重庆市万州区长岭镇卫生院检验科,重庆 万州 404000
【摘要】目的:分析化学发光发和酶联免疫吸附实验对乙肝五项的检测结果。方法:选择2021年3月至2022年3月期间做乙肝五项检测的200份血清标本,将所有血清标本分成两份,分别采用化学发光法和酶联免疫吸附法进行检测,比较两种方法的检测结果(HBsAg阳性率、HBsAb阳性率、HBeAg阳性率、HBsAb阳性率、HBeAb阳性率)。结果:化学发光法的HBsAg阳性率、HBsAb阳性率、HBeAg阳性率、HBsAb阳性率、HBeAb阳性率高于酶联免疫吸附实验,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:在乙肝五项检测中,化学发光法的检测阳性率高于酶联免疫吸附实验,值得推广。
【关键词】乙肝五项;化学发光法;酶联免疫吸附法;检测结果
乙型病毒性肝炎属于我国常发的病毒性肝炎,该病主要是因为乙肝病毒感染或者发生增殖引发的,传染性较强。根据2019年的一项传染病分析报告表明[1]:国内乙肝病毒的携带者数量已经超过9300万,并且这个数量也在不断提升。目前,国内通过强化筛查乙肝血清标志物以及接种疫苗两种方法对乙肝病情传播进行抑制,因此,乙肝五项成为了乙肝疾病的主要诊断依据。临床中一般会采用化学发光法以及酶联免疫吸附法检测乙肝五项。本文,作者选择2021年3月至2022年3月期间做乙肝五项检测的200份血清标本,旨在分析化学发光法和酶联免疫吸附法的检测结果,现做出如下阐述。
1.1一般资料
选择2021年3月至2022年3月期间做乙肝五项检测的200份血清标本,将所有血清标本分成两份,其中男性血清标本共89份,女性血清标本共111份,血清来源的平均年龄为(40.13±4.59)岁。
1.2方法
化学发光法:仪器为深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司的,型号CL-900i;
采集清晨空腹状态下检测者的肘部静脉血5ml,以4000r/min的速度在室温下离心五分钟,收集血清标本。
酶联免疫吸附法:取出试剂盒,盒中包括试剂、微孔反应条,测试微孔板需要设置阳性对照组、阴性对照组以及空白对照组,然后使用封片对微孔反应条进行封锁,将微孔反应条放置在37℃的温度下恒温水浴一小时,然后将微孔反应条中液体除去,使用洗涤液反复冲洗微孔反应条,然后取出50μlA液以及B液,将其滴入到反应条的各个孔中,进行封板,充分混合后,放置在37℃的温度下恒温水浴一小时,水浴半小时以后,将终止液置入其中,在450mm下评估OD值,血清值超过临界值为阳性。
化学发光法检测流程:①进入样本申请界面,根据测试需要输入样本编号、样本架编号、位置号、样本类型、备注等信息;②选中测试项目,在项目选项中选择样本杯类型,输入重复次数等信息;③准备测试样本并正确放置后,点击启动按钮开始测试。化学发光免疫分析仪会依次执行以下操作:样本处理系统将样本架传送到吸样位;反应杯装载及调度系统将反应杯从上料区加载到加样位;加样系统完成 50 μL 样本的分注及样本针的清洗;反应混合液由反应液混匀系统对其进行混匀,并在反应盘中进行第一次孵育,孵育时间为 20 分钟,温度为 37℃;孵育完成后,磁分离系统使用化学发光分离液对反应混合液进行清洗分离;试剂处理系统提供测试所需的试剂,并将每个试剂混匀后送到吸试剂位等待吸取;反应混合液由反应液混匀系统对其进行混匀,并在反应盘中进行第二次孵育,孵育时间为 20 分钟,温度为 37℃;孵育完成后,磁分离系统使用化学发光分离液对反应混合液进行清洗分离;底物系统向完成磁分离的反应杯中注入经过预热的化学发光底物液,混匀、37℃孵育 6 分钟、等待光测;光测反应系统将每个反应杯送至信号采集位采集信号,用以计算发光值;计算出样本中的乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)的含量,判断样本的阴阳性。样本测试的功能和操作方法,参见化学发光免疫分析仪使用说明书。
1.3观察指标
比较两种方法的检测结果(HBsAg阳性率、HBsAb阳性率、HBeAg阳性率、HBsAb阳性率、HBeAb阳性率)。
1.4统计学处理
采用SPSS 21.0对数据处理,使用X2/t校检;P<0.05表示有统计学意义。
化学发光法的HBsAg阳性率、HBsAb阳性率、HBeAg阳性率、HBsAb阳性率、HBeAb阳性率高于酶联免疫吸附实验,差异有统计学意义(P<0.05),见表1。
表1 两种方法的检测结果比较[n(%)]
组别 | 份数 | HBsAg阳性率 | HBsAb阳性率 | HBeAg阳性率 | HBsAb阳性率 | HBeAb阳性率 |
化学发光法 | 100 | 96(96.0) | 95(95.0) | 97(97.0) | 96(96.0) | 97(97.0) |
酶联免疫法 | 100 | 81(81.0) | 82(82.0) | 85(85.0) | 82(82.0) | 83(83.0) |
X2 | - | 11.054 | 8.303 | 8.791 | 10.010 | 10.889 |
P | - | 0.001 | 0.004 | 0.003 | 0.002 | 0.000 |
乙型肝炎患者的早期临床症状无特异性,具有较低的检出率,误诊率相对较高。乙型肝炎病毒感染主要表现为慢性进展性,随着疾病的进展,患者容易发展为肝功能衰竭、肝硬化,甚至是肝癌,严重威胁了患者的身体健康以及生命安全[2]。所以,临床中对于乙型肝炎病毒感染的早期准确诊断是十分重要的。
乙肝五项是乙肝的主要诊断依据。酶联免疫吸附法的优势包括操作简单、快捷,可以对乙肝病毒以及核心抗体定性检测,但是,有相关文献表明:酶联免疫吸附试验法的灵敏度较低,并且检测结果和试剂盒的工艺效果、仪器校准、质量具有密切联系,稳定性不佳。近些年来,随着医疗技术的快速发展,化学发光酶免疫分析法逐渐替代了酶联免疫吸附试验法,前者更加广泛的应用于乙肝病毒以及核心抗体定性检测中,并且化学发光酶免疫分析法的优势众多,包括标记物有效期更长,来源广泛,检测简单,灵敏度高,不会产生放射性污染,检查价格较低[3]。本研究结果表明:观察组的乙肝五项阳性率高于对照组。
综上所述,乙肝五项检测中,应用化学发光法进行检测,可以得到更高的检测阳性率,值得推广。
参考文献
[1]苏德信,李海荣,梁美霞,等.乙肝五项实施电化学发光法和酶联免疫吸附试验检测结果对比分析[J].智慧健康,2021,7(11):7-9.
[2]汪媛,常中宝,储晓敏,等.电化学发光法,化学发光法与酶联免疫吸附试验检测梅毒抗体效果对比分析[J].医学动物防制,2020,36(7):712-714.
[3]周明,王静,秦柯君,等.电化学发光法与酶联免疫吸附试验检测乙型肝炎病毒标志物的临床研究[J].实用医技杂志,2022,29(3):311-313.