不同材质的滤膜对胞磷胆碱钠注射液稳定性的研究

不同材质的滤膜对胞磷胆碱钠注射液稳定性的研究

黄冠睿,胡晓坤,黄文欣,王明

杭州澳亚生物技术股份有限公司  浙江杭州  310018

[摘 要] 目的 对胞磷胆碱钠注射液及其置于不同厂家、材质的滤膜浸泡后的稳定性进行考察，为该产品的处方工艺及生产工艺开发提供依据。方法：采用高效液相色谱法对室温条件下的胞磷胆碱钠注射液以及经过不同厂家材质的滤膜浸泡进行有关物质测定。结果：室温条件下，24h内胞磷胆碱钠注射液较为稳定；且胞磷胆碱钠注射液置于聚醚砜和聚偏氯乙烯材质的滤膜中浸泡后均较稳定，主要杂质含量小于0.014%，其他各杂质总和小于0.019%。结论：该产品可在室温条件下进行处方配制，且在生产工艺中可通过聚醚砜和聚偏氯乙烯材质的滤膜进行除菌过滤。

[关键词]胞磷胆碱钠注射液；稳定性；聚醚砜；聚偏氯乙烯；

Study on the stability of citicoline sodium injection with different membrane materials

Huang guanrui，Hu xiaokun，Huang wenxin，Wang ming

（Hangzhou Ausia Biological Technology Company,LTD.，Hangzhou，Zhejiang  310018，China）

[ABSTRACT] ObjectiveTo investigate the stability of citicoline sodium injection and its filtration membrane soaked in different manufacturers and materials, and to provide the basis for the formulation and production technology development of the product. Methods High performance liquid chromatography (HPLC) was used for the determination of citicoline sodium injection at room temperature and soaked in membrane from different manufacturers and materials. Results Citicoline sodium injection was stable within 24h at room temperature. In addition, citicoline sodium injection was stable after soaking in the membrane made of polyether sulfone and polyvinylidene chloride, with the content of main impurities less than 0.014% and the sum of other impurities less than 0.019%. Conclusion The product can be prepared at room temperature, and can be filtered by polyether sulfone and polyvinylidene chloride.

KEY WORDS：citicoline sodium injection; Stability; Polyether sulfone; Polyvinylidene chloride;

胞磷胆碱钠（CDPC）为核苷酸衍生物，化学名为胆碱胞嘧啶核苷二磷酸酯单钠盐，由5’-胞苷酸和磷酸胆碱制得[2]，是内源性合成磷脂酰胆碱的中间体，为卵磷脂生物合成所必需的辅酶，能刺激脑干网状结构的兴奋，提高苏醒阈值，恢复神经组织机能，改善脑代谢和神经传导，提高患者的意识水平[1]。临床上用于治疗急性和亚急性中风有关的神经和认知障碍或与头部受伤及脑部术后引起的意识障碍等。

胞磷胆碱钠注射液收载于《中国药典》第二部[3]，照高效液相色谱法（通则0512）测定[4]。1961年日本武田制药公司开发生产出胞磷胆碱钠(尼可林)，并于1988年在我国注册[5]。本次试验均采用面积归一化法，考察胞磷胆碱钠注射液在室温环境下的稳定性，并对聚醚砜和聚偏氯乙烯材质的滤膜与胞磷胆碱钠注射液进行相容性试验。

1、仪器与试药

1.1仪器

Agilent1260型高效液相色谱仪（安捷伦科技有限公司）；ML204T型电子天平（梅特勒-托利多仪器（上海）有限公司），；滤膜1：（厂家：Millipore，材质：聚醚砜，孔径：0.22μm，批号：R8BA33853）；滤膜2：（厂家：Millipore，材质：聚偏氯乙烯，孔径：0.22μm，批号：R3EA16856）；滤膜3：（厂家：PALL，材质：聚醚砜，孔径：0.2μm，批号：401437）；滤膜4：（厂家：PALL，材质：聚偏氯乙烯，孔径：0.2μm，批号：NS00936）；UltimateRAQ-C18型色谱柱（内径和长度：4.6mm×250mm，粒径：5um,SN：221401501）

1.2试药

胞磷胆碱钠（开平牵牛花制药有限公司，批号：210216，干燥失重：1.0%，含量：100%），；5’-胞苷酸（广东光华科技股份有限公司，批号：P20201204）。

2、方法与结果

2.1色谱条件：色谱柱：厂家：Welch，型号：UltimateRAQ-C18,内径和长度：4.6mm×250mm，粒径：5um；流动相：磷酸盐缓冲溶液[0．1mol／L的磷酸二氢钾溶液和四丁基铵溶液(取0．01mol／L四丁基氢氧化铵溶液用磷酸调节pH值至4．5)等量混合]-甲醇(95：5)；检测波长：276nm；流速：1.0ml/min；柱温：25℃；进样量：系统适用性溶液20ul，其他溶液10ul；运行时间：30min；。

