贵州应用技术职业学院 贵州•福泉 550500
摘要:麦冬多糖是人体护肤品的原料组成部分,其分离纯化方式有分步沉淀法、柱层析法、阴离子交换法、凝胶色谱法等,本研究主要通过高温水对低温乙醇沉淀进行提取的方法获取麦冬粗多糖,首先采用Sephadex G-100分离纯化粗多糖,然后对纯化洗脱后的麦冬多糖质量进行鉴定,同时将麦冬粗多糖成分应用到护肤品中,研究添加麦冬粗多糖后护肤品的安全性、稳定性及功效性,试验结果表明护肤品中加入麦冬粗多糖后具有延缓衰老的作用。
关键词:麦冬多糖;分离纯化;护肤品
中药麦冬属于百合科植物,别名沿阶草、阔叶麦冬、麦门冬、大麦冬等[1],常以干燥块根入药,最早记录在《神农本草经》,成为中草药的上品,各类本草中都有相关记载。从中药理论角度来看,麦冬微苦而味甘,微寒,主要具有润肺清心、养阴生津的功效。在临床上用来治疗肺燥干咳、心烦失眠及肠燥便秘等各种症状[2]。麦冬中含有多种化学成分,研究者从中分离出皂苷、多糖及黄铜等多种化合物,麦冬具有药理作用[1,3]。相关研究表明,麦冬中多糖含量比较高,提取工艺比较简单,且麦冬多糖的免疫活性已成为目前研究的热点方向[4]。麦冬多糖采用口服具有减肥功效[5],成为现代保健品领域的重要绿色添加物。在化妆品方面,麦芽多糖的保水性较好,具有天然保湿成分,粘附性强、伸展性高,还具有延缓衰老及抗氧化等[6]各种功效,可用于可用于唇膏、口红和粉饼膏霜[6]的制备。从已研究报道领域来看,麦冬多糖的提取方式主要是分步沉淀法、柱层析法、阴离子交换法、凝胶色谱法等,其分离方式纯化复杂,标准化工艺化生产未形成。因此,本研究主要针对麦冬多糖分离纯化未成体系等特点,开展对麦冬多糖的分离纯化工艺研究,以此促进传统中药草在护肤品行业的应用。
1 材料与方法
1.1材料与试剂
麦冬粉末(浙江慈溪)、D-无水葡萄糖对照品(纯度≥99%)、乙腈、三乙胺、无水乙醇、95%乙醇、娃哈哈纯化水、脱脂棉。
1.2 仪器
恒温水浴锅、JJ1000电子天平、分析天平、艾朗OBS2200旋转蒸发仪、烘箱、冰箱、离心机、电力搅拌器、Jasco 2080高效液相色谱仪、Shodex SB-805 HQ色谱柱、ELSDAlltech 2000检测器。
2分离纯化
2.1麦冬多糖的制备
称取50g麦冬粉末,加入100mL纯化水,使其充分混合溶解,置于80℃水域下浸提3次,每次浸提时间为30min。浸提结束后将三次浸提溶液混合后经脱脂棉过滤,然后将滤液置于旋转蒸发仪上进行旋转蒸发,浓缩到原体积的1/3时,采用80%乙醇进行醇沉[7],将醇沉溶液置于冰箱静置12h。静置结束后将醇沉溶液置于离心机中进行分离,取离心沉淀于55℃下恒温烘干、备用。
2.2 标准曲线的绘制
为测定提取液中粗多糖的含量,称取1g D-无水葡萄糖纯品,依次配置0.1mg/mL、0.2mg/mL、0.3mg/mL、0.4mg/mL、0.5mg/mL五个浓度梯度的D-无水葡萄糖溶液,采用Jasco 2080高效液相色谱,ELSDAlltech 2000检测器,Shodex SB-805 HQ色谱柱(8mm×300mm,13μm)进行定量分析,流速为0.8mL/min,柱温为30℃,进样量10μL,流动相为乙腈:水:三乙胺(75:25:0.2),监测波长为210nm。以葡萄糖溶液浓度为横坐标,波峰值为纵坐标,绘制标准曲线,Y=BxC+D(R2=0.9999),结果显示在0.1~0.5mg/mL范围内线性关系良好。
2.3 样品浓度测定
称取0.1g已制备的麦冬粗多糖加入10mL纯化水的烧杯中,使其充分溶解,取样10μL,通过高效液相进行分析,将波峰值带入标准曲线得麦冬多糖含量为XXg。
2.4麦冬多糖含量的测定
分别5次吸取麦冬粉末提取液,经2.2方法,有标准曲线可算出麦冬粉末中黄铜的含量,结果见表1。
表1 麦冬粉末中黄铜的含量
