两种不同免疫检测技术在乙肝病毒血清检验中的应用准确性比照观察

两种不同免疫检测技术在乙肝病毒血清检验中的应用准确性比照观察

吕倩玉,侯昕,付邦军

聊城市东昌府人民医院  252000

摘要：目的：观察在乙肝病毒血清检验中应用化学发光法（CLIA）与酶联免疫吸附试验（ELISA）的准确性差异。方法：选择我院80例、2021年2月~2023年2月收治的疑似乙肝患者，均行CLIA和ELISA检验，比较两种不同免疫检测技术的检验结果及诊断效能差异。结果：PCR检查结果显示，80例疑似乙肝患者中，阳性共检出60例，阴性共检出20例；CLIA法检查结果显示，真阳性共检出58例，真阴性共检出19例，误诊2例，漏诊1例；ELISA法检查结果显示，真阳性共检出56例，真阴性共检出17例，误诊15例，漏诊3例。CLIA检测的灵敏度98.31%、特异度90.48%、准确度96.25%，ELISA检验依次为94.92%、80.95%、91.25%，两种检测方式的诊断效能无统计学意义（P＞0.05）。相较CLIA检测，不同血清乙肝表面抗原（HBsAg）浓度下的ELISA检测灵敏度均较低（P＜0.05）。相较ELISA检测，乙肝五项指标（HBcAb、HBeAg、HBeAb、HBsAb、HBsAg）CLIA的阳性检出率更高（P＜0.05）。结论：CLIA和ELISA检验用于乙肝检测中均可取得显著效果。在乙肝病毒血清学检验中，CLIA的敏感度和检测阳性率较ELISA明显更高。

关键词：不同免疫检测技术；乙肝病毒；血清检验；准确性

乙肝是以恶心乏力、食欲减退、腹胀、肝功能异常、肝区疼痛等症状为主的病毒性肝炎，传染性较强。其病因机制是由感染乙型肝炎病毒导致肝脏部位发生病变所致[1]。乙肝可长期潜伏（1~6个月），此阶段的无明显临床症状，增加乙肝的临床诊断难度，一旦乙肝病毒携带者的病毒被激活，将罹患乙肝，若治疗延误，病情会持续发展为肝硬化、肝功能衰竭等严重疾病，甚至恶化为肝癌，危及患者生命[2]。在感染乙肝病毒后，大多数患者自身免疫系统会产生特异性抗体，故而临床多通过乙肝病毒血清学检测对乙肝病情及预后效果进行判断，其中实时荧光定量聚合酶链反应（PCR）的灵敏度和检出率均较高，故可将其作为该疾病诊断的“金标准”。但PCR检测耗时较长、费用昂贵，导致临床应用存在局限性，因此积极探索有效检测技术进行病毒检测对乙肝防治极为重要[3]。化学发光法（CLIA）与酶联免疫吸附试验（ELISA）在临床应用中各有优势。本研究对我院80例、2021年2月~2023年2月收治的疑似乙肝患者予以选取，旨在评价CLIA和ELISA检验应用在乙肝病毒血清检验中的准确率。现报告如下：

1.资料与方法

1.1一般资料

选择我院80例、2021年2月~2023年2月收治的疑似乙肝患者，男45例， 女25例；年龄24～76（48.92±4.57）岁。纳入标准：①因出现恶心乏力、食欲不振、上腹部及肝区疼痛不适等症状而到医院就诊，被疑诊为乙肝；②认知功能及沟通能力正常，配合度良好。排除标准：①血液系统疾病或代谢疾病者； ② 恶性肿瘤者；③妊娠哺乳期者；④存在精神障碍无法配合研究者。

1.2方法

在检验前1d，工作人员需叮嘱受检对象空腹状态≥8h采集空腹肘静脉血5 mL，在真空分离胶试管中妥善放置，离心速率：3000 r/min，离心时间10min，将分离出的上层血清在-20 ℃环境中保存。

1.2.1 CLIA检测：采用全自动化学发光分析仪及配套乙肝病毒定量试剂盒检测受检对象的血清标本，确保所有操作过程严格按照相关说明书执行。

1.2.2 ELISA：采用全自动酶联免疫分析仪及配套试剂盒对受检对象的血清标本进行ELISA 检测。试剂盒在室温环境在放置30min，对阳、阴性及空白对照孔进行分别设置并加入标准液50μL+50μL特异酶，封膜后，使用振荡器确保液体混合均匀。将样本于37 ℃水浴箱中放置，孵育30 min后，仔细对反应板进行清洗，在显色后，再予以加入终止液。采用全自动酶联免疫分析仪对血清中的乙肝五项指标进行比色，对其检测结果进行记录。

1.3观察指标

①诊断“金标准”以PCR为准，对比CLIA和ELISA检验的诊断效能。②观察CLIA和ELISA检验在1.5、3.0、9.0、12.0 μg/L等不同血清 HBsAg浓度下的敏感度。③观察CLIA和ELISA检验的乙肝病毒阳性检出率。HBcAb、HBeAg 以检测标本的吸光度值/临界值（S/CO）＜1为参考值；HBeAb、 HBsAb、HBsAg分别以S/CO＞1、0～10 U/L、0～50 U/L为正常参考值。阳性标准：测量值与参考值范围不符。④比较CLIA和ELISA检验的乙肝病毒血清学检验结果。

