TRAF6和OTUD5在结直肠癌中的表达情况及其临床意义

TRAF6和OTUD5在结直肠癌中的表达情况及其临床意义

施凉潘  祁金羽  郑志华王伟东 庄海滨

福建医科大学附属泉州第一医院  N17区胃肠外科  362000

【摘要】目的：探讨肿瘤坏死因子受体相关因子6（TRAF6）和卵巢肿瘤结构域蛋白去泛素化酶5（OTUD5）在结直肠癌患者中的表达水平及临床意义。方法：收集患者的临床基本信息，选取患者的结直肠癌组织及癌旁组织，采用免疫组化化学技术检测TRAF6和OTUD5阳性表达率及与患者临床病理特征的相关性。结果：结直肠癌组织中的TRAF6阳性表达率明显高于癌旁组织（P<0.05），而OTUD5阳性表达率明显低于癌旁组织（P<0.05），在TRAF6阴性组中远处转移发生率明显高于TRAF6阳性组，OTUD5阴性组TNM分期在III期及IV的比例明显高于OTUD5阳性组。结论：TRAF6和OTUD5与结直肠癌的发生、发展密切相关，其作用机制有待进一步探究。

关键词：结直肠癌；TRAF6；OTUD5

【中图分类号】R735.3【文献标识码】 A  

结直肠癌是临床上常见的消化道肿瘤，该病发病隐匿、起病迅速、预后极差，严重影响患者的生活质量。据统计，我国结直肠癌的发病率占所有恶性肿瘤的28%，死亡率为29.75%，且呈逐年递增的趋势。晚期患者多数确诊时已经发生全身性血液系统、淋巴系统或神经系统转移，临床症状多以淋巴结转移、中枢神经系统症状等为主。因此，早期诊断对结直肠癌患者的临床疗效及预后具有非常重要的参考价值，目前，临床上针对肺癌的诊断方式主要有影像学检查、鉴别诊断、组织病理学检查等[1]。组织病理学检查具有经济便捷、准确度高等特点而被临床广泛使用。肿瘤坏死因子受体相关因子6（TRAF6）和卵巢肿瘤结构域蛋白去泛素化酶5（OTUD5）是评估结直肠肿瘤的指标，TRAF6是一种经典的E3泛素连接酶，它的泛素化活性受到多种因素的调节，在多种信号通路以及自噬中发挥作用，最终影响炎症反应、神经性疾病和癌症的发生。OTUD5是近年来新发现的一种DUB亚型，OTUD5选择性地切割E3泛素连接酶TRAF3上Lys63连接的多聚泛素链。OTUD5通过阻断泛素化导致E3泛素连接酶与下游信号复合物分离，从而发挥负调节先天免疫反应作用[2]。因此，本研究通过检测结直肠癌患者癌组织及癌旁组织中TRAF6和OTUD5水平与临床病理特征及预后的相关性，旨在为结直肠癌患者的临床病理特征的提供评估方向，为患者的临床疗效及预后提供参考指标。

1 资料与方法

1.1 一般资料 

选取在泉州市第一医院诊治的19例结直肠癌患者为研究对象，选取年限为2018年1月至2019年12月。回顾性分析所有患者的临床资料，其中男性患者12例，女性患者7例；患者年龄37~75岁，平均年龄（59.27±3.98）岁；纳入标准：（1）患者符合《中国临床肿瘤学会（CSCO）：结直肠癌诊疗指南2022》中关于CRC的诊断标准；（2）经病理学检测证实为结直肠癌；（3）TNM分期为I~IV期；（4）近3个月内无其他手术史；（5）临床资料完整。排除标准：（1）合并其他恶性肿瘤的患者；（2）患有先天性心脏、肾脏等重要脏器缺陷类疾病；（3）具有严重精神疾病或精神病史的患者；（4）处于妊娠期或哺乳期的女性患者。所有患者对研究内容均知情同意，且本研究经医院伦理委员会审批通过。

1.2 检测方法

采用免疫组织化学染色法分析结直肠癌患者癌组织及癌旁组织中TRAF6和OTUD5表达水平，组织样本石蜡包埋、切片、烘干后进行脱蜡、脱水处理，加入一抗、二抗后孵育过夜，用DAB显色剂和苏木素复染，封片后在显微镜下观察。试剂盒购自上海碧云天生物科技有限公司，一抗、二抗购自北京Bioss公司，严格按照实验步骤进行操作。

1.3检测指标

判定标准：根据阳性细胞染色强度及所占比率进行评估，大量棕色或褐色颗粒计3分，较多的棕黄色颗粒计2分，可见部分淡黄色颗粒计1分，无明显着色计0分；随机选取5个高倍视野，计数阳性染色细胞所占比率，阳性细胞数低于5%计0分，5%~25%计1分，26%~50%计2分，50%以上计3分，最终得分为分数之和，0~2分为阴性，3分及以上为阳性。

1.4统计学方法

采用SPSS23.0实现本研究数据的统计学分析，计数资料的表示与检验方法分别为百分数（%）和卡方（χ2）检验，检测指标的表示与检验方法为均数标准差x±s和独立样本t检验，检验水准α=0.05，以P<0.05为差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 结直肠癌患者癌组织及癌旁组织TRAF6和OTUD5阳性表达率比较

结果显示，结直肠癌组织中的TRAF6阳性表达率明显高于癌旁组织（P<0.05），而OTUD5阳性表达率明显低于癌旁组织（P<0.05），如表1所示。

表1  TRAF6和OTUD5阳性表达率比较（n）

2.2 TRAF6和OTUD5与结直肠癌患者病理特征的关系

结果显示，在TRAF6阴性组中TNM 分期在III~IV期及远处转移发生率明显高于TRAF6阳性组，OTUD5阴性组TNM分期在III~IV期及远处转移明显高于OTUD5阳性组。VEGF和NLR水平与临床病理特征的关系

表2 病理特征分析（n/%）

3 讨论

本研究结果显示，结直肠癌组织中的TRAF6阳性表达率明显高于癌旁组织，而OTUD5阳性表达率明显低于癌旁组织，在TRAF6阴性组中远处转移发生率明显高于TRAF6阳性组，OTUD5阴性组TNM分期在III期及IV的比例明显高于OTUD5阳性组。结果提示，TRAF6高表达与癌症进展密切相关，TRAF6以Lys63位点连接自噬相关蛋白不仅可诱导自噬，调控胃癌细胞EMT并促进肿瘤迁移，OTUD5通过去除靶蛋白中泛素分子，从而起到逆转TRAF6的作用；通过调控自噬信号通路，从而抑制肿瘤的发生、转移。

参考文献

[1]何亚琴,苏进达,赵少辉等.结直肠癌细胞中NF-κB活化与TRAF6、CCR5及PTEN/PI3K通路的关系及作用[J].中国普通外科杂志,2022,31(10):1363-1372.

[2]陈妲,吴江妮,韦二丹等.TRAF6和OTUD5在结直肠癌中的表达情况及其临床意义[J].中国临床新医学,2022,15(09):817-821.

课题名称：miR-146b-5p靶向TRAF6调控结直肠癌进展的机制研究

编号：2023NS052

泉州市科学技术局