药品微生物限度检查误差分析及应对措施

药品微生物限度检查误差分析及应对措施

李世颂,周立云

黑龙江省佳木斯市检验检测中心药品检验所   邮编:154002

摘要：为了保障药品质量及安全，相关部门提出了微生物限度检查的方法，只有降低检查误差才能提高检查结果的准确性。为此，本文重点从培养基导致的误差及应对措施、检品导致的误差及应对措施、菌落计数导致的误差及应对措施、无菌室导致的误差及应对措施等四个不同角度分析药品微生物限度检查工作中的误差并提出相应的解决对策。

关键词：药品；微生物限度检查；误差；应对措施

药品主要用于疾病的预防与治疗，关系到人们的生命安全。因此，还必须加强检查微生物的限度，提高药品质量，保障人们的用药安全。然而结合实际工作可知，受到检查要求严格、周期长的特点，无法避免检查误差，还需要结合实际情况提出相应的解决对策。

1培养基导致的误差及应对措施

微生物限度检查工作中培养基对其产生的检查而言是相当重要的一个环节，其直接对该工作的结果产生影响[1]。若工作人员没有按照要求做好培养基的存放工作或没有在相应的条件下配置，导致培养基质量稳定性不强，一定程度上也会对微生物限度检查结果产生影响。为了提高微生物限度检查结果的准确性，还必须加强检测培养基的质量，提高培养基的灵敏度和有效性。因此，可从以下几个方面解决上述问题：首先，测试酸碱度。细菌类型不同，其对培养基pH值的要求存在很大的差异，为了对培养基进行测试，了解其是否可以用于药品的微生物检查，还需要加大力度检测培养基的pH值。若发现pH值达不到标准，可以用氢氧化钠进行调节，提高培养基使用效果。工作人员在调节工作中应坚持少量多次，避免出现一次添加过量氢氧化钠的问题。其次，开展已知菌试验。检验初次购买的培养基时可以用已知菌对照试验的方法做好相关试验，可用酸度计测试其灵敏度，并借助不同类型的阳性菌针对各种培养基作对照试验，立足反应结果对培养基是否可以用于检查药品微生物限度进行确定，从根本上降低检查工作的误差[2]。最后，制备后及时灭菌。部分技术人员为了提高灭菌效果通常都是低温灭菌处理全部试验对象。虽然低温灭菌效果理想，然而部分菌种仍然可以存活在低温的环境中。由此可见，研究人员应提高灭菌之前培养基整体的酸碱度，并合理利用供试品进行稀释，杀死或破坏培养基中的细菌，并借助高倍显微镜对培养基的情况进行观察，确保其与药品微生物限度检验要求相符。

2检品导致的误差及应对措施

受到检品特殊性或供试品制备过程中操作人员不正确操作的影响，无法保障精准结果的准确性。具体包含三点：一是检品中的抑菌成分受到很大的影响。当前很多药品中都加入了抑菌成分，虽然部分检品中无法确定抑菌成分，但是菌落计数环节中也会发现这个过程中有一定的抑菌作用。为了进一步对检品是否存在抑菌的成分，工作人员应在开展检查工作之前进行验证，保证供试品在试验条件下抑菌活性不明显。通常情况下，可以以常规检验方法为基础，严格按照相关要求加入合适的阳性对照菌，若无法检出，则可以通过其他方法处理，比如稀释法，最后开展阴性、阳性的对照[3]。二是制备供试品时受到污染。操作人员应在制备供试品时以无菌操作要求为原则，禁止接触任何可能导致污染的器物。最后，培养温度影响检品的菌落生长。/结合以往的检验数据可知，部分检品含菌量较高，在温度30℃以下培养时72h内的菌落生长较为缓慢，因此还需要技术人员在药典允许范围内增加培养的时间/。

3菌落计数导致的误差及应对措施

因为菌落计数时细菌的整体生长比较小且密集，易引起计数不准确。同时，其会受到培养时间延长影响，在边缘生长，因而容易产生计数误差。可以直接通过肉眼从平板背面点计算菌落计数，但需要操作人员仔细地观察与判断，保证不漏计和平皿边缘生长或保琼脂层内的菌落。同时，还要加强鉴别细菌菌落、沉淀物、气泡等，如有必要可以借助放大镜与低倍显微镜观察，或者涂片镜检，增加培养时间后检测[4]。因为供试品的稀释液中可能存在无法溶解的原料或辅料，培养基注皿后就会生成污点，为了将菌落区和这些无法溶解的沉淀物、原料与辅料区分，操作人员可以在操作的过程中视情况将合适的稀释剂的稀释液增加1-2个注皿，之后冷藏在冰箱中，以此当做菌落计数的对照物。还可以借助浓度为0.001%的TTC营养琼脂注皿，借助不同颜色对细菌菌类与其他的无法溶解物质进行区分。严格按照相应的培养时间，可以在培养48h后开展菌落技术，而霉菌或酵母菌则需要在72h后再进行。

4无菌室导致的误差及应对措施

通过无菌检查微生物的限度，可以有效地降低各类不可控因素的影响，检验结果准确性更高，避免出现检验结果误差的问题。但是无菌室内灭菌消毒与洁净情况也会影响检验结果，必须控制无菌室环境[5]。一方面，可以借助臭氧消毒器消毒无菌室，借助臭氧分解的氧化离子团与单氧原子无死角灭菌，提高灭菌效果。另一方面，定期检查无菌空气质量，保证其达标。在培养基的左中右三个不同方向各放置一个普通琼培脂培养基，暴露一段时间后在温度30℃-35℃培养2天，之后观察培养基，若平均菌落数大于1个，表明无菌室内的空气质量不达标，应立即停止，并重新消毒灭菌，确保空气质量达标后进行试验。

结束语

检查药品微生物限度应在实验过程中贯穿无菌观念，实验操作人员应保证严格按照无菌操作步骤，并在实验结束后回顾考察，保证无任何环节出现污染的问题。同时，检验人员应具有较高的责任心，掌握专业的理论水平、娴熟的技能，正确判断检查结果，降低实验误差，提高微生物限度检查结果的准确性。

参考文献：

[1]宏伟,杨开金. 药品微生物限度检查误差分析及应对措施[J]. 北方药学,2018,15(10):182-183. 

[2]张萍. 药品微生物限度检查误差分析及应对措施[J]. 中外女性健康研究,2017(21):104-104,106. 

[3]张小莉. 药品微生物限度检查误差的影响因素及控制方法[J]. 中国药业,2018,27(6):90-92. 

[4]母丹. 浅析药品微生物限度检查法的若干影响因素[J]. 科学咨询,2021(49):13-15.

[5]丛日辉. 影响药品微生物限度检查方法学验证因素分析[J]. 商品与质量,2019(8):171-171,183.