微生物检测不得不了解的那些事

微生物检测不得不了解的那些事

赵琨

绵阳市安州区疾病预防控制中心 卫检科 四川绵阳 622651

微生物是一群微小的生物，其主要分为细菌、真菌、放线菌、支原体以及病毒等，对于疾病的患者来说，不同的疾病对应的样本均不同，通常可以从患者的血液，尿液，痰液，化脓处以及创口等处进行原液的获取，在获取之后，进行培养扩大对于种群进行鉴定，确定微生物的浓度以及种类，判断患者的致病状况，同时辅助医生进行诊断用药，而这些需要在微生物学实验室当中进行，这是生物学领域的一个基本实验室，在一个完备的实验室当中，微生物学实验室有许多的设备和注意事项，在进行细菌的检测过程当中，也有着不同的流程，因此本文带大家进入微生物学实验室进行了解。

1.微生物学

微生物学的微极其微小的意思，微生物是人类用肉体看不到的一个群体，必须要借助显微镜才能够进行观察，在人们的日常生活当中，其无处不在，并且在所有的生物体内也是存在的，但微生物并不全是有益的，有一些对于人体来说是致病的，对人类有害，并且微生物与土壤肥力有很大的关系，土壤肥沃，则微生物较多，土壤贫瘠，则微生物较少，土壤当中没有微生物，那么就成为了死土，这主要是因为土壤当中有机质的分解以及营养的转化均离不开微生物活动，同时微生物还能够进行多种酶以及生长刺激素的分泌，从而促进植物的生长。

2.微生物实验设备的一些配置

在微生物实验室当中，通常使用的仪器设备有超净工作台、无菌室、接种箱、培养箱、天平等，从而为微生物培养提供一个无菌的环境，超净台主要的用途是对微生物的接种以及处理，而在对于微生物进行培养时，需要在相对应的接种箱以及无菌环境下进行，通常建设在实验室之内的小套间当中，无菌室需要与室外形成一个缓冲空间，通常缓冲空间的面积为两平方米缓冲间以及无菌室的门不能够建立在同一条直线之上，减少空气杂菌的进入，无菌室和缓冲间除了清洁之外，还需要有良好的密闭性，室内应当有换气的设备，在工作结束之后更换室内空气，房间当中各安装三十瓦的紫外线灯管和照明日光灯，在无菌室的紫外线灯应当处于工作台上方，离台面一米，若实验室没有建造无菌室的条件，可以应用木质的接种箱代替，接种箱的结构简单，正面是玻璃，可以很好的进行观察，同时接种箱的前方有两个圆洞，并且连接着一个袖套，方便实验室的人员使用袖套在接种箱当中进行操作，同时在箱体内部也应当悬吊紫外线灯以及日光灯进行杀菌。培养箱通常有霉菌、厌氧、生化等培养箱，通常霉菌的培养箱对湿度和温度进行把控，厌氧培养箱应用于双歧杆菌等厌氧微生物生化培养箱，只能够对于温度进行控制。天平是用于各类试剂的精准测量实验室，通常应用电子天平，电子天平是根据经度进行级别划分。微波炉可以对溶液进行快速加热以及固体培养基的加速融化。高压灭菌锅是因为微生物学当中许多的实验品、试剂等需要进行严格的消毒消菌。菌落计数器可以帮助实验者对于菌落的数量进行计数，通常高性能的计数器还可以直接连接电脑自动计数。微生物学实验室当中，冰箱通常能够有温度控制功能，从而适用于不同试剂、药品等的存放条件。纯水装置通常包含了蒸馏水器以及纯水机器，在纯水的制造过程当中需要实验室的人员进行值守，纯水机器的造价高，但是使用方便并且可以储存一定的纯水，便于使用。离心机通常用于微生物菌体以及其他的沉淀物收集，有冷冻和常温的分别，通常冷冻和常温是由于样品的种类而定。

拍打式均质器能够制备检测样品且对于样品有无污染、损伤等特点，旋转式由于其需要进行刀片更换等，容易受到污染。在均质器的使用过程当中，首先应当进行电源插头的固定，防止出现插头松动，主要是因为均质器的工作当中会产生振动，可能会使得插头脱落，而这突发的脱落则会使得机器出现损伤，均质器在工作当中不能够随便的打开均质器的门，一定要先关机器，再进行开门，并且在关闭门之后才能够开机，虽然有一些均质器在打开门之后能够自动停止运转，但也可能会出现样液的飞溅，在使用之前还应当对于是否有异物进行检查，均质器以及均质袋应放置在阴凉干燥处，均质袋应避免光和酸碱，延迟其变脆和老化，在均质器应用完成之后，应当进行关机，在断电之后对其进行清理。

3.人员操作要求

首先相关操作人员应当将手部进行清洗，而后进行消毒，再进行取样前以及检测之前都需要进行洗手消毒，在进行微生物取样的时候需要具有代表性，对于目的样和随机样及综合样进行标识，在取样完成以后，需要及时的将样品放入超净台当中，对其外表使用紫外灯进行照射消毒，同时要求工作人员在检测的区域之内进行操作，在检测之前需要应用百分之七十五的酒精棉球对于微生物样品袋的口部实施擦拭消毒，消毒之后再进行开口。操作人员在往盐水瓶当中添加样品时，应当注意尽量不与平口进行接触。在进行样品计量的时候应当准确，可重复核对，稀释的倍数也应当进行确定，在进行一百倍稀释的时候，首先应当将一毫升的吸管深入到盐水当中，不能够将样品放置于管壁流下，在吸管深入时，应当避免到管底。在使用盐水进行操作时，应当维持在四十摄氏度左右，过热可能会将一些微生物烫死，而若是温度低，则会导致样品的不完全溶解。实验人员在进行稀释的过程当中，要保证溶液均一。在进行大肠菌群的样品制作时，首先应当将乳糖胆盐的培养基等提前备好，同时放入超净台对外表紫外线灭菌。实验人员在进行平皿的清道时，首先应当注意平皿不能够与培养基的平口接触，同时培养基的倾倒应当适量，不能够太多或太少，以免在培养过程当中出现微生物死亡，通常为十五毫升即可。在实验人员对于微生物进行操作完成之后，应当将培养皿放入对应的培养箱当中，同时对于超超净台进行清洁。

4.药敏试验

由于细菌当中存在对于人体有害的菌群，其通常会导致人类生病，因此对于细菌的药物敏感，性实验是非常重要的，也是人们非常关注的。药敏实验即药物敏感性实验，通常是细菌对于抗菌药所呈现出的敏感程度。细菌是一种常见病原微生物，通常情况下，抗菌药能够以较小的剂量对细菌进行抑制，消灭则为敏感，反之则耐药性强或是不敏感。通常临床当中按剂量使用能够抑制或消灭病菌的目的，从而发挥药物的抗感染作用，但是若是致病菌的敏感性下降，那么则在推荐剂量之内，很难达到抑制或杀灭致病菌的效果。通常抗菌药物对于病菌的传染性有很强的控制作用，但是由于抗菌药的滥用，导致许多病菌产生了耐药性，从而越来越不敏感，从而造成药物的滥用，同时还使得病情得到了延误，给患者造成了很大的损失，因此抗菌药物的针对性使用非常重要，能够减少抗菌药物应用的盲目性，提高治疗效果。通常来说药敏实验有纸片法、稀释法等，纸片的扩散法只能够对于细菌对药物的敏感程度进行定性，稀释法可以对于抗菌活性进行定量测定。