名称 | 黄铜含量g/mL | 平均/% | RSD/% | ||||
麦冬粉末 | XC | X | X | X | 0.65 | X | 需小于5% |
3麦冬多糖在护肤品的应用
3.1 配制护肤品
如今许多护肤品中都含有麦冬多糖,其配方主要有以下4类组成。
A类:十六醇、硬脂酸甘油酯、十六醇醚-20级硬脂醇醚-20,占质量分数3%;氢化卵磷脂,占比0.5%;硬脂肪酸甘油酯,占比0.5%;单脂肪酸甘油酯,占比0.5%;牛油果树果油,占比2%;聚二甲基硅氧烷,占比2%;环聚二甲基硅氧烷,占比2%。
B类:娃哈哈纯化水,占比72.85%;甘油,占比3%;丙二醇,占比2%;其他均占比0.05%,主要包含海藻糖、尿囊素、汉生胶、透明质酸。
C类:这一类主要包含麦冬多糖,占比1%;甘草酸二钾,占比0.2%;D-泛醇(浓度为50%),占比1%。
D类:防腐剂,占比0.2%;香精,占比0.1%。
按照文献[6]
的工艺方法:精确称取定量的A类和B类组分,水浴加热至80℃时,将装有的A类物质与B类物质的烧杯分别置于80℃的水浴中,静置15min左右,然后将装有A类物质在电动搅拌的条件下快速加入B类物质烧杯中,使其充分融合,恒温下持续持续搅拌3min,然后边搅拌边降温,在50℃左右时加入C类物质,再次降温至40℃时,加入D类物质,降温搅拌持续10min,直到温度降至室温,取出样品,置于阴凉干燥处备用。
3.2自制护肤品的物性研究
3.2.1 物理性质
将自制好的护肤品分别置于零下25℃的温度下冷冻168h,然后将样品取出,置于50℃的烘箱中持续烘烤72h后取出,温度降至室温后观察处理后的样品与处理前样品外观色泽、纹理未出现异样,用小刀将其缝中切开,观察很切面任然没有任何异样,说明按照此工艺方法自制护肤品符合《中华人民共和国国家标准》(GB/T 18670-2017)[8]且具有良好的物理性质。
3.2.2 药理性质及安全性
从学校选取100名35岁以上的男女教师各50名,16至20岁的男女学生各200名试用此产品,该试用师生均身体健康,经过一星期的试用后,500名师生并未出现任何不适。
500名试用该护肤品的师生中,有125名很少试用护肤品,且多数为男性,使用之后125名师生感觉身体肤质较之前湿润,没有那么干燥,其余师生感觉使用前后并未出现明显现象,说明加入麦冬后,具有一定的保湿功效,根据相关文献报道[6,9],护肤品中加入麦冬多糖,还可发挥延缓衰老的作用,如果经常使用能够明显改善使用者体质。
4.结果与讨论
通过本实验,结合相关文献报道,在护肤品中加入麦冬多糖,可增强护肤品的保湿作用及延缓衰老的作用。虽然本实验选取试验人群条件过于单一,但是也为麦冬多糖的进一步开发利用提供了有力的科学依据。
参考文献
[1]国家药典委员会.中华人民共和国药典[M].中国医药科技出版社,2015.
[2]马军守,别继明,金虹.川麦冬及其须根中多糖和黄酮类有效成分定量分析[J].西南科技大学学报,2008,23(1):83-86.
[3]张力妮.麦冬多糖的修饰、抗氧化活性以及结构的研究[D].陕西,陕西师范大学,2015.
[4]余伯阳,殷霞,张春江.麦冬多糖的免疫活性研究[J].中国药科大学学报,1991,22(5):283-288
[5]杨金颖,孙芳芳.麦冬多糖的药理作用研究[J].天津药学, 2016,28(02):52-55
[6]王刚,董从超,夏明珠.麦冬多糖的提取分离及在护肤品中的应用[J].香料香精化妆品,2015,38-42
[7]周彬,张雪元,李清安等.麦冬多糖提取与纯化工艺研究[J].海峡药学,2021,32(3):42-45.
[8]GB/T 18670-2017.中华人民共和国国家标准[S].
[9]王莹,王华,赵丽等.麦冬多糖的提取工艺优化及其抗氧化活性分析[J]. 2019,40(19):82-87