知识科普:T淋巴细胞亚群检测,帮助了解你的免疫力,建议收藏

(整期优先)网络出版时间:2023-01-13
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知识科普:T淋巴细胞亚群检测,帮助了解你的免疫力,建议收藏

林淑群

四川友谊医院  四川省成都市  610066

淋巴细胞主要有淋巴器官产生,存在于血液和淋巴液内,常见症状有淋巴肿大、发热、盗汗等。淋巴细胞亚群检测可以了解细胞、免疫缺陷病以及资得很免疫疾病的免疫功能。淋巴细胞亚群无论增高还是降低都提示免疫功能紊乱。T淋巴细胞亚群通常是用来评估人体的细胞免疫功能,能够对HIV病毒感染进行有效的判断。在进行T淋巴细胞亚群的测定时,还可以对自身免疫性病变,比如系统性红斑狼疮以及免疫缺陷病进行辅助诊断,同时还可以帮助体内所出现的恶性肿瘤以及血液病进行判断。

那么,为什么需要进行T淋巴细胞亚群检测呢?

T淋巴细胞亚群检测的意义是用于评价细胞免疫功能。T淋巴细胞亚群的测定是判断机体细胞免疫功能的重要指标,如自身免疫病、恶性肿瘤、免疫缺陷病、血液病、变态反应性疾病等,分析患者患病的几率,治疗后用于观察疗效和判断预后有重要意义。淋巴细胞亚群检测可以通过检测B淋巴细胞、T淋巴细胞等数量,辅助检查免疫缺陷病、变态反应性疾病、血液病等。如B细胞升高提示病毒感染,下降提示免疫缺陷;T细胞中CD4+T细胞(一种免疫细胞)下降原因主要是病毒感染,如HIV病毒感染等。T淋巴细胞亚群的测定异常结果有CD4淋巴细胞减少、CD8淋巴细胞增多、CD4/CD8比值异常。检查前不要暴饮暴食和剧烈运动,需要在平静状态下空腹抽取静脉血检查。检查时注意血清标本不被污染,及时送去检测。有相关疾病患者和免疫力低下者均可检查,在检查前有关的注意事项可以向医生咨询。如果检测结果异常,应在医生指导下给予治疗。平时注意劳逸结合,合理饮食,保持心情舒畅,增强身体免疫力。

T细胞亚群又有哪些检测方法呢?

1、酶免疫染色技术:

常规分离MNC,调整细胞浓度为1×105~106个/ml,取细胞用不同亚群的McAb(一抗)和酶标抗体(二抗)或与酶抗体复合链接物,在相应底物作用下显色,普通光镜计数阳性细胞,计算出各亚群的百分比。

2、流式细胞仪:

机体免疫状态是衡量机体是否患病的重要指标,目前多采用流式细胞术检监测机体的免疫状态,其中最重要的指标是检测T、B和NK淋巴细胞的水平。T细胞主要包括T辅助细胞(Th)和T抑制细胞(Ts)细胞亚群。CD3+细胞代表外周血中总的成熟T细胞,理论上应约等CD4+细胞和CD8+细胞的总和,但往往出现CD4+加CD8+细胞之和大于CD3+,这是因为CD4+细胞包括CD3+/CD4+细胞(真正Th细胞)和CD3-CD4+细胞(非Ts细胞),而后者包括CD3-CD8+CD16+CD56+细胞(一部分NK细胞)和CD3-CD8+CD16+CD56-(未知细胞)。由此可见,真正的TH细胞是CD3+CD4细胞,真正Ts细胞是CD3+CD8+细胞。尤其当患者NK细胞明显增加时,会使CD4细胞和CD8细胞的总和大于CD3+细胞,因此,用三色荧光标记才能分析真正的辅助性T细胞和抑制性T细胞。

3、免疫荧光染色法:

MNC悬液的浓度调整至1×107个/ml,可用细胞悬液与抗压群McAb在小试管内是反应,也可将细胞悬液涂片,然后同酶免疫染色操作。根据条件可选择直接法和间接法。T细胞表面抗原直接或间接与荧光抗体结合,通过荧光显微镜或流式细胞仪(FCM)计数。

4、补体杀伤试验:

将淋巴细胞同其McAb(应是细胞毒抗体)作用,加入兔或豚鼠血清(预先选择对淋巴细胞无毒性)提供补体。抗原抗体结合,在补体参与下,T细胞膜受损,通透性增加,然后用活细胞或死细胞染色法染色,光镜计数死细胞百分比,以确定相应T淋巴细胞亚群比例。

5、花环形成试验:

常用的有红细胞花环和细菌花环,通过抗T细胞McAb与T细胞表面抗原结合形成可观察的花环。

直接红细胞花环试验:经醛化的红细胞与T细胞McAb连接成指示剂。当淋巴细胞周围结合4个以上红细胞者为阳性细胞。

间接红细胞花环试验:以结合了抗鼠IgG的醛化红细胞为指示细胞,淋巴细胞借T细胞McAb同指示细胞结合形成花环,光镜计数,结合3个以上红细胞者为阳性细胞。

SPA菌花环试验:以葡萄球菌为指示剂。SPA同抗T细胞McAb或抗鼠IgG结合,然后直接或者间接与淋巴细胞形成花环,染色后油镜下观察。凡周围连接10个以上葡萄球菌的淋巴细胞为阳性细胞。

检查时注意事项有哪些?

1.该项检验指标细胞免疫检查内容,无需空腹。

2.若与肝功能、肾功能、血糖、血脂等生化项目同时检测,建议空腹。检查前天,白天宜清淡饮食,忌烟酒。晚上10点以后禁食水,次日早晨空腹检查。

3.抽血后,需在针孔处进行局部按压3~5分钟,注意不要揉。

4.若出现晕针症状,如头晕、眼花、乏力等情况时,应立即平卧,并可饮少量糖水,待症状缓解后再进行其他检测。

总之,T淋巴细胞亚群检测对某些疾病,如自身免疫病、免疫缺陷病、恶性肿瘤、血液病、变态反应性疾病、感染等的辅助诊断,分析发病机制,观察疗效及监测预后有重要意义。