抑制Survivin表达对胰腺癌细胞凋亡的影响

(整期优先)网络出版时间:2009-01-11
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目的探讨以Survivin为靶基因的胰腺癌基因治疗的可能性,为胰腺癌基因治疗提供依据。方法采用化学合成的小干扰RNA(siRNA)和pGCSi载体中的小发夹RNA(shRNA)抑制胰腺癌细胞系PaTu8988的Survivin基因表达,通过观察胰腺癌细胞株Survivin基因表达的下调以及细胞形态、细胞凋亡、细胞活力、凋亡信号途径等的改变评价Survivin作为靶基因的治疗效果。结果不同序列的siRNA和shRNA抑制胰腺癌细胞Survivin的表达后,SurvivinmRNA和蛋白表达水平明显下降(P〈0.05);碘化吡啶(PI)染色法观察发现RNA干扰(RNAi)后细胞出现核皱缩、细胞凋亡率〉20%;流式细胞仪检测发现RNAi后在G0/G1期前出现了亚二倍体峰(P〈0.05);Westernblot法检测发现RNAi后Caspase-3被激活(P〈0.05)。结论通过抑制胰腺癌细胞PaTu8988的Survivin表达可以诱导肿瘤细胞启动凋亡程序,加速肿瘤细胞凋亡,由此可望提高胰腺癌的治疗效果。