1.4统计学分析

数据分析软件选取SPSS27.0，计量数据以（x±s）表示，行t检验，计数数据以n/%表示，行x2检验，P<0.05为数据间差异存在显著意义。

2.结果

2.1CLIA和ELISA检测乙肝病毒的结果比较

PCR检查结果显示，80例疑似乙肝患者中，阳性共检出60例，阴性共检出20例；CLIA法检查结果显示，真阳性共检出58例，真阴性共检出19例，误诊2例，漏诊1例；ELISA法检查结果显示，真阳性共检出56例，真阴性共检出17例，误诊15例，漏诊3例。见表1。

表1CLIA和ELISA检测乙肝病毒的结果比较[n（%）]

2.2CLIA和ELISA检测方法的诊断效能比较

CLIA和ELISA检测在乙型肝炎中的诊断效能无统计学意义（P＞0.05）。见表2。

表2 不同检测方法的诊断效能对比[n（%）]

2.3CLIA和ELISA检测不同血清HBsAg浓度的灵敏度

相较CLIA检测，不同血清HBsAg浓度下的ELISA检测灵敏度均较低（P＜0.05）。见表3。

表3CLIA和ELISA检测不同血清HBsAg浓度的灵敏度[n（%）]

2.4CLIA和ELISA检测乙肝病毒血清学的结果比较

相较ELISA检测，CLIA检测对HBcAb、HBeAg、HBeAb、HBsAb、HBsAg的检测结果显然更高（P＜0.05）。见表4。

表4 CLIA和ELISA检测乙肝病毒血清学的结果比较[n（%）]

3.讨论

随着近年来乙肝防控工作的积极开展，该疾病的发生率得以有效控制减少，但由于发病基数较大，需加强防控[4]。同时乙肝病毒筛查也是常规婚前检查项目，HBsAg呈阳性时，极易导致其配偶及子女感染乙肝病毒，极易引发不良母婴结局，故加强婚前和孕前检查对乙肝病毒的传播具有有效控制作用。乙肝长期迁延不愈极易并发肝硬化和肝癌等严重疾病[5]。

由于乙肝的早期发病时缺乏典型症状，单依靠临床症状诊断患者病情的准确率不高。选择有效诊断方法对乙肝病毒阳性检出率提升具重要作用，且早期筛查对并发症发生和其他器官损伤具有预防和控制作用[6]。在感染乙肝病毒后，由于血清中HBcAb可长时间存在，且敏感度较高，可作为早期急性乙肝病毒感染的评估指标。HBeAb是反映乙肝病毒复制减少或停止的重要指标；如HBeAb阳性受检者的乙肝病毒DNA呈阳性直接反映病毒大量复制，应及时采取抗病毒治疗。部分患者的HBcAb滴度高，HBsAg阴性患者的血清中可对HBcAb有效检出，故HBcAb滴度高可直接反映受检者乙肝病毒感染情况。HBeAg是反映乙肝病毒的复制情况的重要指标，如其超过正常参考值，则说明病毒复制数量多且传染性较强[7-8]。在感染乙肝病毒后2～6个月内、6～23周内分别可在血清中检出 HBeAg、HBsAb，当HBsAb呈阳性时，提示机体已对乙肝病毒产生免疫力。通过对乙肝患者的血液进行检测，可有效检出HBsAg，早期急性乙肝病毒感染患者可从HBsAg阳性转阴，在慢性乙肝患者中HBsAg持续检测为阳性[9]。

本研究显示，CLIA、ELISA检验的诊断效能无统计学意义（P＞0.05）。提示，CLIA、ELISA检验在乙肝病毒诊断中的准确率、灵敏度及特异性均较高。ELISA是将使抗原或抗体与某种固相载体表面结合所产生固相抗原或与某种酶，经有效连接后形成酶标抗原或抗体，并使其免疫活性得以稳定保持，清除未结合抗原，根据显色不同判定其阳性情况[10]。CLIA是利用自动化仪器检测体系化学发光强度确定待测物含量，在乙肝病毒标志物定量检测中的敏感度高，可动态监测乙肝病毒感染[11-12]。本研究显示，相较于ELISA，不同血清HBsAg浓度下，CLIA的检测敏感度及血清乙肝五项指标的检出率更高。分析原因，在疑似乙肝病毒感染者临床诊断中，ELISA无法准确判断其复制和感染情况。CLIA可减少人为因素的干扰，检测准确度及检测结果稳定性较强，可对抗体、抗原的含量或浓度进行准确判断，减少临床误诊、漏诊率。

综上，在乙肝检测中CLIA和ELISA检验的诊断价值显著。相较ELISA，CLIA对乙肝病毒血清学检验的敏感度和检测阳性率具有提高作用。

参考文献

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