摘要目的研究脐带间充质干细胞上清液对脂多糖(lipopolysaccharide, LPS)诱导的急性肺损伤(acute lung injury, ALI)的保护作用及机制。方法选择6周龄C57BL/6雄性小鼠共40只,随机数字法分为假手术(sham)组,LPS模型组,LPS+人脐带间充质干细胞上清液(HucMSC-cm)(LPS+cm)治疗组,LPS+HucMSC-cm+Compound C(LPS+cm+cc)干预组,每组10只。通过气管内注射LPS 5 mg/kg构建ALI模型,4 h后予以气管内注射HucMSC-cm 50 μL/只构建治疗组;干预组在LPS及HucMSC-cm前30 min予腹腔注射Compound C 15 mg/kg;72 h后留取小鼠外周血检测中性粒细胞比例,并处死小鼠留取肺组织。通过苏木精-伊红染色检测小鼠肺组织病理学改变,Western Blot及免疫组化法分析肺组织中IL-6、ICAM-1、VCAM-1和磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶(phosphate AMP-activated protein kinase, p-AMPK)的表达。体外培养人肺微血管内皮细胞(HuLEC-5a),将细胞分为三组:control组、LPS组(10 μg/mL)、LPS+HucMSC-cm组。处理24 h后,Western Blot检测p-AMPK及AMPK蛋白表达水平,RT-PCR检测IL-6及IL-8的mRNA表达。多组间比较采用单因素方差分析,两组比较采用Tukey法检验。结果与sham组相比,LPS组小鼠肺组织充血水肿加重,肺间隔增厚和炎性细胞浸润增多,肺组织IL-6(P=0.003)、ICAM-1(P<0.001)及VCAM-1(P=0.001)蛋白水平明显上升,p-AMPK蛋白水平表达下降(P=0.013),外周血中性粒细胞比例上升(P<0.001),LPS+HucMSC-cm组肺组织充血水肿及病理学损伤较LPS组得到改善,肺组织中IL-6(P=0.003)、ICAM-1(P=0.001)及VCAM-1(P=0.006)蛋白水平下降,p-AMPK蛋白水平表达上升(P=0.002),外周血中性粒细胞比例下降(P<0.001),而LPS+cm+cc组肺组织病理学损伤较LPS+HucMSC-cm组再次加重,肺组织IL-6、ICAM-1及VCAM-1蛋白水平明显上升,p-AMPK蛋白水平表达下降,免疫组化法得到与蛋白相一致的结果。体外实验中,LPS处理后,IL-6(P<0.001)及IL-8(P=0.027)的mRNA表达较control组上升,且p-AMPK蛋白水平下降(P=0.005);LPS+HucMSC-cm组较LPS组IL-6(P=0.003)及IL-8(P=0.002)的mRNA表达下降,p-AMPK蛋白水平上升(P=0.003)。结论人脐带间充质干细胞上清液通过激活AMPK活性改善LPS诱导的ALI。