实时PCR检验在高危型人乳头瘤病毒中的诊断研究

实时PCR检验在高危型人乳头瘤病毒中的诊断研究

钱福文

罗平县人民医院 云南罗平655800

摘要：目的：探究实时PCR检验在高危型人乳头瘤病毒诊断中的临床价值。方法：2021年3月到2023年1月本院收集100例高危型人乳头瘤病变患者，分别实施PCR杂交分型和实时PCR检验，分析宫颈病变分级、鳞状上皮病变急慢性宫颈炎以及HPV阳性检出情况，对比分析技术检验价值。结果：实时PCR对高危宫颈病变的检出率高于PCR杂交分型（P<0.05），两组中危和低危检出率差异不高（P>0.05）；HPV阳性检出率均较PCR杂交分型更高（P<0.05）。结论：实时PCR检验对高危型人乳头瘤病变的诊断价值较高。

关键词：实时PCR；PCR杂交分型；高危型人乳头瘤病变；检出率

人乳头瘤病毒发病率高，会造成机体皮肤黏膜鳞状上皮增殖，良恶性病变现象均有发生，低危型人乳头瘤病毒感染则会增加尖锐湿疣的发生风险，高危型人乳头瘤病毒感染则会增加宫颈病变尤其是宫颈癌的发生机率，所以临床需要加强检验。实时PCR技术结合PCE技术和荧光标志技术，会显著提高高危型人乳头瘤病变检出效果[1]。本文对2021年3月到2023年1月高危型人乳头瘤病变患者进行实时PCR检验，效果理想，汇报如下。

1资料和方法

1.1一般资料

研究时段2021年3月到2023年1月，以本院高危型人乳头瘤病变100例为观察对象，均是女性，年龄分布范围24~58岁，均数（45.03±4.28）岁。本研究被伦理委员会批准开展，所有患者在知情同意书上签字。

1.2检验方式

本组患者均开展实时PCR和PCR杂交分型法检验。放置扩阴器，把患者宫颈暴露在外，棉拭子擦除分泌物，专用HPV宫颈刷在患者宫颈口部位转4~5圈进行样本采集，折断宫颈刷并放在保存液中标记。

实时PCR检验：处理标本，转速13000r/min，维持离心1min，把沉淀物放在50ul裂解液中，水浴加热，时间维持10min，离心后取上层清夜，作为PCR模板，根据说明书进行相应检验工作。

PCR杂交分型法检验：艾康的25型分型试剂检测，注意整个过程都需严格按照试剂盒及仪器说明书规范性操作。

1.3观察指标

对比宫颈病变高危、中危、低危患者的检出情况以及HPV阳性检出率。

1.4统计分析

SPSS23.0软件分析，计数资料x2检验；α=0.05为检验标准，P<0.05则提示差异存在统计学意义。

2结果

2.1分析不同程度宫颈病变检出情况  实时PCR对高危宫颈病变的检出率高于PCR杂交分型（P<0.05），在中危和低危检出率中，组间差异不高（P>0.05）。如表1所示。

表1 两种方法对不同程度宫颈病变的检出情况比较[n，（%）]

2.2两种方法HPV阳性检出情况分析  实时PCR检验HPV阳性率显著高于PCR杂交分型，差异具有统计学意义（P<0.05）。如表2所示。

表 2 两种方法HPV阳性检出情况比较[n，（%）]

3讨论

高危型人乳头瘤病毒是造成女性宫颈病变的关键因素，目前，全球宫颈癌死亡率较高，对女性健康具有较大消极影响。人体感染HPV病毒后，会改变自身免疫系统功能，生成炎性因子，直接损伤患者组织，自体黏膜明显增生，随着病情进展，可诱发恶性肿瘤，故早期诊断、早期治疗非常重要[2]。现阶段，临床发现HPV基因型百种，与生殖系统感染相关的占据40%左右，临床将其分为高危、低危两种类型，其中高危型病毒具有较高的恶变风险。

本次研究中，实时PCR检验法在HPV阳性和高危宫颈病变中的检出率均较PCR杂交分型更高，差异有统计学意义（P<0.05）。HPV病毒无法开展体外培养，血清检验应用受限，只能考虑细胞形态学检验技术手段。巴氏涂片作为基础细胞学检验方法，虽有一定检验价值，但对于感染HPV病毒的患者来说，形态学异常，会降低诊断敏感性，导致临床漏诊或误诊[3]。组织学检验准确度高，患者承受较大痛苦；分子生物学检验技术有较高的灵敏度，亦可有效分型。初期感染患者的症状并不典型，病毒长时间潜伏在体内，故分子生物学检验技术的应用前景广阔。PCR检验法敏感性和特异性均高，基于其发展而生的实时PCR检验法可以借助荧光信号，实时监测PCR进程，待荧光染料进入DNA双链，则会出现明显的荧光信号，该信号和PCR产物会呈现同步增加现象，实时PCR检验法检验系统和检验因方法学突出，会降低检验结果误差，保证整体检验成效，尽早检出HPV阳性患者和鳞状上皮病变急慢性宫颈炎患者，为后期临床治疗方案的确定提供有价值的参考依据[4]。

综上所述，实时PCR检验在高危型人乳头瘤病毒诊断中的临床价值颇高，建议临床推广和应用。

参考文献

[1] 应菲菲. 实时PCR检验在高危型人乳头瘤病毒诊断中的价值分析[J]. 实用妇科内分泌电子杂志,2022,9(5):103-106.

[2] 王晓明,戴卫健,余道军,等. 多重实时荧光定量PCR方法在高危型人乳头瘤病毒E6/E7 mRNA检测中的应用[J]. 临床检验杂志,2020,38(11):841-844.

[3] 戚华文,刘爵杰,吴铭华. 高危型人乳头瘤病毒诊断中实时PCR检验的应用研究[J]. 中国实用医药,2020,15(17):79-81.

[4] 时秀云,于欣,马苏琳. 荧光标志技术与PCR检验技术相结合在高危型人乳头瘤病毒诊断中的应用研究[J]. 中国现代药物应用,2019,13(19):6-8.

作者简介：姓名:钱福文（1983年9月~）籍贯 :云南罗平 民族:布依族
职称:主管检验师 学历:本科 主要从事：医学检验工作。