衢枳壳清肺喷雾剂的制备

衢枳壳清肺喷雾剂的制备

叶文静，钟妍，黄彬纯，陈婉儿，李元圆

（杭州医学院，浙江，杭州，310053）

摘要：目的以衢枳壳提取物制备喷雾剂，为衢枳壳治疗呼吸道炎症的药效实验提供合适的剂型。方法对喷雾剂的处方组成、比例进行筛选和优化，确定最佳处方比例，进行处方稳定性考察和每喷平均喷射量考察。结论 本研究制备的衢枳壳喷雾剂工艺简单、稳定均一，每喷喷量在0.14-0.15 g之间，每喷所含挥发油在7-7.5mg之间，可用于后续药效学研究。

关键词：衢枳壳提取物；喷雾剂；处方筛选；稳定性

衢枳壳为芸香科常山胡柚 Citrus aurantium ‘Changshanhuyou’的干燥未成熟果实，7月果皮尚绿时采收，自中部横切为两半，干燥后供药用，习称“胡柚片”，主产于浙江省衢州市常山县[1]。衢枳壳其药用历史可追溯至清代，在2016年被纳入《浙江省中药炮制规范》[2]，在 2018 年被列入 “新浙八味”中药材培育品种名单[3]。衢枳壳性微寒，味苦、辛、酸，归脾、胃经。具有理气宽中，行滞消胀、止咳化痰等功效。现代药理学研究表明衢枳壳具有抗炎、抗氧化、降血糖、调节免疫等作用[4-8]。课题组前期研究发现衢枳壳对急性肺炎具有良好的治疗效果[9]。本研究利用衢枳壳有效部位制备清肺喷雾剂，为考察衢枳壳对呼吸道炎症的治疗作用提供合适的研究剂型。

1  材料与仪器

SK7210LHC数控超声波清洗器（上海科导超声仪器有限公司）；挥发油提取器（四川蜀牛）;台式离心机DL-5 -C（上海安亭科学仪器厂）;均质机IKA T18（艾卡仪器设备有限公司）;涡旋混合器IKA VORTEX3（艾卡仪器设备有限公司）; 衢枳壳购于衢州；试剂均为分析纯。

2方法与结果

2.1提取

衢枳壳饮片粉碎成粗粉，取药粉500 g，置5000 mL 圆底烧瓶中，加一定比例的水后置于电热套中，连接挥发油测定器与冷凝管，加水充满挥发油测定管支管后，加热提取挥发油，至测定管中挥发油量不再增加为止。停止加热并读取挥发油体积，收取挥发油备用。

2.2表面活性剂的选择

分别将0.5 g油相与不同表面活性剂聚山梨醇80、聚山梨醇20、泊洛沙姆188按1:1混合，再缓慢加入蒸馏水至10 ml，均质乳化3 min，得到乳状液体。以水为空白溶剂，用紫外分光光度计测定各样品在680 nm处的透光率，实验结果见表1。油相与聚山梨醇80乳化得到的乳液具有最高的透光率，因此选择聚山梨醇80。

表1 不同表面活性剂的透光率测定结果

2.3助表面活性剂的选择

采用溶解法，观察油相在1,2-丙二醇、丙三醇、PEG400三种辅料中的溶解度。称取上述助表面活性剂各2 g，分别加入0.5 g挥发油，涡旋混合后超声30 min，静置2 h后观察油相在不同助表面活性剂中的溶解情况。实验结果表面，油相与丙三醇、PEG400不互溶，能部分溶于1,2-丙二醇，故选择1,2-丙二醇作为助表面活性剂。

2.4处方筛选

2.4.1表面活性剂比例优化

将0.5 g油相与聚山梨醇80按比例1:1、1:2、1:3、1:4、1:5混合均匀后，再缓慢加入蒸馏水至10 ml，均质乳化3 min，得到乳状液体。将样品置于离心机中，以2000 r/min的转速离心30 min后，观察各样品的分层情况。结果显示，随着聚山梨醇80比例的增加，乳液稳定性增加，油相与聚山梨醇80比例为1:2、1:3、1:4、1:5时乳液均未分层，确定油相与聚山梨醇80的比例为1:2。

2.4.2助表面活性剂比例优化

将1 g聚山梨醇80与1,2-丙二醇按比例1:1、1:1.5、1:2、1:2.5混合均匀后，分别加入0.5 g油相混合均匀，再缓慢加入蒸馏水至10 ml，均质乳化3 min，制备不同样品。静置2 h后，观察各样品溶液的澄清度，结果见表2。实验结果表面，聚山梨醇80与1,2-丙二醇比例为1:2、1:2.5时，溶液澄清，均一。因此确定聚山梨醇80与1,2-丙二醇比例为1:2。

