盐酸达泊西汀含量测定方法的建立

盐酸达泊西汀含量测定方法的建立

邢雪忠

海南辉能药业有限公司  海南海口  570216

摘要：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂（Waters XTerra@ RP18, 150mm×3.0mm，3.5μm或效能相当的色谱柱），采用HPLC法测定盐酸达泊西汀含量，该方法快速、准确、有效。达泊西汀在6.82～136.36μg/ml范围内，线性关系良好。

关键词：盐酸达泊西汀、HPLC法、含量测定、线性关系

盐酸达泊西汀，中文化学名：(+)-(S)-N,N-二甲基-(α)-[2-(1-萘氧基)乙基]苯甲胺盐酸盐，为白色或类白色结晶性颗粒或粉末，在水或甲醇中易溶，在异丙醇中微溶，在正己烷中几乎不溶。盐酸达泊西汀是一种选择性5-羟色胺再吸收抑制剂，半衰期短，用于治疗男性早泄，由强生制药等公司开发，在欧洲少数国家上市。

建立本方法能快速、准确、有效的对盐酸达泊西汀含量进行测定，保证了盐酸达泊西汀的质量可控，在生产和质量控制方面具有重要的意义。

一、仪器和试药

1、仪器：高效液相色谱仪、电子天平。

2、对照品：盐酸达泊西汀对照品（企业自制，含量99.9%）。

3、供试品：盐酸达泊西汀（批号：Y191201、Y191201、Y191201，本公司自制）。

4、试剂：乙腈（HPLC）、甲醇（HPLC）、磷酸（HPLC）、碳酸氢铵（AR）、二乙胺（AR）。

5、色谱柱：十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂（Waters XTerra@ RP18, 150mm×3.0mm，3.5μm或效能相当的色谱柱）。

二、测定方法

1、色谱条件：

以用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂（150mm×3.0mm，3.5μm或效能相当的色谱柱）；以含10mmol/L碳酸氢铵和6mmol/L二乙胺的水溶液-乙腈（40:60）为流动相；柱温为35℃，流速为0.6ml/min，检测波长为293nm。

2、溶剂制备：0.1%磷酸-甲醇(35:65)。

3、对照品溶液：取盐酸达泊西汀对照品约34mg，精密称定，置50ml棕色量瓶中加溶剂超声使溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取5ml，置50ml棕色量瓶中，加溶剂稀释至刻度，摇匀，作为对照品溶液。

4、供试品浓度：取本品约34mg，精密称定，置50ml棕色量瓶中加溶剂〔0.1％磷酸-甲醇(35：65)〕超声使溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取5ml，置50ml棕色量瓶中，用溶剂稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液。

三、方法验证试验及结果分析

3.1专属性试验:取盐酸达泊西汀对照品、杂质C、杂质G对照品各适量，分别加溶剂溶解并稀释制成各含0.06mg/ml的溶液，作为各组分定位溶液。另取盐酸达泊西汀对照品、杂质C、杂质G对照品各适量，置于同一量瓶，并稀释制成每1ml含各含0.06mg浓度的混合溶液，作为系统适用性溶液，进样分析。

结果表明：在含量测定色谱条件下，本品的溶剂峰对含量测定不产生干扰，主峰前后的杂质C和杂质G与主成分有效分离，主峰理论塔板数符合要求，方法专属性良好。

3.2线性与范围：取盐酸达泊西汀对照品适量，精密称定，置20ml量瓶中，加溶剂溶解并定量稀释制成约0.6mg/ml的溶液，摇匀，作为线性储备液。精密量取线性储备液各0.1、0.2、0.5、1.0、1.2、1.5、2.0ml分别至10ml量瓶中，加溶剂稀释至刻度，摇匀，作为各浓度梯度的供试品溶液，进样分析。结果表明，盐酸达泊西汀在6.82～136.36μg/ml的浓度范围内峰面积与溶液浓度呈良好线性关系，相关系数r为1.0000，符合要求。

3.3溶液稳定性试验：取盐酸达泊西汀适量，精密称定，加溶剂溶解并定量稀释制成约0.06mg/ml的溶液，作为供试品溶液，分别于0、2、4、6、8、10、12小时进样，记录色谱图，考察其峰面积的变化。结果表明，本品供试品溶液在12小时内，主峰峰面积没有明显变化，RSD小于2.0％，说明本品供试品溶液于12小时内稳定性良好。

3.4进样精密度：取盐酸达泊西汀适量，精密称定，加溶剂溶解并稀释制成每1ml约含0.06mg的溶液，作为供试品溶液，精密量取该溶液10μl，连续进样6针，计算其进样精密度。结果表明，本品含量测定方法的重复性良好，RSD小于2.0％（n=6），符合要求。

3.5重复性试验：取盐酸达泊西汀约34mg，精密称定，置50ml棕色量瓶中加溶剂〔0.1％磷酸-甲醇(35：65)〕超声使溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取5ml，置50ml棕色量瓶中，用溶剂稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液，平行配置6份；取盐酸达泊西汀对照品约34mg，精密称定，置50ml棕色量瓶中加溶剂超声使溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取5ml，置50ml棕色量瓶中，加溶剂稀释至刻度，摇匀，作为对照品溶液，进样分析，计算平均值和相对标准偏差。结果表明，本品含量测定方法的重复性良好，RSD小于2.0％（n=6），符合要求。

3.6耐用性试验：将本品含量检测色谱条件分别作适当变动（柱温、流动相比例、流速、水相二乙胺浓度、不同色谱柱），考察在不同条件下供试品溶液中主峰的保留时间、含量测定结果的变化。结果表明：在上述各色谱条件下，系统适用性溶液中，各杂质与主成分峰分离度均大于2.0；样品溶液中本品主成分峰保留时间在不同色谱条件下略有差异，主成分峰的理论塔板数符合要求，含量测定结果无显著差异。表明本含量测定色谱条件耐用性良好。

四、样品含量测定

按照上述方法对三批样品进行含量测定，结果分别为Y191201：99.5％、Y191202：100.3％、Y200201：99.5％。

五、结论

综上所述，本品建立的含量测定方法的各验证指标均符合可接受标准，方法验证符合要求，该方法适用于盐酸达泊西汀的含量测定。

参考文献

[1]盐酸达泊西汀片国家食品药品监督管理局进口药品注册标准（JX20090323）

[2] 《2020年版中国药典》四部.国家药典委员会

[3] 化学药物质量标准建立的规范化过程技术指导原则