全自动血细胞分析仪假性血小板减少的原因及临床处理方法研究

全自动血细胞分析仪假性血小板减少的原因及临床处理方法研究

刘艳花  

曲靖市麒麟区人民医院  云南曲靖  655000 

摘要：目的：研究全自动血细胞分析仪对血常规进行检测引起血小板计数假性减少原因并寻找解决方案。方法：该研究选择的91例均为2019年1月至2021年6月在本院门诊或住院经血细胞分析仪检测出现PLT计数假性减少样本。根据检验要求对样本复检，结合复检结果探讨PLT计数假性减少原因并给予纠正，对比纠正前后PLT计数水平。结果：91例PLT计数假性减少标本中，以冷凝集素、EDTA-PTCP依赖为主，约占58.24%（53/91），其中冷凝集素20例（21.98%，20/91）、EDTA依赖33例（36.26%，33/91）；其次标本采集不当11例（12.09%，11/91）、PLT卫星现象10例（10.99%，10/91）、体积异常9例（9.89%，9/91）；最后是标本时间过长6例（6.59%，6/91）、人为操作2例（2.20%，2/91）。经过分析乙二胺四乙酸（EDTA）依赖、PLT卫星现象将抗凝剂更换为枸橼酸钠，体积异常、人为操作经手工进行复检，样本采集不当则重新采集进行复检，冷凝集素样本以水浴箱（37℃）温育，标本时间过长则重新采集标本且于30min内完成检验。91例样本PLT计数复检结果显著高于初检结果，差异有统计学意义（P＜0.05）；PLT计数假性减少不同原因予以相对应解决方案，PLT计数纠正后显著高于纠正前，差异有统计学意义（P＜0.05）。结论：全自动血细胞分析仪进行血常规检测引起PLT计数假性减少原因较多，包括EDTA依赖、PLT卫星现象、冷凝集素、标本采集不当、体积异常、人为操作、标本时间过长等，且以EDTA依赖、PLT卫星现象、冷凝集素、标本采集不当为主，针对不同原因实施相对应解决方案，能纠正PLT计数检测结果，辅助临床诊断，为患者疾病诊疗提供依据，有助于预后改善。

关键词：PLT；假性减少；手工复查；血细胞分析仪；EDTA依赖

血小板是体积最小的血细胞，由骨髓巨核细胞分泌。PLT是血常规主要检测项目之一，能反映患者止血功能、凝血功能，不仅为医师评估病情提供依据，且能反映病情转归情况。近年来，随着医疗技术发展，检测仪器不断更新，血细胞分析仪在血常规检查中使用率显著升高，且以简单快捷、重复性强、精确度高、误差低等特点，备受青睐。有研究指出，该方法存在局限性，受操作者、仪器检测原理及PLT体积、凝集速度等因素影响，极易出现PLT计数假性减少现象。如何预防PLT计数假性减少干扰、提高PLT计数精确度，对减少临床漏诊、误诊情况发生尤为重要。本研究选取本院91例PLT计数假性减少样本进行原因分析并探究解决方案。现报道如下。

1资料与方法

1.1一般资料本研究选取2019年1月至2021年6月住院或门诊的91例经全自动血细胞分析仪检测PLT计数出现假性减少血液样本。男性患者52例，女性患者39例；年龄18～72岁，平均（48.36±10.53）岁，≤6岁10例，7～17岁14例，18～40岁17例，41～59岁22例，≥60岁28例；体质量指数15.52～26.5kg/m2，平均体质量指数（23.24±1.44）kg/m2；肘静脉血76例，末梢血15例。91例样本均经检测PLT计数＜80×109/L，且临床医师诊断并未出现PLT减少相关体征，因此进行手工检测、血涂片检测。

1.2检测方法。初检：将采集血液装入乙二胺四乙酸二钾（EDTA-K2）抗凝管中，轻摇试管使其均匀混合，观察是否出现凝固，若无异常则常温静置30min进行染色处理，采用血细胞分析仪进行相关检测，检测前应对仪器进行检查，确保检测质量。复查：均依照实验室操作流程相关原则进行。血涂片复检：血涂片制备后以巴氏染色液进行染色，采用显微镜观察血小板情况；手工复检：以草酸铵加入血液，经显微镜、牛鲍式计数板进行复检，复检结果与初检结果类似，结果反馈患者，若差异显著则为PLT计数假性减少，明确原因并实施对应纠正措施。

1.3观察指标

PLT计数假性减少原因分布情况；91例样本初检与复检结果对比；PLT计数假性减少原因（标本采集不当、体积异常、冷凝集素、EDTA依赖、标本时间过长、PLT卫星现象、人为操作），对比给予相对应解决方案后血小板计数结果。

1.4统计学方法

录入数据以SPSS23.0进行分析，计量资料以均数±标准差（x-±s）表示，t检验；计数资料以[n(%)]表示，χ2检验。双侧检验水准α＝0.05，以P＞0.05表示差异有统计学意义。