表2 不同助表面活性剂的澄清度测定结果

2.5处方稳定性考察

根据处方筛选实验结果，将0.5 g油相与1 g聚山梨醇80和2 g 1,2-丙二醇室温混合均匀，再缓慢加入蒸馏水至10 ml，均质乳化3 min，制备喷雾剂样品。将上述样品进行离心测试（方法同2.4.1）、耐热测试（置40℃，7 d后恢复室温）、耐寒测试（置-15℃，7 d后恢复室温），观察样品的稳定性。实验结果表面，样品在上述条件下均未破乳、分层，样品稳定性良好。

2.6每喷平均喷射量考察

参照《中国药典》2020 年版四部 0112 喷雾剂项[10]下方法，进行每瓶总喷次、每喷喷量考察。

每瓶总喷次：取供试品4瓶（20 ml/瓶），除去盖帽，充分振摇，释放内容物至收集容器内，按压喷雾泵（注意每次喷射间隔 5 秒并缓缓振摇），直至喷尽为止，分别计算喷射次数。

每喷喷量：取供试品4瓶（20 ml/瓶），弃去若干喷次，擦净，精密称定，喷射 1 次，擦净，再精密称定。前后两次重量之差为 1 个喷量。分别测定标示喷次前（初始3个喷量）、中（n / 2 喷起4个喷量，n为标示总喷次）、后（最后 3 个喷量），共10个喷量。计算上述10个喷量的平均值。

实验结果表明，每瓶总喷次在130次左右，每喷喷量在0.14-0.15 g之间，每喷所含挥发油在7-7.5mg之间。

3 讨论

常山胡柚的栽培历史已有百余年之久，在衢州等地种植面积约7万亩，年产衢枳壳万余吨，产值达2亿多元。课题组根据衢枳壳止咳、化痰的用途，提出衢枳壳治疗呼吸道炎症的思路，并在前期研究证实衢枳壳对急性肺炎具有良好的治疗效果。在动物实验中，受剂型限制，衢枳壳有效部位目前仍采用滴鼻法给药，剂量较难控制，给药效果也不理想。本研究将衢枳壳有效部位制成工艺简单、稳定均一的喷雾剂，并考察了每喷喷量及每喷有效部位含量，为衢枳壳的药效研究提供了合适剂型，为后续研究奠定了实验基础。

本研究由杭州医学院大学生创新创业训练计划项目202113023010资助。

参考文献

[1]郑成,赵维良,宋剑锋,等.衢枳壳作为枳壳药用的论证和研究[J].中国现代应用药学,2022,39(16):2096-2102.

[2] 浙江省食品药品监督管理局. 浙江省中药炮制规范[M]. 北京: 中国医药科技出版社，2015：180－182.

[3] 钱李源, 徐小飞. 常山衢枳壳入选新“浙八味” [N]. 衢州日报, 2018-03-07(1).

[4] 江丽洁,田晓黎,袁强,等.常山胡柚栽培技术及衢枳壳化学成分和药理作用的研究进展[J].浙江林业科技,2022,42(05):129-136.

[5] 徐霄,汪洋,王思为,等. 衢枳壳黄酮组分抑制脂多糖诱导RAW264.7细胞炎症反应的作用机制研究[J].中国中医药科技,2019,26(04):529-532..

[6] 汪雯,蓝天,郑芳,等. 衢枳壳提取物改善2型糖尿病小鼠胰岛素抵抗的作用研究[J].浙江中医药大学学报,2022,46(09):936-944.

[7] 刘小娟,方月娟,夏道宗,等. 衢枳壳总黄酮提取工艺的优化及其抗氧化活性[J].中成药,2020,42(07):1687-1691.

[8] 刘小娟,姜小琴,方月娟,等. 衢枳壳总黄酮通过NF-κB信号通路对RSV感染哮喘小鼠肺损伤的保护作用[J].中华医院感染学杂志,2021,31(22):3376-3380..

[9]由振强,李丽丽,辛艳飞,等. 衢枳壳提取物通过调控MAPK/NF-κB/AMPK信号通路治疗脂多糖诱导的小鼠急性肺损伤[A].中国毒理学会.中国毒理学会第七次全国会员代表大会暨中国毒理学会第六次中青年学者科技论坛论文摘要[C].中国毒理学会:中国毒理学会,2018:136-137.

[10] 国家药典委员会.中华人民共和国药典[M].四部.北京:中国医药科技出版社,2020.