黄芪白术配伍前后黄芪化学成分分析研究

(整期优先)网络出版时间:2022-08-26
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 黄芪白术配伍前后黄芪化学成分分析研究

蒙明

51900419690825****

摘要:目的 探究黄芪白术配伍前后黄芪化学成分。方法 运用高效液相指纹图谱分析,以加样回收率试验考察HPLC的严谨性。结果 加样回收率试验结果中平均回收率为99.6%,表明HPLC严谨性高。并且,产自内蒙古的黄芪白术配伍中,其黄芪甲苷含量最高。结论 在黄芪白术配伍前后,黄芪主要化学成分是黄芪甲苷,内蒙古产地的药材含量最高。

关键词:黄芪;白术;配伍

在中医辨证论治中,复方配伍是一种具有中医特色的用药模式,通常为相对固定的两种或者是三种配伍。在药物配伍中,有着一定的规律,开展对其的深入探究,可了解其内涵,对临床医生与药师可发挥引导作用。黄芪属于豆科植物,有利尿排毒、补气固表等作用,有效成分为皂苷、甲苷、黄酮类化合物。白术是菊科植物,可发挥健脾益气、止汗安胎等作用。其药用部位是根茎,具有挥发油、倍半萜内酯化合物等。黄芪归脾经、肺经,有补气升阳,益卫固表之功,白术归脾经、胃经,有补气健脾之功[1]。在临床用药中,常将黄芪与白术配伍。本研究对黄芪白术配伍对黄芪甲苷的影响探索。

1.仪器与试药

1.1仪器与试剂

运用高效液相色谱仪。试剂应用甲醇、乙腈。超纯水以及黄芪甲苷对照品。

1.2分析样品

黄芪药用部位是豆科植物蒙古黄芪或者是膜荚黄芪的根。白术药用部位是菊科苍术属植物的根茎。

2.结方法与结果

2.1色谱条件

取10μL样品进样量或者是对照品溶液,运用色谱柱,在乙腈与磷酸的流动相中,流速是1mL/min,柱温为30℃,结合高效液相指纹图谱洗脱程序试验。

2.2对照品溶液制备

取黄芪甲苷对照品2.5mg,置于量瓶中,甲醛溶解,制成0.5mg/mL对照品溶液。

2.3供试品溶液制备

黄芪白术按照5∶3配伍,运用回流法煎煮,先浸泡,之后煮沸,文火45min,取100mL药液,在60℃下减压压缩,定容到50mL,折合柴胡黄芩药物水煎液浓度0.2g/mL。取5mL柴胡黄芩浓缩液以甲醇定容10mL,混合均匀,取2mL离心取上清液在0.45μm超微膜滤过后就可制备黄芪白术配伍供试品溶液。也制备单纯黄芪供试品溶液。

2.4专属性试验

运用已经制备的供试品溶液,利用薄层层析方式对黄芪、白术开展专属性试验,其各自的专属性良好。

2.5线性范围试验

运用对照品溶液,按照相应的量编号并连续进样,开展试验。

2.6中间精密度试验

吸取10μL同一供试品溶液,连续进样5次,测量精密度。

2.7供试品溶液稳定性试验

运用10μL相同的供试品溶液,在配置之后,放置0、2、4、8、16、24、48小时之后进样检测。在48小时之中,供试品溶液是基本稳定的。

2.8重复性试验

使用10μL供试品溶液,在相同色谱条件、相同液相分析仪上检测,重复性良好。

2.9回收率试验

取6份供试品溶液,每份大约2.5g黄芪,制备供试品溶液,并加入对照品溶液,计算加样回收率。加样回收率其结果中,平均回收率是99.6%,RSD为2%,表明加样回收率试验良好,HPLC严谨性高。见表1。

表1 加样回收率试验结果

编号

取样量

原有量

加入量

测得量

回收率

平均回收率

RSD

A

2.515

1.036

1.42

2.360

98.10

99.60

2.0

B

2.523

1.042

1.42

2.377

99.01

C

2.516

1.039

1.42

2.409

99.48

D

2.509

1.036

1.42

2.401

99.13

E

2.518

1.039

1.42

2.432

100.10

F

2.526

1.043

1.42

2.431

101.82

2.10样品测定结果


结合图1-图4可知,在对照品溶液、黄芪供试品溶液、黄芪白术供试品溶液以及缺黄芪阴性对照液之中,缺黄芪阴性对照液并无干扰,黄芪甲苷与其与成分基线分离良好。如表2所示,在3个不同产地中,都显示黄芪白术配伍之后,黄芪的化学成分,黄芪甲苷含量出现一定的增加。其中,药材产地为内蒙古的黄芪甲苷含量为最高。

图1 黄芪阴性对照溶液指纹图谱


图2 黄芪甲苷对照品溶液指纹图谱


图3 黄芪供试品溶液指纹图谱


图4 黄芪白术供试品溶液指纹图谱

表2 黄芪含量测定结果

序号

样品

黄芪甲苷

药材产地

1

黄芪

0.470

内蒙古

2

黄芪-白术

0.513

内蒙古

3

黄芪

0.378

山西

4

黄芪-白术

0.479

山西

5

黄芪

0.418

黑龙江

6

黄芪-白术

0.497

黑龙江

3.讨论

在开展对黄芪甲苷含油量进行测定的方式有薄层扫描法、高效液相色谱-紫外检测法以及高效液相色谱-蒸发光散检测法。因为黄芪甲苷成分是紫外末端吸收,利用高效液相色谱-紫外检测法检测时流动相溶剂干扰严重,基线不够稳定。但,运用高效液相色谱-蒸发光散检测法检测并无紫外吸收或末端吸收成分,不会受到流动相溶剂作用,基线平稳,准确度与灵敏性高,操作简单,在本研究中运用此方式分析。

总之,黄芪白术配伍前后,黄芪甲苷与其与成分的基线分离良好,在内蒙古产地的黄芪白术配伍中,黄芪甲苷含量是最高的。

参考文献:

[1]翟孟凡,贾小强,王泽鹏,张娇.“黄芪-白术”药对治疗功能性便秘的网络药理学机制[J].世界中医药,2021,1610:1514-1519.薛老师  15226912038成都市武侯区人民南路4段27号商鼎国际1号楼B座25楼(1本)