肺炎支原体检验方法在医学检验中的应用价值探析

(整期优先)网络出版时间:2023-09-28
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肺炎支原体检验方法在医学检验中的应用价值探析

赵敏

聊城市第二人民医院 252600 山东省聊城市临清市

摘要:目的探讨化学发光法检测肺炎支原体(MP)IgG和IgM抗体在儿童肺炎支原体感染诊断中的价值。方法收集了2021年9月—2022年9月在医院收治的确诊MP感染患者66非MP感染患者63例的相关资料,采用化学发光免疫分析法(CLIA)方法在患者发病早期(7d以内)进行血清肺炎支原体IgG和IgM抗体检测,并在3d~12d内再次检测血清肺炎支原体IgG和IgM抗体水平。结果配对血清IgM1.44倍升高作为截断值,敏感度为0.909,特异度为0.937。配对血清IgG1.66倍升高作为截断值,敏感度为0.833,特异度为0.984。恢复期第2次检测IgM为阳性作为诊断指标,敏感度为0.803,特异度为0.889。恢复期第2次检测IgG为阳性作为诊断指标,敏感度为0.652,特异度为0.825。患者感染急性期检测IgM抗体和IgG抗体AUC接近0.5,对诊断MP感染无帮助。结论CLIA法检测Mp简便、快速、灵敏度高,且特异性强,检测不需任何特殊设备,检测过程中无气溶胶污染,其有望成为快速检测Mp的新方法。

关键词:肺炎支原体检验医学检验

引言

肺炎支原体(Mp)是一种常见的病原微生物,主要通过呼吸道传播,其不仅可引起多种呼吸道疾病,还可导致肺外其他系统的多种并发症。呼吸道病原体引起的感染症状比较相似,很难靠临床症状及常规检测方法进行明确的早期诊断。因此,快速、高灵敏、高特异性的检测方法对诊断、鉴别呼吸道病原体感染至关重要。本研究拟建立CRISPR⁃LAMP检测Mp的新方法,以实现Mp快速、精准检测。

1资料与方法

1.1一般资料

选择2021年9月—2022年9月在医院收治的患者共129例,其中女性56例,男性73例,所有标本采集后2d内完成检测。纳入标准:出现相关症状后              7d内来本院就诊,之前未接受抗感染和抗病毒治疗,入院或出院诊断为肺炎支原体感染,无其他并发症,入院后鼻咽拭子细菌培养阴性,EB病毒相关检测阴性。排除标准:合并慢性基础性疾病,如先心病、慢性肾炎、肾病综合征、自身免疫性疾病和免疫缺陷病;近期使用免疫抑制剂者(如糖皮质激素、雷公藤多苷等)。

1.2方法

清晨空腹状态下采集患儿的肘静脉血2ml,在iFlash2000全自动化学发光仪上检测血清MPIgG和MPIgM抗体,给予测定,具体操作严格按照说明书执行,采集标本后2h取报告单。若检测结果为阴性,3d后再次进行1次测定。

1.3观察指标

MP感染组和非MP感染组结果;MP感染组和非MP感染组恢复期血清肺炎支原体抗体分析。

1.4统计学方法

采用SPSS22.0对研究对象采集的数据进行分析处理,计量数据采用(±s)表示;计数资料采用%表示,使用χ2对数据进行校检;P>0.05为差异无统计学意义。

2结果

2.1MP感染组和非MP感染组结果

入院后第1次血清MPIgM检测2组之间差异无统计学意义(P>0.05),第2次检测2组的血清MPIgM差异有统计学意义(P<0.001),2组IgM升高倍数(第2次IgM/第1次IgM)差异有统计学意义(P<0.05),见表1。第1次血清MPIgG检测显示2组之间差异无统计学意义(P>0.05),第2次检测2组的血清MPIgG差异有统计学意义(P<0.001),2组IgG升高倍数(第2次IgG/第1次IgG)差异有统计学意义(P<0.001),见表2。

表1MP感染组和非MP感染组IgM结果

表2MP感染组和非MP感染组IgG结果

2.2MP感染组和非MP感染组恢复期血清肺炎支原体抗体分析

单次检测恢复期IgM抗体和IgG抗体,根据本科室SOP设定的参考区间将结果分为阴性和阳性,进行χ2检验(表3、表4)。2组IgM阳性率不相等(χ2=60.028,P<0.001);敏感度为0.803(0.683~0.887),特异度为0.889(0.778~0.950)。2组IgG阳性率不相等(χ2=30.123,P<0.001);敏感度为0.652(0.523~0.762),特异度为0.825(0.705~0.906)。

表3恢复期单次检测IgM抗体结果

表4恢复期单次检测IgG抗体结果

3讨论

实验室病原学检测是Mp感染诊断的关键,检测Mp的传统方法为分离培养和血清学试验。但培养法因周期较长、灵敏度低在临床应用中受到极大限制;血清学抗体检测也不能实现Mp早期检测,故上述方法限制了其在临床实验室的广泛开展。PCR技术在实验室诊断中起到了关键的作用,目前已成为Mp首推的重要的检测手段之一,但用于临床实验室的PCR技术都需依赖特定场所、设备、仪器及经培训上岗的工作人员,操作复杂、费时、技术要求高,不适合Mp检测的常规开展。血清学、培养法、分子检测在临床实践中各有优缺点,因此亟需研发、转化可灵敏、准确鉴定Mp的新技术方法。通常情况下,肺炎支原体感染起病后1周,支原体抗体才能在体内达到高峰值,此时更利于CLIA法测,而微生物培养可以直接采集咽喉与口腔的标本,所以对于病程≤7d的患儿阳性诊断率更高。

结束语

综上所述,CLIA法有望成为检测Mp的新手段,可为社区及基层医院广泛检测Mp提供新方法。

参考文献

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