带你了解什么是临床微生物检验

带你了解什么是临床微生物检验

崔莎莎

米易县疾病预防控制中心  四川攀枝花  617200

临床微生物检验也被称作诊断微生物学，它属于医学微生物学的范畴，重点是对感染性疾病能够快速、准确地检验出病原体的策略与方法进行研究，为临床诊断提供依据，并对进一步合理用药和防止感染继续扩散进行指导的学科。今天，我们将对临床微生物检验做一个简要的介绍。

1什么是临床微生物检验

临床微生物检验是对人体的各种物质进行微生物检验，为临床诊断和治疗提供依据。整个检验过程包括病人样品的采集、运送、处理，样品中致病微生物的分离、培养、鉴定、药物敏感试验，出具检验报告。

2临床微生物检验的项目

微生物室检验是医学检验中的一个重要分支，主要用于检测人体内的微生物感染情况。微生物室检验的项目包括细菌培养、真菌培养、病毒检测、抗生素敏感性试验等。细菌培养是微生物室检验中最常见的项目之一。通过对患者样本进行细菌培养，可以确定患者是否感染了细菌，并且可以确定细菌的种类。细菌培养的方法包括血液培养、尿液培养、脑脊液培养等。在细菌培养过程中，需要注意无菌操作，避免污染。

3临床微生物检验的目的：

可靠的微生物检验结果，可以对临床的诊断治疗产生一定的指导作用，为临床科学用药和成功控制感染提供依据，是正确、合理地使用抗菌药物，延缓细菌耐药性的发生，减少抗菌药物滥用和监测医院感染最重要的一步。

4临床微生物检验的要求：

临床微生物检测要求快速准确地出具检测报告；化验员应具备较好的微生物学基础，能熟练掌握操作技术，并培养良好的无菌观。在检测过程中，要进行全面的质量管理，并接受质量监督检查。同时要高度重视实验室的消毒和灭菌。

诊断试验的选择原则：选择有鉴别价值的试验来鉴别两种细菌，必须选择一项两种菌表现出完全不同的试验，也就是一种菌表现出阳性，一种菌表现出阴性，该试验才有鉴别价值。否则，就没有鉴别价值。

（1）鉴定一种细菌可能有多种特异的方法，但没有必要逐一进行试验，只选择其中一种或两种达到目的即可，多选无意义。

（2）选择简单快捷的检测方法。

（3）选择混合介质，可以在同一时间内观察到数种生化反应。 综合考虑试验的敏感性和特异性 （敏感性=所有阳性结果数/所有感染病人数，试验敏感性越高，假阴性结果就越少。特异性=阴性结果总数/未感染病人数，较高的特异性可降低假阳性率）。试验的敏感性和特异性是相互联系的，如果检测的灵敏度提高，则特异性降低；而检测的灵敏度降低，则特异性提高。

标本的采集和运送：

标本采集的原则：尽可能在病情早期，急性期，或者出现明显症状的时候进行采集，同时需要在服用抗生素和其他抗菌药物前进行采集。所收集的样本必须不受外来因素的影响。在收集血液、脑脊液、胸腔积液等的无菌化样本时，必须严格执行无菌操作，并将收集到的样本放入无菌化容器中。针对不同菌种的特点，采取不同的处理方法。收集适量的样本，不能太多，也不能太少，要有代表性，一些样本还应该在不同的时间、不同的部位进行采集。在采血过程中，既要避免皮肤粘膜上的病菌污染，又要保证采血过程中的安全性，避免因采血而引起的传染与感染。

标本的运送：

细菌：用于分离培养细菌的标本应在运送培养基中运送并保存于合适的温度。分离不同的病原菌使用的运送培养基也不同，一般冷藏运送(奈瑟菌属、流感嗜血杆菌应在20-36℃保温运送)。

病毒：用于分离病毒的标本，一般应放在4℃的容器里，最好2小时内送达实验室，最长不可超过24小时，如果不能立即分离病毒，应将标本-20℃冷冻暂时保存。若长期储存，应在-70℃以下冻存。

免疫检测标本：检测抗体的血清标本可在4℃保存约一个星期，超过一个星期必须在-20℃下冷冻保存；用于检测抗原或抗体的其它标本可以4~8℃保存24-28小时，在-20℃可保存时间更长。

检测核酸样本：要求低温快速送检，4℃暂存立即 (2小时内) 送达实验室，-20℃以下低温冷冻保存，需长期保存的标本存于－70℃冰箱，防止核酸降解。

微生物检验：病人的样本在收集后必须马上做微生物检验。检查方法有直接显微镜检查、快速诊断、直接药物敏感试验、常规检查等。

（1）直接镜检

用涂片、染色和镜检的方法，对尿液和脑脊液进行稀释，并用显微镜进行观察，得到初步的结果，为临床诊断提供依据。

（2）快速诊断

快速检测病原体的方法有两种，一种是特异性抗原，另一种是核酸检测。特异性抗原检测包括免疫荧光技术、胶乳凝集试验、酶免疫技术、对流免疫电泳、化学发光测定等。核酸检测包括核酸杂交、PCR技术。

（3）直接药敏试验

直接药敏试验是指将临床样本直接接种到平板上，并与病原体进行分离和培养，用抗菌纸进行药敏试验，18-24小时即可得到结果。

（4）常规检验

分离培养

一般取普通无菌处的样本，接种在血板上，放入孵箱中进行培养。如果最初的培养是阴性的，但是根据镜检和临床信息，认为有可能存在病原菌，那么就应该重新采集更多的样本，然后用离心浓缩或溶解离心法处理，取沉淀物接种到营养丰富的需氧或厌氧培养基中进行培养。

在收集到有正常菌群的样本时，要使用有利于致病菌生长的选择性培养基，还可以加入一些抗生素来抑制细菌的生长。

鉴定

细菌的形态、菌落特征、生化反应、血清学检测、动物免疫等是细菌分离培养的主要依据。

（5）报告

直接镜检要求2h内报告；在24小时内出具初步鉴别和直接药物敏感性的结果；最终的检验与药物敏感性通常在3天之内完成，并要求除血液培养以外的所有样本都要在24小时之内完成检验。

目前，从临床的需求角度来看，临床微生物检验最大的问题就是报告发放的速度太慢，培养及药敏短则需要3天，长则需要数周，难以满足临床的需求。所以与传统微生物检测方法相比，临床微生物检验技术的未来趋势主要是向“快”和“精准”两个方面发展。“快”，故名思义，就是以最快的速度来进行细菌的鉴定和药敏。目前，采用质谱技术已经可以达到快速鉴定病原菌的目的，但尚不能解决快速药敏的检测。因此，未来质谱技术的一个重要的发展方向就是用于临床药敏的快速检测。“精准”也很容易理解，就是说病原菌的培养、鉴定和药敏，仅仅有速度是不够的，还必须准确。这就需要我们不断加强学习、正确地采用各种临床微生物检验技术，做好质量控制，从而得到精准的检验报告。

微生物检验要严格遵守检测流程，在检测样品之前，必须先对操作环境进行消毒，在进行检测的过程中，要谨防二次污染。虽然当前微生物检验中应用了很多自动化仪器设备，但在各个检验环节中，仍然需要较高的主观分析判断能力。检验人员的知识、技能、经验等都将影响微生物的检验质量。检验人员上岗前需要进行综合培训，考核通过才能上岗工作，同时还要不断地学习新技术、新方法，提高微生物检验水平。