沐川地区育龄期人群地中海贫血的基因分布特征

沐川地区育龄期人群地中海贫血的基因分布特征

程钰青1  ,王红梅2

（1 沐川县人民医院  四川 乐山  614500 ）（2 乐山市妇幼保健院 四川乐山  614000）

摘要：目的：分析沐川地区2020年1月1日至2021年12月31日1708例育龄期人群地中海贫血基因的携带率和基因类型分布状况。方法：以沐川地区1708例来院进行地中海贫血产前筛查的育龄期人群为研究对象，联合应用血常规和血红蛋白电泳进行地中海贫血的初筛分析，同时对初筛结果为阳性的被检者进行地中海贫血基因检测。结果：在1708例被检者中初筛阳性有202例（占比11.83%），经过基因检测诊断为地中海贫血有72例（携带率为4.22%），其中男性有22例，女性有50例，共检出α地中海贫血43例，其中α地中海贫血较为常见的类型是--SEA/αα、-α3.7/αα缺失型，β地中海贫血26例，以CD17杂合点突变型为主，合并α和β地中海贫血有3例，三类地中海贫血阳性率分别为2.52%、1.52%、0.18%。结论：沐川地区育龄期人群中β地中海贫血阳性率略低，α地中海贫血阳性率明显较高，属于α地中海贫血高发地区，与四川其他地区基本一致。建议沐川地区备孕的育龄期夫妇进行地中海贫血的筛查，减少重型地中海贫血患儿的出生，保证优生优育。

关键词：α地中海贫血；β地中海贫血；血常规；血红蛋白电泳；基因检测；地中海贫血基因携带率

地中海贫血（Thalassaemia）是由于遗传基因缺陷导致血红蛋白中至少一种珠蛋白合成缺乏或不足引起的贫血或病理状态，是一组常染色体遗传性疾病。地中海贫血广泛分布于全世界各地，其中以地中海沿岸、南太平洋、亚洲等地区高发，地中海贫血基因携带者约两亿，是最人类常见的遗传性疾病[1]。在我国，该病主要分布于长江以南地区，以广东、广西、四川等为主[2]。地中海贫血根据其珠蛋白肽链合成受抑制种类不同，可分为四类[3]：α型、β型、δ型和δβ型，其中α型和β型较为常见。沐川县位于四川盆地西南，隶属乐山市，多民族聚集，育龄期人群基数较少，鼓励生育，健康生育任重道远，目前还没有针对沐川地区育龄期人群地中海贫血的相关研究分析，此次研究将对沐川地区育龄期人群的地中海贫血的基因进行检测，以初步了解本地育龄期人群地中海贫血的携带率及基因类型的分布状况。

1材料与方法

1.1  研究对象

选取2020年1月1日至2021年12月31日来沐川县人民医院进行产前筛查的1708例育龄期人群为研究对象（研究对象均为沐川地区育龄期人群，来院进行产前检查时纳入，基本信息由所负责的产前医师共同协助完成），所有受检者抽血进行地中海贫血表型初步筛查，并告知相关研究信息签署知情同意书。（纳入标准：①就诊前未出现贫血情况，未确诊为地中海贫血。排除标准：①有地中海贫血家族史 ②地中海贫血确诊患者）

1.2  研究方法

1.2.1  采集血液标本  使用EDTA-K2标准真空抗凝管采集2ml外周静脉血液混匀。对地中海贫血表型初步筛查阳性者，重新召回再次签署知情同意书，并进行二次采血，送寄做基因检测。

1.2.2  地中海贫血表型初步筛查 使用迈瑞6800全自动血细胞分析仪进行血常规分析，所有样本均采用原厂配套试剂检测。使用Bio-Rad Laboratories型号为VARIANT Ⅱ全自动血红蛋白电泳仪及其相应的配套试剂（注：受沐川县人民医院检测设备限制，样本由专业配送机构2-8℃冷链运输至乐山市妇幼保健院产前诊断中心进行统一检测，并配备专人整理记录数据）。其中，当被检者结果为MCV≤82fl，MCHC≤27pg，HbA2≤2.4%或HbA2≥3.5%时，分析提示被检者地中海贫血筛查高风险，表明地中海贫血表型阳性[4]。

1.2.3  地中海贫血基因分析 所有基因检测项目同样由专业配送机构2-8℃冷链运输至乐山市妇幼保健院产前诊断中心统一进行检测。对地中海贫血表型阳性的被检者进行地中海贫血基因检测。试剂：采用深圳亚能有限公司提供的α、β地中海贫血基因诊断试剂盒。

1.2.3.1  α地中海贫血的基因检测  统一使用深圳亚能“非缺失型α-地中海贫血基因突变检测试剂盒”，通过PCR和DNA反向点杂交法检测αQS、αCS、αWS三种点突变类型。使用深圳亚能“α-地中海贫血基因检测试剂盒”，通过GAP-PCR法检测最常见的(--SEA)、(-α3.7)、(-α4.2) 3种缺失型α地中海贫血的类型。

1.2.3.2  β地中海贫血的基因检测   统一使用β-地中海贫血基因检测试剂盒，通过PCR反向点杂交法检测常见的17种β-珠蛋白基因突变：CDs41/42、IVS2-654、-28、CDs71/72、CD17、βE、CD43、-29、CD31、-32、CDs14/15、CDs27/28、IVSI-1、IVSI-5、CAP、Int、-30。

