多形性腺瘤基因样蛋白2对前列腺癌细胞增殖、转移和上皮-间充质转化的影响

(整期优先)网络出版时间:2022-12-13
/ 1
摘要目的观察多形性腺瘤基因样蛋白2(PLAGL2)在前列腺癌细胞中的表达水平及其生物学功能。方法采用实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)和蛋白质印迹法(Western blot)技术检测正常前列腺上皮细胞和前列腺癌细胞中PLAGL2 mRNA和蛋白的相对表达水平。在前列腺癌PC-3细胞中转染si-PLAGL2,将细胞分为对照组和转染组,采用RT-qPCR和Western blot验证转染效率。分别采用细胞克隆形成实验和细胞计数试剂盒(CCK-8)实验检测细胞增殖能力;采用Transwell实验、细胞划痕试验检测细胞迁移和侵袭能力;采用Western blot检测磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)、N-钙黏蛋白(N-cadherin)、E-钙黏蛋白(E-cadherin)和波形蛋白(Vimentin)相对表达水平;结果应用SPSS 26.0统计软件分析。结果RT-qPCR和Western blot结果表明DU-145和PC-3细胞中PLAGL2相对表达水平高于正常前列腺上皮细胞(t=7.296和15.918、9.180和3.561,P<0.05);另外转染组细胞PLAGL2 mRNA和蛋白相对表达水平均低于对照组(t=11.667、13.321,P<0.05);细胞克隆形成实验结果表明转染组细胞克隆形成数目低于对照组(t=6.786,P<0.05);CCK-8实验中,转染组细胞在24、48、72 h的增殖活性均低于对照组(t=40.113、3.842、14.698,P<0.05),Transwell迁移和侵袭实验中,转染组细胞迁移和侵袭数目均低于对照组(t=15.707、14.721,P<0.05);划痕试验结果表明转染组细胞24 h相对迁移率低于对照组(t=6.795,P<0.05);另外Western blot结果表明转染组细胞p-Akt、N-cadherin和Vimentin的表达明显降低(t=10.250、22.380、5.863,P<0.05),而E-cadherin显著增高(t=8.900,P<0.05),以上差异均有统计学意义。结论PLAGL2在前列腺癌细胞中异常高表达,且可能通过Akt信号通路影响前列腺癌细胞的增殖、转移和上皮-间充质转化过程。