全自动快速微生物检测系统在鉴定流感嗜血杆菌的应用

全自动快速微生物检测系统在鉴定流感嗜血杆菌的应用

张凤兰

穆棱市疾病预防控制中心  157599

【摘要】 目的 分析全自动快速微生物检测系统（VITEK MS）在鉴定流感嗜血杆菌中的应用价值。方法 于2021年10月-2022年12月开展研究，选取本中心收集的80例呼吸道感染患者，获取其痰液标本或者咽拭子标本，分别采取VITEK MS、常规生化鉴定(API NH)、V+X因子试验三种方式检验，分析检测结果。结果 不同检验方式检出病菌比例对比，VITEK MS检出率最高，与V+X对比差异显著（P<0.05）；与API NH相比差异不显著（P>0.05）。检查所需时间对比，VITEK MS结论 VITEK MS鉴定流感嗜血杆菌，耗时短，检出准确率高。

【关键词】 VITEK MS；API NH；V+X因子试验；流感嗜血杆菌

【 Abstract 】 Objective To analyze the application value of automatic rapid microbial detection system (VITEK MS) in the identification of Haemophilus influenzae. Methods From October 2021 to December 2022, 80 patients with respiratory tract infection admitted to our hospital were selected and sputum samples or throat swab samples were obtained. VITEK MS, routine biochemical identification (API NH) and V+X factor test were used to analyze the test results. Results The detection rate of VITEK MS was higher than that of V+X (P<0.05). There was no significant difference compared with API NH (P>0.05). VITEK MS

【 Key words 】 VITEK MS; API NH; V+X factor test; Haemophilus influenzae

流感嗜血杆菌在呼吸道感染中较为多见，也是引发社区获得性肺炎的重要病原菌。目前，在流感嗜血杆菌的检验中，全自动快速微生物检测系统（VITEK MS）发挥了重要作用，可通过基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱，进行病原菌检测【1】。该检测方式在国内外研究中，均有广泛的应用。本次研究对其检验流感嗜血杆菌的价值进行分析。现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

于2021年10月-2022年12月开展研究，选取本中心收集的80例呼吸道感染患者为研究对象。获取其痰液标本或者咽拭子标本，进行16SRDNA检测测序，并以此为金标准，进行对比验证。

1.2 方法

1.2.1 选取80份呼吸道感染患者的痰液活咽拭子标本作为研究样本，均符合标本采集的标准。

1.2.2 V+X因子试验采取英国OXOID公司生产，VITEK MS选择法国BioMrieux公司生产的质谱仪，ABI-Rad凝胶成像系统。

1.2.3 分离、培养细菌。标本在流感嗜血培养基中接种，在35℃孵育箱中，保持恒温培养24-48h。

1.2.4 细菌生化鉴定。选择API NH细菌鉴定卡，根据说明书进行鉴定。

1.2.5 X-V因子需求试验。选择流感嗜血杆菌ATCC49247，按照说明书操作。

1.2.6 进行VITEK MS质谱仪鉴定。在无菌环境中，选取适量单个菌落，将其涂抹在质谱仪样品检测板上。将1μL基质液点上，干燥后，再进行检测。

1.2.7 进行16S rDNA检测、测序。提取模板DNA，将其实施16S rDNA基因PCR扩增，将产物送回原公司，开展DNA测序。并将结果输入BLAST与Genebank数据库，进行序列对比。将相似度再99%以上的判定为同种细菌。

1.3 观察指标

以16SrDNA检查结果为金标准，比较其余三项检出病菌比例；比较三种检查方法检查所需时间。

1.4 统计学分析

以SPSS 22.0软件对比数据。（±s）为计量方式，检验值为t；n（%）为计数方式，以X2检验。P<0.05，对比有统计学差异。

2 结果

2.1 不同检验方式检出病菌比例对比

不同检验方式检出病菌比例对比，VITEK MS检出率最高，与V+X对比差异显著（P<0.05）；与API NH相比差异不显著（P>0.05）。见表1。

表 1 不同检验方式检出病菌比例对比[n(%)]

2.2 三种检查方法检查所需时间对比

检查所需时间对比，VITEK MS

表 2 三种检查方法检查所需时间对比（±s）

3 讨论

   流感嗜血杆菌在呼吸道定植，当患者机体抵抗力下降时，就会导致各种呼吸道感染【2】。流感嗜血杆菌引发的呼吸道感染比例不断上升，在临床治疗中，需要明确是哪一种病原菌导致的感染，并通过精准用药，达到尽早治愈疾病的目的。

    VITEK MS在流感嗜血杆菌中鉴定出的阳性率较高，是一种理想的流感嗜血杆菌鉴定方式。且这种检验方式，主要依赖仪器的精密性，能够更加准确的评估是否为流感嗜血杆菌感染【3】。但目前，在临床研究中存在一个问题，那就是流感嗜血杆菌数据库未完善，需要在今后的研究中，建立不同分型流感嗜血杆菌数据库。通过对菌落与基质液共结晶的均匀程度，基质液的保存时间长短，点样是否接触到平板的琼脂部分对鉴定率也存在一定的影响【4】。在实施V+X因子需求试验时，鉴定的阳性率较低，与VITEK MS相比，存在较高的漏诊情况。原因在于流感嗜血杆菌培养环境要求高，而V+X因子保存条件、保存时间，以及菌液浓度调配、培养时间等控制效果均欠佳，因而鉴定的阳性率低【5】。另外，在0.5麦氏比浊菌液调整为3个麦氏点时，培养24h，可提升检出的阳性率。在V+X因子需求试验时，不需要昂贵的仪器，因此，在基层医院中应用较为普遍。

综上，在鉴定流感嗜血杆菌的过程中，VITEK MS鉴定准确率高，耗时更短。

参考文献

[1]张海军,方海. b型流感嗜血杆菌疫苗纳入免疫规划的卫生经济学研究系统评价[J]. 中国疫苗和免疫,2020,26(4):455-459,473.

[2]秦淑国,许元元,赵萍萍,等. 全自动快速微生物质谱检测系统在流感嗜血杆菌快速鉴定中的价值分析[J]. 热带病与寄生虫学,2022,20(2):94-95,102.

[3]韦海峰. 全自动快速微生物检测系统在鉴定流感嗜血杆菌的应用分析[J]. 医学美学美容,2019,28(17):71.

[4]陆伟桃,郭菁,邓晨晖,等. 探讨全自动快速微生物检测系统在鉴定流感嗜血杆菌的应用[J]. 检验医学与临床,2016,13(7):944-945.

[5]秦淑国,许元元,赵萍萍,等. 全自动快速微生物质谱检测系统在流感嗜血杆菌快速鉴定中的价值分析[J]. 热带病与寄生虫学,2022,20(2):94-95,102.