遗传性丙酮酸激酶缺乏症的诊断思路

遗传性丙酮酸激酶缺乏症的诊断思路

李津杞 ,查占山

海军军医大学第一附属医院 200433

丙酮酸激酶缺乏症（pyruvate kinase deficiency，PKD）是常染色体隐性遗传病，PKD患者红细胞的变形能力差，通过脾脏时易被吞噬，引起血管外溶血，长期可导致溶血性贫血和脾脏肿大[1]。病情严重程度不同，轻症仅偶发溶血；重症患者甚至引发胎儿水肿导致宫内死亡。有很多因素影响PK活力的检测[2]。因此，PKD的诊断仍面临挑战。

1 材料与方法

1.1  研究对象及诊断标准 2015年6月到2021年10月经本院溶血实验室确诊的69例PKD患者作为PKD组，同期69例健康体检者为正常对照组。。

1.2实验仪器及试剂 离心机（Thermo,ST-40R）、紫外可见分光光度计（756-UV）、恒温循环水槽（DC-0530）；PK酶试剂按照《溶血性疾病》所述配制[3]。

1.3实验方法

1.3.1  病史采集 收集患者病史资料及实验室检测数据。

1.3.2  酶活性检测 根据国际血液学标准化委员会（International Committee for Standardization in Haematology，ICSH）推荐的标准化酶测定法[4]。

1.4  统计学方法  通过SPSS26统计软件分析,符合正态分布的计量资料以x±s表示，组间比较行独立样本t检验。P＜0.05 为差异有统计学意义。

2 结果 PKD组与正常组临床指标的比较  如表1，PKD组与对照组的PK活性、红细胞(RBC)计数、Ret相比，均有统计学意义；而两组的血红蛋白(Hb)、红细胞压积(Hct)、平均红细胞体积(MCV)、平均红细胞血红蛋白含量(MCH)、平均红细胞血红蛋白浓度(MCHC)、红细胞分布宽度(RDW)、血小板计数(PLT)、幼稚网织红细胞比率(IRf)结果相比，均无统计学意义。

表1正常组与PKD组临床指标比较

3 讨论

PKD患者临床表现差异性大，贫血严重程度不一，重症患者在新生儿时期表现高胆红素血症，长年依赖输血，而本次研究中的PKD患者大部分为轻度贫血，处于溶血性贫血代偿期，虽然这类患者平时不需要输血，但在急性感染、药物或妊娠时会加重溶血，此时需要紧急输血，因此PKD的诊断对患者而言十分必要。PKD的常用诊断方法是酶活力定量检测。但是受外界因素影响较大，例如标本中有未清除的白细胞和血小板，Ret增高以及患者近期输血等，均可造成实验结果呈假阴性而漏诊[5]。因此确诊时不能仅仅依赖PK活力，通常方法是PK活力结合病史分析。

采集病史信息时，患者通常有慢性血管外溶血表现，比如贫血、黄疸、脾肿大，血涂片镜下见红细胞深染、棘球红细胞或有核红细胞。虽然以上临床表现并不是PKD的特征性诊断标准，但可作为提示指标[6]。除此之外，病史提示有家族史或家族成员有慢性溶血性贫血史，也可作为辅助诊断指标。综上所述，PKD的确诊需综合分析临床溶血表现、家系筛查和酶活力检测。

参考文献

[1]Grace R F, Bianchi P, van Beers E J, etal. Clinical spectrum of pyruvate kinase deficiency: data from the Pyruvate Kinase Deficiency Natural History Study[J]. Blood, The Journal of the American Society of Hematology, 2018, 131(20): 2183-2192.

[2]Bianchi P, Fermo E, Glader B, et al. Addressing the diagnostic gaps in pyruvate kinase deficiency: consensus recommendations on the diagnosis of pyruvate kinase deficiency[J]. American journal of hematology, 2019, 94(1): 149-161.

[3]李津婴．实验室诊断[M],溶血性疾病．李津婴，万树栋．上海：复旦大学出版社， 2008：303—316．

[4]Fañanas-Baquero S, Quintana-Bustamante O, Dever D P, et al. Clinically relevant gene editing in hematopoietic stem cells for the treatment of pyruvate kinase deficiency[J]. Molecular Therapy-Methods & Clinical Development, 2021, 22: 237-248.

[5]Grace R F, Mark Layton D, Barcellini W. How we manage patients with pyruvate kinase deficiency[J]. British journal of haematology, 2019, 184(5): 721-734.

[6]Al-Samkari H, Van Beers E J, Kuo K H M, et al. The variable manifestations of disease in pyruvate kinase deficiency and their management[J]. haematologica, 2020, 105(9): 2229.