山茱萸提取物对人前列腺癌PC3细胞增殖、凋亡及Bcl-2和miR-182的影响

(整期优先)网络出版时间:2022-12-13
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摘要目的探讨山茱萸提取物对人前列腺癌PC3细胞增殖、凋亡及B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)和miR-182的影响。方法制备山茱萸提取物,根据MTT法确定山茱萸提取物对人前列腺癌PC3细胞的半数抑制浓度。实验分为阴性对照组、阳性对照组、低剂量组、中剂量组和高剂量组。阴性对照组细胞不进行处理;阳性对照组采用终浓度5 mg/L的顺铂干预细胞;低剂量组、中剂量组和高剂量组分别用终浓度为20、40、80 mg/L的山茱萸提取物干预细胞,48 h后,采用流式细胞术检测各组PC3细胞的凋亡率。采用实时荧光定量PCR检测各组PC3细胞中miR-182、Bcl-2和促凋亡因子(Bax) mRNA水平,同时采用蛋白印迹法检测各组PC3细胞中Bcl-2和Bax蛋白水平。结果随着山茱萸提取物浓度增加,PC3细胞的增殖率降低(P<0.05)。当山茱萸提取物浓度为80 mg/L时,增殖率最先降到50%左右,故选择80 mg/L作为半数抑制浓度。与阴性对照组比较,其余各组细胞的凋亡率、miR-182和Bax mRNA水平、Bax蛋白水平增加,Bcl-2 mRNA和蛋白水平降低,差异均有统计学意义(均P<0.05);与阳性对照组比较,低、中、高剂量组细胞的凋亡率、miR-182和Bax mRNA水平、Bax蛋白水平降低,Bcl-2 mRNA和蛋白水平增加,且随着山茱萸提取物剂量增加,各指标呈剂量反应关系,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论山茱萸提取物可诱导PC3细胞凋亡,抑制PC3细胞增殖,其机制可能与山茱萸提取物通过上调miR-182表达进而抑制Bcl-2活性有关。