弹性纤维染色过程经验探讨和临床应用价值

弹性纤维染色过程经验探讨和临床应用价值

张翔，齐彬，陈超鹏，周平安

广东省农垦中心医院，广东湛江，524002

摘要：在临床病理诊断中，HE染色常用于疾病的诊断，但对于一些特殊类型的组织结构中需要被准确的鉴别出来还需要加入一定的特殊染色方法，比如弹性纤维染色，通过弹性纤维染色，能将弹性纤维分布情况表达出来，比如在肺癌的诊断中对于肿瘤是否突破肺膜浸润周围组织及浸润深度需要做出一个精准的判读，我科经过了一段时期的临床实践摸索，将弹性纤维染色过程中的一些注意事项和临床应用价值的一些经验和体会总结如下。

关键词：弹性纤维染色；注意事项；应用；

一、弹性纤维的分布和染色机制

（一）分布：弹性纤维广泛分布于全身的各个部位，尤其是呼吸系统，皮肤系统和循环系统为多，在肺组织中，弹性纤维能够对肺泡的结构和功能起到一定的作用，是肺进行呼吸运动的结构基础，但是，HE染色后细胞核为蓝色，其它成分均染成深浅不同程度的红色，难以分辨弹性纤维和胶原纤维，通过弹性纤维染色，能够将弹性纤维分布情况表达出来，在肺癌不同病理亚型的诊断中提供强有力的支撑。

（二）染色机制：带负电荷的弹性蛋白与带弱正电荷的燃料通过非极性吸附上色，维多利亚蓝的主要成分为含有丰富的二硫键的糖蛋白，强嗜酸性易与染色液中的碱基结合，特异性着色弹性纤维，胶原纤维一般不着色。

二、染色过程

（一）材料：使用广州安必平医药科技股份有限公司弹性纤维染色液配套试剂盒。

（二）染色过程及注意事项：组织送到病理科后及时的切开固定是关键的第一步，保证充足的固定时间后，取材（厚度控制在3mm以内），脱水，包埋，切片，放入65℃烤箱烘烤1h，此时我们应该准备两个脱蜡缸，缸内准备好新鲜的二甲苯，每缸浸入5min即可，然后放入新鲜无水酒精内浸泡1分钟脱二甲苯，缓慢流水冲洗两分钟；0.5%高锰酸钾水溶液氧化5min；水洗30s；亚硫酸氢钠5滴1min；75%乙醇冲洗，然后浸入维多拉亚蓝染液中8-24h；75%酒精冲洗快速洗脱多余的染液；流水冲洗1min；滴染核固红染液10min，无水乙醇脱水，二甲苯透明，中性树胶封固。

（三）结果：弹性纤维呈蓝色，细丝样波浪状曲折弯曲，胶原纤维红色，肌纤维和红细胞呈红色（图1）。HE染色图中，弹性纤维均呈不同程度的红色（图2）

图片1                                 图片2

在HE染色的基础上，将弹性纤维与免疫组化结合起来进行判读，免疫组化镜下观察肿瘤细胞呈褐色（图3），三者对比鲜明，更加直观的显示肿瘤细胞是否突破弹性纤维层，

阳性率更高。

图片3

三、弹性纤维的临床应用价值

（一）弹性纤维在肺癌中的应用：多因素分析显示脏层胸膜受侵(P1/P2)是独立的预后因素【1】。弹性纤维主要由弹力蛋白和微原纤维组成，分布在肺泡间隔、皮下及大血管壁，形成人肺泡结构主要的骨架，在维持肺内支气管及肺泡的结构和功能中发挥重要作用【2】。侵犯脏层胸膜（VPI）可能影响非小细胞肺癌（NSCLC）的生存，脏层胸膜受侵犯是肺癌术后最重要的不良预后因素之一【3】。王玉蓉、孟刚等关于弹性纤维在肺腺癌间质中的增生程度与其预后的相关性研究，分析弹性纤维在肺腺癌组织中分布量的多少，讨探其与肺腺癌患者临床特征及预后的关系，发现弹力纤维Ⅲ级的生存率显著高于Ⅰ级、Ⅱ级，提示在肺腺癌组织中弹力纤维明显增生的患者预后较好【4】。

（二）弹力纤维在心血管疾病中应用：因为动静脉管壁中广泛存在弹性纤维，弹性纤维明显减少可见于动脉粥样硬化的血管壁中，主动脉夹层的血管壁中，任何可能导致主动脉中膜弹性纤维破坏的因素都有可能导致主动脉夹层的发生【5】。此外，心内膜纤维化，由于缺乏特异性诊断指标和临床特异性治疗，常常导致临床上的忽视，大多数发现病例都是在尸检病例中发现的。

弹性纤维染色是未来一个潜在的研究方向，随着特殊染色工艺的不断改进，一系列弹性纤维染色试剂得到了改进，使其更加方便、准确；此外，多种特殊染色和免疫组化方法结合使用，传统的方法与新技术的互补应用可以使陈旧的技术赋予新的生命。

参考文献

【1】雷光,曾亮,陈雪,等.弹性纤维染色在恶性肿瘤中的研究进展.临床与实验病理学杂志.2016,32(9):1037-1040.

【2】谢惠康,查俊彦,赵力澜,等.弹性纤维在腺泡型及乳头型为主腺癌中的表达及其与患者预后的相关性.中华病理学杂志.2016,45(6):375-380.

【3】Ichinose Y,Yano T,Asoh H,et al.Prognostic factors obtained by a pathologic examination in completely resected non small cell lung cancer.An analysis in each pathologic stage.J Thorac Cardiovasc Surg.1995,110:601-605.

【4】王玉蓉,孟刚.弹力纤维在肺腺癌组织中的分布量与患者临床特征和预后的关系.安徽医学.2018,39(8):934-935.

【5】李文洁,颜秉翔.弹力纤维染色的研究进展.中西医结合心血管病电子杂志.2020,8(24),38.