1.3  观察指标

    观察沐川地区1708例育龄人群地中海贫血的基因携带率和基因携带类型，进而分析比较沐川地区育龄人群地中海贫血的分布状况，探讨地中海贫血基因检测在育龄人群中的意义。

2结果

2.1沐川地区1708例育龄人群地中海贫血初步筛查分析

沐川地区1708例被检者进行血常规和血红蛋白电泳联合检测，根据血常规结果和血红蛋白高效液相色谱分析结果进行综合分析，初步筛查出地中海贫血表型阳性202例（阳性率11.83%），地中海贫血表型阳性，提示被检者携带地中海贫血基因的可能性较大，建议做进一步的地中海贫血基因检测。

2.2沐川地区1708例育龄人群地中海贫血基因类型分析

沐川地区202例初筛阳性中，经基因检测分析，地中海贫血基因诊断阳性的有72例，基因携带率约为4.22%。其中α地中海贫血有43例，占比2.52%，β地中海贫血26例，占比1.52%，α+β地中海贫血有3例，占比0.18%。

α地中海贫血中，主要以--SEA/αα（20例，46.5%）、-α3.7/αα（18例，41.9%）为主。β地中海贫血中，主要以CD17杂合点突变（12例，46.2%）为主。3例α+β地中海贫血分别是-α3.7/CD43 、-α4.2/CD43、αQSα/CD41/42。

2.3  研究检测出的基因型构成比如下图所示

表1 α地中海贫血基因型及构成比

表2 β地中海贫血基因型及构成比

表3 α+β地中海贫血基因型及构成比

3讨论与展望

地中海贫血是一种广泛分布于全世界的遗传病疾病，不同地区、不同种族、不同年龄间其携带率都存在着明显差异。在我国，地中海贫血同样存在区域和种族的差异，其中以广东、广西地区地中海贫血基因携带率相对较高，根据研究结果显示，四川省α地中海贫血阳性率为1.66%，β地中海贫血阳性率为3.20%[5]。根据沐川地区1708例育龄期人群基因结果显示，α地中海贫血阳性率为2.52%，β地中海贫血阳性率为1.52%，与其相比，α地中海贫血阳性率明显较高，β地中海贫血阳性率略低，说明沐川亦属于α地中海贫血高发区，其中α地中海贫血较为常见的是--SEA/αα、-α3.7/αα两种缺失型地中海贫血，符合此前相关研究四川地区和乐山地区的地中海贫血的报道[6]，沐川地区研究数据也在一定程度上反映了四川总体α地中海贫血以-SEA/αα、-α3.7/αα缺失所致。

研究表明，大多重型的α地中海贫血患儿在怀孕中晚期就出现宫内死亡的情况，而重型的β地中海贫血患儿出生以后大多通过定期输血、除铁以及造血干细胞移植等手段进行治疗，周期长、费用高、痛苦大，给家庭和社会都造成很大的经济和精神负担[7]。通过生育前进行胎儿羊水细胞的地中海贫血基因产前检测，提早发现并终止妊娠，能有效避免重型地中海贫血患儿的出生，符合国家优育的计生政策[8]。     

研究以沐川地区1708例育龄期人群作为筛查对象，统计结果一定程度上反映了本地地中海贫血基因型的检出情况及分布特点，为开展地中海贫血的产前诊断提供了有力的参考依据。作为地中海贫血高发地区，本地医疗机构应积极鼓励准备怀孕的育龄期人群进行产前筛查，加大宣传力度，将遗传咨询和产前诊断作为应对地中海贫血的有效干预手段。结合沐川地区实际有效地开展地中海贫血人群的基因检测，对夫妻双方均为地中海贫血携带者或已经生育过患有地中海贫血胎儿的孕妇进行产前诊断，防止重型地中海贫血患儿的出生，是降低地中海贫血发生最为有效的预防措施[9]。此外，通过对沐川1708例育龄期人群检测结果分析表明血常规结合血红蛋白电泳是临床筛查地中海贫血的常用方法[10]，相关阳性病例结合基因检测，足以实现对本地地中海贫血的准确筛查和诊断，这具有重要的临床意义和参考价值。

参考文献

[1]杨喆,林芬,黄斌,杨立业.全球不同地区α地中海贫血基因型及分布特征[J].汕头大学医学院学报,2020,33(01):60-64.

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[3]刘春利.地中海贫血诊断与基因分型[J].职业与健康,2011,27(02):227-228.

[4]Brancaleoni V, Di Pierro E, Motta I, Cappellini MD. Laboratory diagnosis of thalassemia. Int J Lab Hematol. 2016 May;38 Suppl 1:32-40. 

[5]王霞.广西地中海贫血防治工作亟需国家支持——访全国政协委员、广西医科大学副校长夏宁[J].中国当代医药,2012,19(10):10.

[6]陈丽龙. 四川乐山地区地中海贫血基因突变类型分析研究[J]. 医学检验与临床, 2020, 31(5):4.

[7]李璐琳,黄健云,商璇,黄雪珍,陈健锋,袁明生,郑焕东,黎泳仪.重型β地中海贫血患儿出生的相关因素分析[J].重庆医学,2017,46(18):2538-2540.

[8]黎青, 李少英, 孔舒,等. α-地中海贫血的产前基因诊断[J]. 实用医学杂志, 2006, 22(12):2.

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[10]曹佳淋,崔琼,王健,马玲娣,甘淑芬,林贵斌.血常规联合血红蛋白电泳检测与地中海贫血基因分型的关联及诊断价值[J].实用医技杂志,2021,28(02):141-143.