摘要：目的：通过对比探讨结核感染T细胞斑点试验在结核病的诊断筛查中是否具有更高的临床应用价值。方法：随机选取我院2015年7月～2016年8月的可能为结核患者120例，分别进行T-SPOT.TB检测和TST检测，使用统计学软件SPSS10.0统计分析T-SPOT.TB检测及TST检测的灵敏度和特异性等相关指标。结果：根据实验结果T-SPOT.TB检测的灵敏度为83.3%、特异度为88.8%、假阴性率为16.7%、假阳性率为13.3%；TST检测的灵敏度为70.0%、特异度为70.0%、假阴性率为30.0%、假阳性率为30.0%。T-SPOT.TB检测的灵敏度、特异度明显高于TST检测，而假阴性率、假阳性率明显低于TST检测。结论：T-SPOT.TB检测具有相对较高的灵敏度和特异性，比TST更加准确，更适合临床上结核病的筛查诊断。

关键词：结核感染T细胞斑点试验；结核病诊断；应用价值

结核病是由于结核分枝杆菌导致的一种常见的慢性传染病，常见于肺部[1]。WHO统计在2011年全球新发结核病患者达870万人，其中140万因结核病致死。目前临床上对于结核病的筛查常使用结核菌素实验（TST），该方法假阳性率比较高，容易造成误诊。而WHO在2004年的报告中指明结核病诊断率只有37%[2]。有研究认为结核感染T细胞斑点试验灵敏度和特异性较高，因此本文拟探讨结核感染T细胞斑点试验在结核病诊断中的应用价值。

1资料与方法

1.1一般资料随机选取我院2015年7月～2016年8月的可能为结核患者120例，其中男73例，女47例，年龄29～53岁。收集患者的家族病史、过往疾病史等相关资料。本次实验均已将全部实情告诉患者。

1.2方法

1.2.1 T-SPOT.TB检测方法根据上海复星长征医学科学有限公司的T-SPOT.TB试剂盒的说明书上的步骤进行。首先采集5 ml的外周静脉血，注意用肝素锂抗凝，分离出单个核细胞（PBMC）。准备好已经包被IFN-γ抗体的微量板，在4个孔中分别滴加植物血凝素、阴性对照培养液、结核特异性抗原早期分泌靶向抗原（ESAT-6）、滤液培养蛋白10（CFP-10）。然后每个孔中分别滴加浓度为2×105的PMBC。放入培养箱中孵育24 h，温度设置为37℃，然后采用PBS溶液洗脱抗原致敏效应T淋巴细胞，并加入碱性磷酸酶标记抗体，最后通过酶联显色使得细胞因子分泌的地方产生斑点，记录斑点数。当测量孔点数为阴性对照的两倍以上则认为是阳性[3]。

1.2.2 TST实验方法用还有5单位结核菌素的PPD 0.1 ml对患者进行前臂尺侧皮内实验，3 d后观察实验结果，如果过硬结直径大于10 mm则为阳性[3]。

1.3统计学方法采用统计学软件SPSS10.0对灵敏性、假阳性率等指标进行统计分析。

2结果

2.1 T-SPOT.TB检测与临床诊断结果比较临床诊断结果为：在可能为结核的120例患者中，确诊为结核病的有90例，T-SPOT.TB检测阳性结果为75例。将T-SPOT.TB检测与临床诊断结果进行对比。临床诊断中确诊为结核病的90例患者，T-SPOT.TB检测阳性75例（83.3%）、阴性15例（16.7%）；临床诊断中非结核病患者30例，T-SPOT.TB检测阳性4例（13.3%）、阴性26例（86.7%）。所以T-SPOT.TB检测的灵敏度为83.3%、特异度为88.8%、假阴性率为16.7%、假阳性率为13.3%。

2.2 TST检测与临床诊断结果比较TST检测阳性结果为60例。将TST检测与临床诊断结果进行对比。临床诊断中确诊为结核病的90例患者，TST检测阳性63例（70.0%）、阴性27例（30.0%）；临床诊断中非结核病患者30例，TST检测阳性9例（30.0%）、阴性21例（70.0%）。所以TST检测的灵敏度为70.0%、特异度为70.0%、假阴性率为30.0%、假阳性率为30.0%。

3结论

根据实验结果T-SPOT.TB检测的灵敏度为83.3%、特异度为88.8%、假阴性率为16.7%、假陽性率为13.3%；TST检测的灵敏度为70.0%、特异度为70.0%、假阴性率为30.0%、假阳性率为30.0%。T-SPOT.TB检测的灵敏度、特异度明显高于TST检测，而假阴性率、假阳性率明显低于TST检测。说明T-SPOT.TB检测具有相对较高的灵敏度和特异性，比TST更加准确，更适合临床上结核病的筛查诊断。

T-SPOT.TB检测的原理是：结核病患者的PBMC中会含有特异性T细胞，当T淋巴细胞受到结核分枝杆菌抗原刺激后分泌出IFN-y。所以在包被有干扰素抗体的微孔板放入患者的PBMC与ESAT-6、CFP-10、进行培养孵育。如果患者的PBMC中存在特异性T细胞时，那么培养液中的ESAT-6、CFP一10会刺激它分泌IFN-y，而IFN-y会被微孔板上的抗IFNC所捕捉，并与加入的碱性磷酸酶标记抗体结合，最终通过显色反应形成斑点。其中1个斑点代表着1个结核分枝杆菌致敏的T淋巴细胞，最后根据斑点总数来判断患者是否感染上结核分枝杆菌[4]。

TST检测是目前临床应用非常广泛的一种方法，它操作简便快捷，但是它会受到机体自身免疫状态影响，有研究认为在我国卡介苗接种率较高，会导致TST假阳性率较大。而T-SPOT.TB检测不会受到机体自身免疫状态影响，因此我们建议临床应该进一步推广使用T-SPOT.TB检测来进行结核病的筛查诊断[5]。

另外需要说明的是，T-SPOT.TB检测并非十全十美，它的价格相对较贵，对于结核病患者的病情是否为活动性、潜伏性等情况目前T-SPOT.TB检测并不能进行有效检测[6]。

参考文献：

[1]张敦熔.现代结核病学[M].北京：人民军医出版社，2000.

[2]王立红，付秀华，张桂芝，等.结核感染T细胞斑点试验在结核病诊断中的应用价值[J].中国防痨杂志，2013，35（12）：992-996.

[3]陶臻，曾娟.结核感染T细胞斑点试验在结核病诊断中的应用价值[J].临床肺科杂志，2012，17（9）：1632-1633.

[4]努尔阿米娜·铁力瓦尔迪，黎静.结核感染T细胞斑点试验在结核病诊断中的应用价值[J].新疆医学，2013，43（8）：36-38.