循环肿瘤DNA在弥漫大B细胞淋巴瘤中的临床应用

【摘要】目的：分析循环肿瘤DNA在弥漫大B细胞淋巴瘤中的临床效果。方法：收取62例弥漫大B细胞淋巴瘤患者，分为两组，对照组给予标准方案，观察组行循环肿瘤DNA干预，比较效果。结果：各指标分析，观察组优于对照组（P<0.05）。结论：将循环肿瘤DNA，应用在弥漫大的B细胞淋巴治疗中，灵敏度和准备性都非常高，能够为后续疾病的治疗提供条件。

【关键词】循环肿瘤DNA；弥漫大B细胞淋巴瘤；效果

非霍奇金淋巴瘤以弥漫大B细胞淋巴瘤最为常见，约有30%～40%的新诊断疾病。在目前非霍奇金淋巴瘤治疗的年代，以放射检查和临床疗效评价为主，但其灵敏度、特异性差是其显著的缺陷^[1]。液体活检是一种利用肿瘤释放后的DNA进行血液循环的方法，它可以克服传统的组织切片和影像学检查方法的局限性，而且具有很高的敏感性和特异性，对分子进行准确的监测，是一种非常有价值的方法。

1资料和方法

1.1基本资料

将62例弥漫大B细胞淋巴瘤患者，作为本次研究对象。其中男性患者32例，女性患者30例；最小32岁，最大68岁，中位年龄（49.32±3.62）岁。本次研究中的患者，都进行了组织病理检查，并且已经确诊。对比以上资料P＞0.05。

1.2方法

对照组行采用标准R-CHOP方案免疫化学治疗。

观察组在治疗中应用循环肿瘤DNA，具体如下：在第一次化疗之前，取10 mL的外周血标本，于真空采血管中，于6~35℃下贮存，5天后离心取取标本，放置-80℃。采用试剂盒和荧光仪对血浆中的游离 DNA进行检测，采集和扩增。利用 KAPA超文本 Kit构建 DNA文库。将文库添加到试剂盒中，利用测序仪进行二代测序。完成序列后，将 FASTQ文档导入，通过 LymphoTrack软件进行数据处理。如果克隆数在5%以上，则可被视为是单克隆重组序列。在2个疗程后，对初始 ctDNA检测呈阳性的患者，在10 mL外周血中重复进行 ctDNA测定。

1.3观察指标

观察两组的阳性率与免疫化疗效果。

1.4统计学分析

录入SPSS19.0软件进行统计处理。计数资料以[例(%)]表示，进行c²检验；计量资料以(±s)表示，进行t检验。P＜0.05为差异有统计学意义。

2结果

2.1比较两组的阳性率

观察组阳性诊断率，高于对照组，有差异性（P＜0.05）。详见表1。

表 1 两组的阳性率对比(n,%)

2.2比较两组免疫化疗的效果

经干预，观察组的免疫化疗效果，显著高于对照组，有差异性（P＜0.05）。

表 2两组免疫化疗的效果对比(n,%)

3讨论

弥漫大B细胞淋巴瘤（DLBCL）是一种恶性淋巴瘤，至今还没有一种有效的分子标记物来评价其治疗效果和预后。在向浆细胞分化的特定时期，由于突变引起的肿瘤细胞的恶性克隆性增生，表现为单克隆性，而在B淋巴细胞体的初始胚胎形态到分化成熟，其IgH受体基因的3个片段，基因通过重组形成特定VDJ序列。因此，IgH受体由于VDJ序列的检测，可以作为检测B淋巴细胞克隆能力的指标。目前，平台利用IgH受体VDJ区域的导引物，将VDJ基因片片段扩增到NGS上，使各型B细胞淋巴瘤患者血浆中都能进行ctDNA检测，以提高敏感度^[2]。

有研究显示，癌细胞在凋亡、坏死和分泌时，会不断地向外周血中释放cfDNA，所以一般人的细胞和肿瘤细胞都会分泌cfDNA，这种DNA是来自于恶性肿瘤细胞的DNA，也就是所谓的肿瘤特异性DNA序列。ctDNA在一些癌症如胰腺癌，结直肠癌，膀胱癌，肾癌，乳腺癌，NSCLC。所以，ctDNA是一种很有希望的检测肿瘤的方法，可以在将来进行无创性的监控^[3]。

DLBCL不像其它的血液肿瘤，它的浸润程度一般较低，而且很少有骨髓播散。因此，获得的肿瘤物质数量有限，妨碍了DLBCL分子的研究，而DLBCL的分子层次还不能完全适应医学的需要。近年来，由于人们对淋巴瘤病理学、临床和分子风险因子的了解，以及肿瘤靶向单克隆抗体、小分子通路抑制剂、免疫疗法等方面的发展，使淋巴瘤的研究有了长足的进步。总体而言，ctDNA能够准确地为疾病负担和肿瘤基因信息提供实时监控，所以它可以为DLBCL及其其他血液病患者的个性化精确治疗模式转变^[4]。它可以用来帮助选择前线治疗，也可以用来评价治疗的效果，不管是改变治疗、强化治疗还是降低治疗，或者使用维持疗法。

在特定的液体活组织检查中，ctDNA是一种有效的非侵袭性的生物标记，有望作为一种替代物用于活组织检查。他们的测试已经被证实能够在疾病的监测和早期预测复发，从而开启一种新的方法来进行早期的介入或者加强的治疗，并有可能改变对非霍奇金淋巴瘤亚型的描述和监控^[4]。但是，我们的治疗和患者最好的配合，以及在处理中的动态配合，都还处在初级阶段。虽然目前还存在着一定的缺陷，但基于

DLBCL的分子检测技术具有广阔的应用前景，它将成为DLBCL药物活性评估、早期治疗干预、维持治疗期间的疾病监控和后期治疗等方面的重要手段。

总之，尽管在将ctDNA技术用于临床前还有很多工作要做，技术也要规范化，但是对于DLBCL患者来说，在其操作和预后方面的研究可以帮助他们提高治疗效果。

参考文献

[1]张海英,杨艳丽.循环肿瘤DNA在弥漫大B细胞淋巴瘤中的临床应用及研究进展[J].中国实验血液学杂志,2022,30(6):1917-1921.

[2]王佳萍,宋妮妮,盛立霞,等.循环肿瘤DNA在弥漫大B细胞淋巴瘤中的临床应用研究[J].临床血液学杂志,2022,35(1):29-34.

[3]陈晓奉,王蒙,张凤,等.循环肿瘤DNA在弥漫大B细胞淋巴瘤中的临床应用[J].中国实验血液学杂志,2021,29(2):638-642.

[4]李苗苗,宋玉琴,朱军.循环肿瘤DNA在弥漫大B细胞淋巴瘤中的研究进展[J].肿瘤综合治疗电子杂志,2020,6(2):25-28.