当归芍药散对血管性痴呆模型大鼠认知功能的影响及机制

(整期优先)网络出版时间:2022-12-13
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摘要目的探讨当归芍药散(Danggui Shaoyao San,DSS)对血管性痴呆(vascular dementia,VD)大鼠认知功能的影响及其机制。方法50只SPF级雄性SD大鼠(6~7周龄)按照随机数字表法分为假手术组、模型组、尼莫地平组(9.45 mg·kg-1)、DSS低剂量组(1.6 g·kg-1)和DSS高剂量组(6.4 g·kg-1),每组10只。采用双侧颈总动脉永久性结扎法建立VD大鼠模型;造模7 d后大鼠按照分组分别灌胃给药,1次/d,连续28 d。采用Morris水迷宫实验检测VD大鼠的学习记忆能力;ELISA法检测大鼠海马组织氧化应激产物丙二醛(malondialdehyde,MDA)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)和活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平;Western blot法检测海马组织凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax、Caspase-3及瘦素受体/糖元合成激酶3β/微管相关蛋白tau(leptin receptor/glycogen synthase kinase 3β microtubule-associated protein tau,LEP-R/GSK-3β/tau)信号通路相关蛋白表达情况。采用GraphPad Prism 9.0软件对数据进行统计分析,多组间比较采用单因素方差分析和重复测量方差分析,进一步两两比较采用SNK-q检验。结果水迷宫实验结果显示,五组大鼠逃避潜伏期的时间和分组交互作用不显著(F=1.223,P>0.05),分组主效应和时间主效应均显著(F=74.65,18.32;均P<0.05)。第5天时,尼莫地平组、DSS低剂量组和DSS高剂量组逃避潜伏期均低于模型组(q=14.425,7.477,21.392,均P<0.05),且DSS高剂量组低于尼莫地平组[(15.28±2.46)s,(22.78±3.31)s,q=6.966,P<0.05]。五组大鼠穿越平台次数差异有统计学意义(F=17.331,P<0.05),尼莫地平组及DSS高低剂量组的穿越平台次数均高于模型组(q=6.789,10.635,5.270,均P<0.05),且DSS高剂量组的穿越平台次数高于尼莫地平组[(6.84±1.63)次,(5.22±1.75)次,q=3.846,P<0.05]。ELISA结果显示,五组大鼠海马组织MDA、ROS和SOD表达水平均差异有统计学意义(F=49.338,38.518,15.440,均P<0.05)。DSS高剂量组海马组织MDA水平、ROS水平低于模型组(q=16.061,13.541,均P<0.05)和尼莫地平组(q=4.317,5.162,均P<0.05),SOD水平高于模型组(q=8.179,P<0.05)和尼莫地平组(q=4.135,P<0.05)。Western blot结果显示,五组大鼠凋亡相关蛋白Bcl-2/Bax、Caspase-3表达均差异有统计学意义(F=30.692,43.384,均P<0.01)。DSS高剂量组Bcl-2/Bax表达水平高于模型组(q=10.562,P<0.05)和尼莫地平组(q=3.820,P<0.05),Caspase-3表达水平均低于模型组(q=12.139,P<0.05)和尼莫地平组(q=7.734,P<0.05)。五组大鼠海马组织LEP-R、p-GSK-3β、p-S404 tau和p-S202 tau表达水平均差异有统计学意义(F=80.927,59.230,159.784,105.923,均P<0.01)。尼莫地平组、DSS高剂量组LEP-R、p-GSK-3β蛋白水平均高于模型组(q=16.275,20.104,均P<0.05;q=12.942,17.257,均P<0.05),两组p-S404 tau、p-S202 tau表达水平均低于模型组(q=19.121,27.456,均P<0.05;q=17.559,22.780,均P<0.05)。DSS高剂量组LEP-R((0.98±0.15),(0.86±0.14))、p-GSK-3β((0.95±0.16),(0.82±0.13))蛋白水平均高于尼莫地平组(q=3.829,4.314,均P<0.05),p-S404 tau[(0.41±0.03),(0.58±0.07)]、p-S202 tau[(0.48±0.05),(0.59±0.06)]表达水平均低于尼莫地平组(q=8.335,5.220,均P<0.05)。结论DSS可改善VD模型大鼠的认知功能,其机制可能与降低氧化应激水平、抑制神经元凋亡、上调LEP-R/GSK-3β/tau信号通路有关。