糖尿病患者生化免疫检验中化学发光免疫测定技术知识你知道

糖尿病患者生化免疫检验中化学发光免疫测定技术知识你知道

宋继英

沈阳医学院附属中心医院检验科110024

说起糖尿病患者，在我们平时生活中都会遇到。糖尿病它是一种慢性代谢性疾病，是因为人体胰岛素分泌功能发生障碍而诱导的，其特点是有很长的病程，有着较高的发病概率。目前，临床还没有完全掌握糖尿病的病理机制，通常认为，患上糖尿病与患者年龄、遗传、环境等因素密不可分。近些年以来，糖尿病患者队伍不断扩大，而糖尿病患者的机体长期维持在高血糖条件下，这就利于细菌更快繁殖，并致多个器官受损。现在，临床都要患者终身服药，以控制病情。所以，转变糖尿病预后的重要方式就是尽早确诊、尽早治疗。

临床都采用哪些方法来诊断糖尿病的呢？

临床诊断糖尿病的常用方式就是尿检，依据尿液中包含的葡萄糖比值，判定患者有无患上糖尿病，不过，当血液中葡萄糖比值不高，肾脏全部吸收掉，那么尿检结果的准确性就会受到影响。临床研究指出，检测不同时期以下指标的水平，就可以判定病情，即：血糖水平、胰岛素水平、C 肽水平，然后据此确定治疗方案。另外，检查糖尿病时，可以检测部分抗体，比如：GADA、 ICA等，这当中，GADA存在于I型糖尿病患者机体中，会损害胰岛素细胞，诱发糖尿病，同时GADA还是一种重要的抗原，它会直接影响胰岛 β 细胞的受损程度。当GADA呈现阳性表达，就说明人体中胰岛素分泌出现异常，而检测GADA就能够评估患者胰岛素功能。ICA是一种混合型抗体，当其呈现阳性表达，是受到糖尿病病程的影响，糖尿病患者病程越长，其ICA水平就更低。检测胰岛素水平与C 肽水平，是借助免疫诊断开展，而免疫诊断的发展历经多个技术时期，即：同位素放射免疫、胶体金技术、酶联免疫技术、时间分辨荧光法、化学发光免疫分析等。近些年以来，临床普遍使用化学发光免疫测定技术来诊断糖尿病，检测患者血糖指标，包括：空腹血糖、餐后2h血糖，以判定有无患上糖尿病，以及病情的严重级别，进而为临床治疗提供有用参考。一般来说，化学发光免疫测定技术的发光方法包含三种：发光酶的免疫测定、发光物的免疫测定、发光辅助因子的测定。化学发光免疫测定技术的原理为：利用部分物质的辐射光，标识组织内物质，包括特有的细胞、抗原等，特别是标记肿瘤细胞；正是由于化学发光免疫测定技术的检测效果不错，才被临床用于诊断糖尿病。

化学发光免疫测定技术检测是由免疫反应与化学发光两部分内容所组成。各个部分的内在应用原理是相通的，这当中，化学发光分析系统就是借助化学发光物质的催化与氧化作用，而产生光辐射，当其达到平稳基态时，就有光子产生，最终发光。而免疫反应系统就是于抗原或抗体中，标记发光物质，或借助酶的作用，标识发光底物。化学发光免疫分析的原理是首先于抗原或抗体上，标识发光物质或酶，出现抗原体特异性结合之后，添加氧化剂或发光底物，通过氧化反应，或者底物产生反应之后，就会出现发光，并且可以维持较长时间的平稳，这样就进一步增加敏感性；而添加有关发光剂到自行分析仪，就可以借助计算机，开展各项操作，直到得出检测结果。

为了让大家对化学发光免疫测定技术有更加深入的理解，下面就介绍一个实验案例。

     选择60例疑似糖尿病患者作为试验组，并挑选同时段的60例健康体检者作为常规组，所有研究对象接受化学发光免疫测定技术实验。

1.检测方法：在检测有1d，要求所有人员在晚餐后禁食，采集患者清晨空腹静脉血4ml，完成采血后，给予全体人员75g无水葡萄糖，记录所有人员的进食时间，在进食1h、2h后，采集患者静脉血4ml。离心处理所有采集的静脉血，仪器采用低速冷冻离心机，转速设为3 500 r/min，离心时间控制在10min，分离血清后，以冷冻方式保存。使用化学免疫分析技术检测胰岛细胞抗体（ICA） 、谷氨酸脱羧酶抗体（GADA）水平，使用奥林巴斯生化仪进行检测，使用葡萄糖测定试剂盒检测所有人员的空腹血糖值、餐后2h血糖值。使用全自动化学发光免疫分析仪，以及C肽、胰岛素检测试剂盒，检测C肽、胰岛素水平。

    2.观察指标

（1）分析化学发光免疫测定的检测结果。（2）比较两组血糖指标，包括空腹血糖、餐后2h血糖。（3）分析不同时段的胰岛素水平、C肽水平，时段为空腹时、餐后1h、餐后2h。

3.诊断标准

   在清晨空腹时，且空腹时间超过8h，血糖水平≥7.0 mmol/L；在任意时段，葡萄糖浓度都≥11.1 mmol/L；葡萄糖负荷2h以后，静脉血浆葡萄糖浓度≥11.1 mmol/L，就可诊断为糖尿病。

4.实验结果

4.1 检测结果

   通过化学发光免疫测定，56例患者确诊为糖尿病，检测精准度为93.33%（56/60）。

4.2 两组血糖指标变化情况

比较两组空腹血糖值、餐后2h血糖值，试验组都要高于常规组（P＜0.05）。表1。

表1  两组血糖指标变化（x±s,mmol/L)

4.3 不同时段两组C肽水平变化

    两组不同时段的C肽水平比较，空腹时、餐后2h，试验组的C肽水平都较常规组要高，餐后1h，试验组的C肽水平低于常规组（P＜0.05）。表2。

表2 不同时段两组C肽水平（x±s,ng/mL)

4.4 不同时段两组胰岛素水平变化

    分析两组不同时段的胰岛素值，空腹时、餐后2h，试验组的胰岛素水平都较常规组要高，餐后1h，试验组的胰岛素水平低于常规组（P＜0.05）。表3。

表3  两组不同时段胰岛素水平变化（x±s,U/mL)

     相信通过以上讲解，再加上实验案例，大家已对化学发光免疫测定技术有了一定了解。现在我们就作个总结。出现糖尿病是由于人体胰岛素分泌功能发生异常，疾病的典型症状是体重下降，多食、多尿。为此，就要采取高效手段，尽早诊断糖尿病。化学发光免疫检测就是诊断糖尿病的一种方法，它属于新型标记免疫检测技术。化学发光免疫检测是以化学发光与免疫测定作为基础，可以提供精准的检测结果用于临床诊断疾病。此检测方法的特点是快速反应，较高的精准度，较强的特异性与敏感度，并且可以检测分析各种抗体、抗原、半抗原、酶、激素、脂肪酸等。化学发光免疫测定技术是于患者抗体上，标识化学发光物质，当机体产生免疫反应后，就会合成为复合物的化学发光剂，进而发光，然后通过仪器，测定发光强度，得到准确结果。此检测方法会检测不同时段患者的血糖值、胰岛素值、C肽值，以判定病情，从而提供可靠参考用于临床确诊与治疗疾病。