2.2系统适用性溶液的配制：取胞磷胆碱钠适量，精密称定，加水溶解并稀释制成每1ml中约含0.25mg的溶液；取5’-胞苷酸适量，精密称定，加水溶解并稀释制成每1ml中约含7.5μg的溶液；取等量的上述两种溶液混合，摇匀，即得。

2.3胞磷胆碱钠注射液的稳定性考察

2.3.1胞磷胆碱钠注射液的配制：称取胞磷胆碱钠2.5g至20ml量瓶中，加超纯水稀释至刻度，摇匀，即得。

2.3.2样品前处理：分别精密量取配制后在室温下放置4h、8h、24h的胞磷胆碱钠注射液1ml至50ml量瓶中，加超纯水稀释至刻度，摇匀，即得供试品溶液。

2.3.3测定法：对色谱柱进行过渡后，按色谱条件进行试验，记录色谱图。胞磷胆碱钠注射液在室温下24h内杂质含量变化结果见表1及图1。

表 1  胞磷胆碱钠注射液室温下24h杂质含量

2.4胞磷胆碱钠注射液滤膜相容性考察

2.4.1胞磷胆碱钠注射液的配制:称取胞磷胆碱钠6.25g至50ml量瓶中，加超纯水稀释至刻度，摇匀，即得。

2.4.2样品前处理:本次试验将1.1项下的四份不同厂家、材质的滤膜各两张分别置于胞磷胆碱钠注射液中进行浸泡4h、8h、24h，得浸泡液。

2.4.3供试品溶液的配制：用浸泡液制备供试品溶液，观察杂质出峰情况。

2.4.4测定法：对色谱柱进行过渡后，按色谱条件进行试验，记录色谱图。用面积归一化法计算各供试品溶液杂质含量，胞磷胆碱钠注射液及浸泡液杂质含量变化结果见表2及图2~3（以浸泡液1（24h）为例）。

表 2  供试品溶液杂质含量

2020版《中国药典》规定胞磷胆碱钠注射液有关物质项下5’-胞苷酸的量≤0.3%，其他单个杂质≤0.5%，其他各杂质和≤0.7%，从表1中数据可以看出，胞磷胆碱钠注射液在室温条件下放置24h内杂质含量均符合规定，且在上述规定色谱条件下，胞磷胆碱钠与5’-胞苷酸分离度为4.44，符合药典规定（标准规定应≥4.0），且与其他杂质均分离良好，即系统适用性良好，保证了检查结果的准确性及可靠性。由此可知，胞磷胆碱钠注射液在室温条件下24h内较为稳定。

从表2中数据可以看出，胞磷胆碱钠注射液在室温条件下置于不同厂家、材质的滤膜浸泡24h内杂质含量均符合《中国药典》（2020版）规定，且在上述规定色谱条件下，胞磷胆碱钠与主要杂质5’-胞苷酸分离度6.5，符合药典规定（标准规定≥4.0），且与其他杂质均分离良好，保证了检查结果的准确性和可靠性。

由此可知，室温条件下置于不同厂家、材质的滤膜浸泡后的胞磷胆碱钠注射液在24h内较为稳定。

3讨论

胞磷胆碱钠注射液收载于《中国药典》第二部，是胞磷胆碱钠的常用剂型之一，多用于静脉滴注或肌肉注射。通过对胞磷胆碱钠注射液的稳定性考察，从表1中的杂质含量变化可以看出，胞磷胆碱钠注射液配制后在室温条件下放置24h内，不同时间杂质的占比相对稳定且杂质增长比率较低，故其可在室温条件下进行配制，同时应控制其配制时限，建议注射液的配制时限全程不超过8小时，以更好的控制其质量。

而作为注射剂，除菌过滤的每一个环节都需要严格把控，本次试验采用的不同厂家、材质、孔径的四种滤膜，分别为聚氯砜材质和聚偏氯乙烯材质，通过对置于不同滤膜浸泡后的胞磷胆碱注射液的稳定性考察，杂质增长率低，故胞磷胆碱钠注射液对聚氯砜或聚偏氯乙烯材质的滤膜相容性较好，对胞磷胆碱钠注射液生产工艺中进行除菌过滤滤膜的选择具有一定的参考意义，建议可选择聚醚砜或聚偏氯乙烯材质的滤膜。

参考文献：

[1]顾复昌，杨亮懿.胞二磷胆碱的生产[J].发酵科技通讯，2007,36（1）：9-11

[2]范文静，杜卫群，邱蔚然，周长林.胞磷胆碱钠原料药的一致性评价研究[J].药物生物技术，2017,24（3）：224-229

[3] 中国药典[S].2020年版.二部.1005.

[4]王欢,邱蔚然.胞磷胆碱钠含量及有关物质的质量研究[C].//江苏省生物化学与分子生物学第九届会员代表大会暨第十次学术会议论文集.2013:199-205.

[5] 田海燕,刘娟,刘维彬等.离子色谱法测定胞磷胆碱钠原料及注射液中的游离胆碱[J].中国药师,2020,23(11):2284-2286.