探讨实时荧光定量PCR仪用于流感病毒检测的效果分析

探讨实时荧光定量PCR仪用于流感病毒检测的效果分析

张群

山东省淄博市疾病预防控制中心255026

【摘要】 目的 本文针对性分析流感病毒检测使用实时荧光定量PCR仪的效果。方法 研究起止于2022年1月-2023年1月，择200例我市国家级流感哨点医院收治的流感样病例患者作为本次研究对象，研究期间根据检测方案不同将患者分两组行区别检测，参照组（100例）行细胞培养法检测，研究组（100例）行实时荧光定量PCR仪检测，统计两组检测结构，分析其差异性。结果 统计数据，流感样本阳性总例数检出率研究组高于参照组P＜0.05，分型中阳性新甲H1型检出率高于H 3亚型及B型P＜0.05，数据显示以研究组检测检出率较高。结论 在对流感病毒检测时使用实时荧光定量PCR仪临床检出率较高，可为患者临床治疗提供准确依据，进而患者疾病得到有效治疗，因此建议临床广泛使用。

【关键词】流感；病毒检测；实时荧光定量PCR

流感就是流行性感冒，根据血凝素和神经氨酸酶，就是流感病毒上的结构之一。流感可以分为甲型流感、乙型流感和丙型流感[1]。流感病毒，是一种造成人类及动物患流行性感冒的RNA病毒，会造成急性上呼吸道感染，并借由空气迅速的传播，在世界各地常会有周期性的大流行[2]。流行性感冒病毒在免疫力较弱的老人或小孩及一些免疫失调的病人会引起较严重的症状，如肺炎或是心肺衰竭等。在临床上，流感会引起季节性传染性疾病，尤其是秋冬季。目前流感也是我们面临的公共卫生健康问题。

1 资料与方法

1.1 一般资料

研究起止于2022年1月-2023年1月，择200例我市国家级流感哨点医院收治的流感样病例患者作为本次研究对象，研究期间根据检测方案不同将患者分两组行区别检测，，研究组：患病年龄5-35岁，年龄均值（20.14±2.36），本组男性30例（60.00%）、女性20例（40.00%）；参照组：患病年龄5-39岁，年龄均数（22.34±2.25）岁，本组男性31例（62.00%）、女性19例（38.00%），资料对比显示P＞0.05，可进行对比分析。

1.2 方法

1.2.1 仪器型号与试剂： ABI 7500 Fast荧光PCR扩增仪；核酸提取采用RNA病毒提取试剂盒RNeasy Mini Kit； PCR反应试剂； 狗肾传代细胞。

1.2.2 标本采集和处理： 使用核酸提取试剂盒的实时荧光定量PCR方法提取季节性H1亚型、季节性H3亚型、新H1亚型以及H5、H7、H9等亚型检测的样本，所有操作程序均按照试剂盒使用说明书进行。 根据说明书，在50℃30分钟、1个循环、95℃5分钟、1次循环、95摄氏度10秒、45次循环、55摄氏度40秒、45个循环的条件下，逆转录处理后扩增RNA。最后用FAM通道在55℃下进行单点荧光检测[3]。

1.2.3 病毒细胞分离鉴定： 将10000 U/mL双抗体适当添加到收集的样品中，并将其接种到单层狗肾传代细胞上。注意观察细胞病变，在病毒培养基上进行细胞凝集试验，检测细胞病变和细胞凝集。如果凝集试验符合1:16或以上的细胞培养要求，则可使用相关亚型标准血清进行红细胞凝集抑制试验，以鉴定流感病毒的类型和亚型[4]。

1.3判定标准

观察区别后计算各组检测检出率，并引用统计学将其数据分析对比，同时判定检测方法的有效性。

1.4 统计学方法

实验所有数据全部借助专业系统软件SPSS21.0处理，实验人员对患者管理后的观察结果进行了详细地记录，当中计数数据运用（x±s，%）代替，两组差别比照运用t、x2检测。若两组比照结果 P＜0.05，则说明实验价值显现。

2 结 果

表1 对比两组检测检出率[（n）%]

3讨论

实时荧光定量PCR技术主要应用于流感、禽流感、麻疹、手足口病等传染病的临床诊断，在食品安全和科学研究中也发挥了重要作用[5]。

本次研究数据显示，流感样本阳性总例数检出率研究组高于参照组P＜0.05，分型中阳性新甲H1型检出率高于H 3亚型及B型P＜0.05，数据显示以研究组检测检出率较高。

综上所述，在对流感病毒检测时使用实时荧光定量PCR仪临床检出率较高，可为患者临床治疗提供准确依据，进而患者疾病得到有效治疗，因此建议临床广泛使用。

【参考文献】

[1]罗周正,张丽艳,李贺,等. 探讨实时荧光定量PCR仪用于流感病毒检测的效果分析[J]. 中国医药指南,2020,18(16):96-97.

[2] 张月新. 探讨实时荧光定量PCR仪用于流感病毒检测的效果分析[J]. 中国医疗器械信息,2022,28(2):62-64. DOI:10.3969/j.issn.1006-6586.

[3]范新. 实时荧光定量PCR在儿童肺炎支原体感染中的临床价值分析[J]. 中国医药指南,2019,17(14):125.

[4]崔忠心. 流感病毒2种检测方法的对比分析[J]. 健康必读,2020(22):22-23.

[5]钟小婷,肖仁威,江秀兰. 胶体金免疫层析法快速检测流感病毒的临床研究[J]. 深圳中西医结合杂志,2019,29(6):71-72. DOI:10.16458/j.cnki.1007-0893.2019.06.034.