其纯度及山萘素的回收概率。

【关键词】药品检验；高效液相色谱法；薄层色谱法

     HPLC法是现代药物分析中最有效、最快速的一种方式，其在上世纪60年代后期发展起来，在检验中的使用历史已有几十年，在现代分离测定的技术手段及方法中占主导位置，其分析速度、分离效能、操作自动化、检验灵敏度等方面均有了质的飞跃[1]。HPLC法和经典液相色谱法相同，均有检测灵敏度高、制备色谱方便、流动相广泛等优点。到目前为止，该方法已在生物技术、制药、食品工业、石油工业等领域得到应用。受科学技术持续增进影响，HPLC技术在药品检测中的应用也日益广泛，发挥了越来越重要的作用，成为了现代社会发展的技术措施[2]。HPLC法引入了较多的药品品种检验项目，使得其药品检验全面性增加，细致性增加，成为最重要的色谱分析工具之一[3]。基于此本次研究使用HPLC法及薄层色谱法对比分析，观察HPLC法的应用价值。

1资料与方法

1.1一般资料

    药物选取我单位银杏黄酮类药物，分别使用薄层色谱法及高效液相色谱法检测，选择试剂为银杏叶提取物、甲醇、磷酸、黄酮醇苷元槲皮素对照组、重蒸水。一起选择高效液相色谱仪、可编程序紫外检测器、常规脱气机、色谱柱、定量管。

1.2方法

样本制作：使用甲醇400ml+银杏提取物0.2g混合均匀，观察液体完全融合后使用1.5mol/L盐酸溶液45ml混合均匀，完成后将水浴锅加热37℃，再将溶液放入持续加热100~120min，再将标本取出静置冷却后放入50ml量瓶中，加入甲醛进行定容备用。

薄层色谱法：（1）使用研钵将3份水+1份固定相进行研磨融合，消泡后将其倒入涂布器中，涂布于玻板上平稳，稳定厚度在0.2~0.3mm，涂布完毕后将玻板取出，放于水平台上晾干，完成后于放有干燥剂的干燥箱中保存；（2）点样：该过程使用半自动点样仪，室内加入适量展开剂，将准备好的薄层板，封闭室盖，取出薄板晾干时间为展开到10~15cm的时间，检测时需严格按照展开因素使用试剂显色法显色薄层板，在这时需要使用显色剂对比其获取的比移值和对照组物的比移值，对药品实施鉴别。

HPLC法：取0.2g样品在仪器检测前完成流动相的准备，将0.4%磷酸溶液与甲醇混合均匀，溶液比例为45:55，设置波长360nm，柱温25~27℃，进样体积10μl，流速1.0ml/min，对药品实施检验，这时需要根据标准步骤进行操作。

1.3效果判定

将两组山萘素、异鼠李素、槲皮素的分离率及纯度实施比较，对山萘素回收率进行比较。

2结果

2.1 山萘素回收率比较

表1所示，与薄层色谱法组，HPLC法组的99.13%回收率偏高。

表1山萘素回收率比较

2.2 分离纯度及精度比较

表2所示，与薄层色谱法组，HPLC法组的槲皮素、山萘素、异鼠李素分离率、纯度均偏高。

表2分离纯度及精度比较

3讨论

HPLC法是一种分离分析技术，能够分析实验样品方法为主要流动相设定液体，运用高压输液系统进行缓冲液泵入、不同混合溶剂或者单一溶剂的流动相，在色谱柱中将成分实施分离，再使用制定的检测仪检测的方法。现阶段，在药品和食品管理中使用HPLC法的频率有所增加，这有助于顺利实施市场监管[4]。尤其是在识别成分类似的药物时，使用HPLC法检测更为有效，并且现阶段仍有市场出现药品违禁添加的事件出现，HPLC法还可帮助药品管理人员发现违规和有害成分，减少药物对身体健康的影响，显著改善药物监管和检测[5]。

在色谱法中，HPLC法的地位举足轻重，其也称为高分离度液相色谱法或高压液相色谱法。该原理包括使用高压输液系统在固定色谱柱中装入单一溶剂或者混合溶剂再实施分离，再在检测器中测试，以分析样本，因此，HPLC法的原理在很大程度上与经典光谱法相对应。然而，由于HPLC法的输液泵含有高灵敏度的检测仪，能够提高其准确性。药品检测中HPLC法主要有以下几个特点：（1）高压：HPLC法是液体当流动相，通过谱柱时阻力较大。为了从色谱柱通过需要增加载液压力。（2）高速：

HPLC法具有更快的载液流速、分析速度，通常能够在15到30分钟内分析样品。（3）灵敏度较高：HPLC法可确保更好分离性能，并可实现流动相和固相最佳分布。（4）高灵敏度：HPLC法的紫外线检测器、进样量分别达μl数量级0.1ng[6]。

相关医学检查表明，与薄层色谱相比，HPLC法的槲皮素、山萘素、异鼠李素的纯度及分离率均偏高，这意味着在药品检测中应用HPLC法可提供正确结果，从而有助于提高分离效果和回收率。相关医学研究表明，在药品检测中使用HPLC法能够更快、更准确地进行调查，并显著提高分离效果和回收率。其他研究表明，将HPLC法应用于药品检测在促进山萘素回收、提高提取纯度、确定结果可靠性和提高精度方面具有极好效果。本研究表明，与薄层色谱法组，HPLC法组的99.13%回收率偏高。与薄层色谱法组，HPLC法组的槲皮素、山萘素、异鼠李素分离率、纯度均偏高。此结果表明其与薄层色谱检测方法有着显著不同，而在实际药品检测中，HPLC法中使用高效微粒固定项。其次，该方法使用的输液泵压力及检测仪敏感度均偏高，间接提高了检测精度。

综上所述，现阶段，HPLC在设备、仪器和固定等方面有了质的飞跃，极大地增加了其在药品检测中的应用。在不久的将来，HPLC将在开发、检测、联用技术等方面有质的进步，在更多的药品检验中发挥重要作用。同时，这将是未来提高我国药品质量规范化和国际化的最重要途径之一。

【参考文献】

[1] 段雯利,王新科. 高效液相色谱法在药品检验中的应用效果观察及有效性分析[J]. 中国医药工业杂志,2021,52(10):1408.

[2] 吕亚兰. 高效液相色谱法在药品检验中的应用[J]. 临床合理用药杂志,2021,14(8):155-156.

[3] 鲁珍娥,聂娟,鲁彩彩,等. 高效液相色谱法在药品检验中的应用和效果[J]. 生物化工,2020,6(6):170-172.

[4] 孟薇. 高效液相色谱法在药品检验中的应用和效果[J]. 中国医药指南,2020,18(18):298.

[5] 吴凡,刘继华,陈祖芬. 高效液相色谱法及超高效液相色谱-质谱联用法在多种肾上腺皮质激素检测中的应用价值[J]. 临床合理用药杂志,2021,14(33):166-167.

[6] 史岑,高天红,薛跃丽,等. 药品生产企业高效液相色谱法测定金银花中绿原酸质控能力评估研究[J]. 中国药物与临床,2020,20(7):1185-1186.