2结果

2.1PLT计数假性减少原因及其分布情况

91例PLT计数假性减少标本中，PLT计数假性减少原因：采集不当、冷凝集素、EDTA依赖、PLT卫星现象、体积异常、标本时间过长、人为操作。其中以冷凝集素20例(21.98%，20/91)、EDTA依赖33例（36.26%，33/91）为主，其次是采集不当11例(12.09%，11/91)、PLT卫星现象10例(10.99%，10/91)、体积异常9例(9.89%，9/91)，最后是标本时间过长6例(6.59%，6/91)、人为操作2例(2.20%，2/91)（见表1）。

表1PLT计数假性减少原因及其分布情况[n(%)]

2.2PLT计数减少原因、解决方案及纠正前后PLT计数水平

91例PLT计数假性减少标本中，采集不当地采取采集标本进行复检；体积异常、人为操作的采取手工进行复检；EDTA依赖、PLT卫星现象将抗凝剂更换为枸橼酸钠；冷凝集素的采取以水浴箱（37℃）温育后进行复检；标本时间过长的采取重新采集标本且于30min内完成复检。不同原因采取相应措施，经纠正PLT计数水平显著高于纠正前PLT计数水平，差异有统计学意义(P＜0.05)（见表2）。

表2PLT计数假性减少原因、解决方案及纠正前后PLT计数水平对比(±s，×109/L)

3讨论

PLT计数是机体血液系统疾病检测的重要指标，能有效反映病情程度和预后情况。但是PLT计数假性减少情况的发生，可造成误诊、漏诊，增加不必要的检查和治疗，加重患者经济负担的同时，还会引起医患纷争。本研究显示，91例PLT计数假性减少标本中，PLT计数假性减少原因以EDTA依赖、冷凝集素、标本采集不当、PLT卫星现象、体积异常为主，占比分别是36.26%(33/91)、21.98%(20/91)、12.09%(11/91)、10.99%(10/91)、9.89%(9/91)，提示抗凝剂、血液采集、样本病理改变、样本处理环境是导致血细胞分析仪检测过程中出现PLT计数假性减少的主要原因。此外，PLT计数假性减少与人工操作、样本时间也存在一定关系。

EDTA-K2是血常规指标检测中常用抗凝剂，不影响血液细胞形态，且能与钙离子形成新型化合物，抑制机体凝血功能，避免PLT聚集对检测结果造成影响。目前EDTA依赖造成PLT计数假性减少机制尚未明确，研究指出，EDTA-K2能与PLT抗体结合，活化纤维蛋白原受体，促使血小板聚集，同时使样本发生介导，作用于PLT糖蛋白受体，诱发PLT卫星现象，引起PLT计数假性减少。因此，针对疑似EDTA依赖、PLT卫星现象造成的PLT计数假性减少以枸椽酸钠作为抗凝剂进行纠正。本研究33例EDTA依赖、10例PLT卫星现象PLT计数假性减少，经纠正PLT计数恢复正常范围，且与复检结果基本一致。本研究还显示20例冷凝集素引起PLT计数假性减少，经纠正PLT计数同样恢复正常范围。冷凝集素是冷反应型且具有较强凝集功能的红细胞IgM型抗体，低温环境易与红细胞膜抗原结合，使红细胞出现不可逆聚集，进而引起PLT计数假性减少。针对此类情况，检验者应予以常温环境进行标本处理，抑制冷凝素与红细胞膜抗原结合，从而避免PLT计数假性减少。血液细胞分析仪检测是利用电阻抗原理，依据细胞大小不同所产生不同脉冲信号进行PLT检测。PLT体积过大或过小均能造成PLT计数假性减少，PLT体积过大被识别为小体积红细胞，而体积过小受外界因素干扰而造成脉冲信号不被识别而造成PLT不被纳入计数范畴。因此，对于PLT体积引起的PLT计数减少则经手工复查予以纠正，本研究中9例体积异常PLT计数假性减少经纠正结果在正常范围内。此外样本采集不当也是造成PLT计数减少的主要原因。本研究11例样本采集不当主要原因是血量过少、穿刺过程中误伤血管。血量过少，血细胞分析仪纳入样本量则减少，且受周围环境干预而影响PLT计数。而误伤血管造成凝血因子进入样本血液，促使样本中血小板聚集。研究显示，患者感染往往伴随着凝血功能活性增强，能影响血流，抑制PLT生成，从而降低PLT水平。因此，医院应强化医护人员血液采集规范和注意事项，同时做好质控管理，避免样本出现凝集、稀释、感染等情况。若出现此类情况，及时与采集人员、受检者沟通，重新采集样本进行复检。

4总结

综上所述，PLT计数假性减少原因较多，包括EDTA依赖、冷凝集素、PLT卫星现象、标本采集不当、体积异常、人为操作、标本时间过长，其中以EDTA依赖、冷凝集素、PLT卫星现象、标本采集不当为主，而针对不用原因予以相对应解决方案，能有效纠正PLT检测结果，为疾病诊治提供依据，促进病情恢复，改善预后。

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