桂林三金药业股份有限公司,广西桂林541004
【摘要】实验目的:在传统的益母颗粒质量评价标准的基础上对其进行完善,提升质量标准。实验过程:分别对川芎和当归进行薄层色谱鉴别、对盐酸水苏碱进行液相色谱鉴别以及对益母草的盐酸水苏碱含量进行测定。实验结果:紫外光下供试品色谱在与对照药材色谱相对应的位置上显现相同颜色的荧光斑点;供试品溶液中盐酸水苏碱的含量不低于4.82mg/g。实验结论:在质量评价标准的基础上增加以上三种元素进行评价,效果较好,具有推广意义。
【关键词】益母颗粒;盐酸水苏碱;当归;川芎
益母颗粒是一种由益母草等四味药材组成的药物,具有活血调经等功效[1],在临床上多用于治疗痛经、月经不调等疾病,是一种常见的中成药物。但在应用中存在质量标准没有定性鉴别及定量测定项目[2],为此,本文在传统的质量标准评价中增加了对川芎和当归的薄层色谱鉴别、对盐酸水苏碱进行液相色谱鉴别以及对益母草的盐酸水苏碱含量的测定,提高其质量标准。
1实验材料
1.1实验仪器
高效液相色谱仪Waters 2695-ELSD、色谱柱Agela Venusil HILIC(4.6×250mm,5um)、薄层色谱数码成像系统(REPROSTAR3)、XP205分析天平(METTLER TOLEDO)、S7540-12(T)超声波清洗器。
1.2实验试剂
盐酸水苏碱(化学对照品,批号:110712-201614,中国食品药品检定研究院,下同)、当归(对照药材,批号:120927-201516)、川芎(对照药材,批号:120918-201612)、乙腈(色谱纯)、其余试剂均为分析纯。
2实验方法
2.1当归和川芎的薄层色谱鉴别
2.1.1对照药材及供试品溶液的制备
取益母颗粒10g,加乙酸乙酯40ml,超声处理40分钟,滤过,蒸干,残渣加乙酸乙酯2ml使溶解,制成供试品溶液[3]。另取当归、川芎药材各0.2g,加乙酸乙酯40ml,超声处理40分钟,滤过,蒸干,残渣加乙酸乙酯2ml使溶解,制成当归和川芎对照药材溶液。取双阴性样品各10g,加乙酸乙酯40ml,超声处理40分钟,滤过,蒸干,残渣加乙酸乙酯2ml使溶解,制成阴性对照样品溶液。
2.1.2实验过程
吸取供试品溶液10~15μl和对照药材溶液5~10μl,分别点于同一硅胶G薄层板上,以环己烷-乙酸乙酯(9:1)为展开剂,展开,取出,晾干,置紫外光灯(365nm)下检视[4]。
2.1.3实验结果
紫外光下供试品色谱在与对照药材色谱相对应的位置上显现相同颜色的荧光斑点;双阴性样品色谱不显现相应荧光斑点。
2.2盐酸水苏碱的高效液相色谱鉴别研究
2.2.1对照品及供试品溶液的制备
取盐酸水苏碱对照品适量,精密称定,加70%乙醇制成每1ml含0.3mg的溶液,即得对照品溶液。取益母颗粒1g,加70%乙醇25ml,称定重量,超声处理90分钟,放冷,再称定重量,用上述溶液补足减失的重量,摇匀、滤过,取续滤液,即得供试品溶液。
将益母颗粒处方中除益母草外的药物按比例制备成缺益母草的阴性样品,取1g,加70%乙醇25ml,称定重量,超声处理90分钟,放冷,再称定重量,用上述溶液补足减失的重量,摇匀、滤过,取续滤液,即得对照阴性样品溶液。
2.2.2实验过程
分别精密吸取对照品溶液、对照阴性样品溶液、供试品溶液各10ul,注入液相色谱仪中,测定,即得。
2.2.3实验结果
供试品色谱中呈现与盐酸水苏碱对照品色谱保留时间相同的色谱峰。
2.3盐酸水苏碱的高效液相色谱含量测定研究
2.3.1对照品及供试品溶液的制备
取盐酸水苏碱对照品适量,精密称定,加70%乙醇制成每1ml含0.3mg的溶液,即得对照品溶液。
取益母颗粒1g,加70%乙醇25ml,称定重量,超声处理90分钟,放冷,再称定重量,用上述溶液补足减失的重量,摇匀、滤过,取续滤液,即得供试品溶液。
2.3.2实验过程
分别精密吸取对照品溶液10ul、20ul,供试品溶液10ul,注入液相色谱仪中,测定,用外标两点法对数方程计算,即得。
2.3.3实验结果
供试品溶液中盐酸水苏碱的含量为4.82mg/g。
3讨论
益母颗粒作为一种能活血调经、行气止痛的中成药物,在治疗月经不调及痛经等方面都有着很大的用处,流产后阴道出血的患者也可以服用,在临床应用上具有重要意义。本次研究在对益母颗粒的质量标准评价中创造性地增加了对川芎和当归的薄层色谱鉴定、对盐酸水苏碱进行液相色谱测定以及对益母草的盐酸水苏碱含量的测定,其方法简单、具有较好的参考价值。将这几种新的评价元素纳入传统评价体系之后,对益母颗粒进行质量评价时就能够更加全面可靠地进行评价,在实践及应用过程中都具有重要意义。
参考文献
[1]刘海燕,金季玲,张士表,等.补血益母颗粒治疗功血的临床观察[J].光明中医,2013,28(3):515-516.
[2]覃珍.补血益母颗粒治疗药物流产后阴道出血临床观察[J].实用中医药杂志,2015,31(8):724-724.
[3]凌艳,刘丽华.益母定痛颗粒对动物痛经模型的治疗作用[J].实用全科医学,2005,3(4):285-286.
[4]王小娟.益母颗粒的薄层色谱鉴别[J].中国保健营养,2018,28(4):241-241.