HPLC法测定盐酸非索非那定胶囊的含量

 HPLC法测定盐酸非索非那定胶囊的含量

杨洁*，朱笑，王兰

（江苏天士力帝益药业有限公司 质量控制部，江苏 淮安 223003）

摘要 目的 使用高效液相色谱法测定盐酸非索非那定胶囊的含量。方法 使用色谱柱，DIKMA，C18，250mm*4.6mm，5μm；以乙腈—醋酸铵溶液（取醋酸铵3.854g，加水溶解并稀释至1000ml）（34：66）为流动相；柱温为30℃；流速为每分钟1.0mL；检测波长为210nm；进样量为20μl。结果 盐酸非索非那定在浓度0.0500 mg/ml～0.1499mg/ml的范围内线性关系良好（R2= 0.9999）；准确度加标回收率平均值为101.4%（RSD = 0.4%，n = 9）；常温下贮存，含量样品溶液20小时内稳定性良好。结论 本测定方法适用性高、准确可靠，适用于盐酸非索非那定胶囊含量的测定。

关键词：含量；盐酸非索非那定胶囊；高效液相色谱法

Determination of Fexofenadine Hydrochloride Capsules by HPLC

Yang Jie*, Zhu Xiao, Wang Lan

(Quality Control Department, Jiangsu Tasly Diyi Pharmaceutical Co., Ltd., Huaian, Jiangsu 223003)

Abstract: ObjectiveTo determine the content of fexofenadine hydrochloride capsules by high performance liquid chromatography.Using chromatographic column,DIKMA,C18, 250mm*4.6mm,5μm；Acetonitrile-ammonium acetate solution（Take 3.854g of ammonium acetate, dissolve in water and dilute to 1000ml）（34：66）as mobile phase were used；The column temperature was 30℃;Flow rate was 1.0mL per minute;The detection wavelength was 210nm and the injection volume was 20μl.ResultsFexofenadine hydrochloride had a good linear relationship in the concentration range of 0.0500 mg/ml ~ 0.1499 mg/ml（R2= 0.9999）;The average accuracy recovery rate was 101.4%（RSD = 0.4%，n = 9）;Stored at room temperature,the content sample solution had good stability within 20 hours.ConclusionThe method has high applicability,accuracy and reliability,and is suitable for the determination of the content of fexofenadine hydrochloride capsules.   

Key words:content;fexofenadine hydrochloride capsules;HPLC

作者简介：杨洁（1989-），女，黑龙江人，化工工程师，学士学位，主要从事药品检验分析工作，电话：15950374172，E-mail：yangjie185@tasly.com。

*通讯作者

盐酸非索非那定（Fexofenadine Hydrochloride），化学名为α，α-二甲基-4-[1-羟基-4-[4-(羟基二苯甲基)-1-哌啶基]-丁基]-苯乙酸盐酸盐，是一种选择性H1受体拮抗活性的抗组胺药，可用于过敏性鼻炎及慢性特发性尊麻疹的治疗[1]。其中非索非那定是特非那定的活性代谢产物，据国外文献报告，其安全性明显优于特非那定，而疗效与特非那定相仿。该药早在全球 多个国家上市，是目前国际上应用最广泛的抗组胺药之一[4]。盐酸非索非那定的制剂剂型主要为片剂和胶囊剂，其中胶囊剂于1996年7月美国FDA批准上市[1]。本文以盐酸非索非那定胶囊为例，采用高效液相色谱法测定其含量，保证产品的质量得以有效控制。

1 仪器与试药

1.1 仪器 Waters e2695/2489高效液相色谱仪；MSA125P赛多利斯电子天平；MS204TS梅特勒电子天平；DIKMA色谱柱，规格：C18，250×4.6mm，5μm。

1.2 试剂与试药 醋酸铵，国药集团化学试剂有限公司，AR；乙腈，Merck，HPLC；盐酸非索非那定，池州东升药业有限公司，批号：01；盐酸非索非那定胶囊，自制，批号：02，03，04。

2 方法

2.1 色谱条件与系统适用性试验

照高效液相色谱法（中国药典2020版四部通则0512）试验，以DIKMA，C18，250mm*4.6mm，5μm为色谱柱，以乙腈—醋酸铵溶液（取醋酸铵3.854g，加水溶解并稀释至1000ml）（34：66）为流动相；柱温为30℃；流速为每分钟1.0mL；检测波长为210nm；进样量为20μl。取对照溶液20μl注入液相色谱仪，调节仪器灵敏度，理论塔板数按盐酸非索非那定峰计算应不低于6000，盐酸非索非那定峰与相邻杂质峰的分离度应符合要求。

2.2 溶液配制

对照品溶液：取盐酸非索非那定适量，精密称定，加流动相溶解并稀释制成每1ml中含约0.1mg的溶液，作为对照品溶液。

供试品溶液：取盐酸非索非那定胶囊20粒，倾出内容物，混合均匀，取约相当于盐酸非索非那定50.0mg，精密称定，置50ml容量瓶中，加流动相适量溶解，并加流动相稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液作为贮备溶液，精密量取贮备溶液5ml，置50ml容量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液。

2.3 测定法

精密量取供试品溶液和对照品溶液各20μl，分别注入液相色谱仪，测定，记录色谱图。按外标法以峰面积计算，即得。

3 方法学验证

3.1 专属性试验

空白辅料溶液：根据批处方配制相当于主成分（盐酸非索非那定）50mg的空白辅料溶液，摇匀，滤过，取续滤液备用。

对照品溶液：取盐酸非索非那定适量，精密称定，加流动相溶解并稀释制成每1ml中含约0.1mg的溶液，作为对照品溶液。

供试品溶液：取盐酸非索非那定胶囊20粒，倾出内容物，混合均匀，取约相当于盐酸非索非那定50.0mg，精密称定，置50ml容量瓶中，加流动相适量溶解，并加流动相稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液作为贮备溶液，精密量取贮备溶液5ml，置50ml容量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液。

取空白溶液（流动相）、空白辅料溶液、对照品溶液、供试品溶液分别进样，记录色图谱（见图1~图4）。

图1 空白溶液

图2 空白辅料溶液

图3 对照品溶液

图4 供试品溶液

结果表明，空白溶剂与空白辅料不干扰盐酸非索非那定胶囊含量的检测，盐酸非索非那定胶囊含量方法专属性良好。

3.2 回收率试验

对照品溶液：取盐酸非索非那定（原料药）约10mg，精密称定，置100ml量瓶中，加流动相适量溶解并稀释至刻度，摇匀，作为对照品溶液。

加标供试品溶液：取盐酸非索非那定空白辅料适量（约相当于盐酸非索非那定50mg）（9份），精密称定，每3个为一组，分别加入盐酸非索非那定原料药约40mg 、50mg、60mg各三份（即相当于80%、100%、120%的样品浓度），分别置于9个50ml容量瓶中，加流动相溶解并稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液作为贮备溶液，精密量取贮备溶液5ml，置50ml容量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，备用。取上述溶液分别进样20μl，依法计算，结果见下表（表1）。

表1 盐酸非索非那定回收率试验结果

结果表明：盐酸非索非那定胶囊含量测定分析方法回收率良好，方法准确可靠。

3.3 精密度试验

3.3.1重复性

对照品溶液：取盐酸非索非那定约10mg，精密称定，置100ml量瓶中，加流动相适量溶解并稀释至刻度，摇匀，作为对照品溶液。

供试品溶液：按“2.2”项下配制供试品溶液6份。重复测定6份供试品的含量并计算含量的RSD。结果见下表（表2）。

表2，重复性测定结果

结果表明：盐酸非索非那定胶囊含量分析方法重复性良好。

3.3.2 中间精密度

由不同人员，于不同时间，配制对照品溶液1份及供试品溶液6份，按含量测定条件，在不同仪器上分别进样，重复测定6份样品含量，考察不同人员、不同仪器、不同日期盐酸非索非那定胶囊含量的均值及RSD（%），结果见下表（表3）。

表3，中间精密度测定结果

结果表明：盐酸非索非那定胶囊含量分析方法中间精密度良好。

3.4 线性与范围

取盐酸非索非那定约50mg，精密称定，置50ml容量瓶中，加流动相适量溶解，并加流动相稀释至刻度，摇匀，作为线性标准贮备液。精密量取对照品贮备液2.5ml、4.0ml、5.0ml、3.0ml、3.0ml，分别置50ml、50ml、50ml、25ml、20ml量瓶中，用流动相稀释至刻度，摇匀，作为线性1、线性2、线性3、线性4、线性5溶液。按含量测定方法，精密量取上述溶液各20µl分别注入液相色谱仪，记录色谱图，测定峰面积，以样品浓度为横坐标，以峰面积为纵坐标，绘制标准曲线，计算回归方程。线性回归方程：y = 2E+07x - 9375.2，相关系数R2= 0.9999。结果表明：盐酸非索非那定在浓度0.0500 mg/ml～0.1499mg/ml的范围内，线性关系良好。

3.5 溶液稳定性

取对照品溶液与供试品溶液，分别于0h、2h、4h、8h、12h、20h进样，盐酸非索非那定峰面积的RSD为0.42%，结果表明：盐酸非索非那定胶囊含量供试品溶液在常温下贮存，20小时内稳定性良好。

3.6 耐用性试验

按“2.1,2.2,2.3”含量测定方法，分别使用不同色谱柱，不同流速1.0±0.1ml/min，不同测定波长（210±2nm）下，配制对照品溶液和供试品溶液分别进样，计算8份供试品的含量及RSD值，结果见下表（表4）。

表4，耐用性测定结果

结果表明：盐酸非索非那定胶囊含量测定方法耐用性良好。

3.7 样品测定

取三批盐酸非索非那定胶囊，按照“2.1,2.2,2.3”项下方法测定含量，结果分别为100.35%，100.56%，99.86%。

4 结论

本文采用高效液相色谱法[1]-[3]测定盐酸非索非那定胶囊的含量，方法简单、专属，数据准确可靠，为盐酸非索非那定胶囊含量的质量控制提供有力支持。

参考文献

[1] 高立军, 王维贤, 梅兴国. 高效液相色谱法测定盐酸非索非那定片的含量[J].科学技术与工程,2004, 4(11):979-981.

[2] 洪芳. 高效液相色谱法测定盐酸非索非那定片中的有关物质A[J].海峡药学,2022 ,34(5):60-63

[3] 吴杏掩, 廖华卫. HPLC法测定盐酸非索非那定缓释微丸胶囊的含量[J].中国药师,2013,16(11):1704-1705

[4] 高铎, 张宏誉, 徐为人.盐酸非索非那定胶囊治疗季节性过敏性鼻炎疗效观察[J].天津医科大学学报，2008,14(1):41-43

[5] 国家药典委员会编 . 中国药典(2020 年版四部)〔S〕. 北京:中国医药科技出版社，2020，480-483.