LC-MS测定松脂油中木脂素的含量

LC-MS测定松脂油中木脂素的含量

李锡洲

广东中测食品化妆品安全评价中心有限公司 广东中山528437

摘要：建立松脂油中松脂素、丁香脂素的LC -MS分析方法。实验结果显示，松脂油中松脂素、丁香脂素存在一定的含量，检出结果分别为松脂素2.00-2.11mg/kg，丁香脂素0.85-1.00mg/kg。

关键词：松脂素；丁香脂素；

Determination of the Lignans in pine oil

Abstract: Establish a method for the analysis of the pinsin and the syringaresinol in pine oil. According to the actual results, there is a certain level content of the pinsin and the syringaresinol in pine oil, showed as

Keyword: pinsin; syringaresinol;

松脂油是人们从植物松树分泌的树脂中通过蒸馏[1]等手段获得的天然产物，具有治疗皮肤病、止血、织物染色等功能[2]。其中主要功效成分是松脂素、丁香脂素，是一类由两分子苯丙素衍生物聚合而成的天然化合物，属于植物雌激素，具有清除体内自由基，抗氧化的作用，可止痛止痒、消肿解毒、抗菌止血、祛风除湿等[3-7]。由于天然提取产量低，有研究者尝试全合成丁香脂素，并在此基础上合成多种衍生物以寻找更具生物活性的丁香脂素[8]。

目前其他中药材中木脂素的测定有高效液相法的相关报道[9-10]，但松脂油中松脂素、丁香脂素的含量测定方法甚少见报道，仅见少量使用高效液相色谱法进行分离分析的文献[11-12]。而液相色谱质谱法可以通过三重四极杆快速筛选目标物，可有效屏蔽来自植物提取物复杂的基质干扰，做到既快又准。因此，建立松脂油中松脂素、丁香脂素含量的液相色谱串联质谱法对甄别松脂油的药用价值有重要的意义。

1材料与方法

1.1材料与仪器

松脂素：CAS：487-36-5，纯度  ≥99.5%；丁香脂素：CAS：1177-14-6，纯度  ≥99.2%；甲醇、乙醇、甲酸，均为色谱纯；去离子水；

液相色谱质谱联用仪：型号  岛津LC-MS 8050，配备岛津Shim-pack GIST C18 (30mm ×2.1mm×3μm）；恒温水浴锅：型号  HH-6J；市售2批次松脂油。

1.2 标准工作液配制

准确称取松脂素、丁香脂素标准品1-2 mg于10.00 mL容量瓶中，配制成约100 mg/L标准储备液。根据实际情况逐级稀释成所需要的标准工作液，最低浓度为50 μg/L，建议浓度范围为50.0, 100, 200,500,1000 μg/L。

1.3 样品处理

称取1g样品置于平底烧瓶中，加入30mL乙醇，加入磁力搅拌子，放入85℃的恒温水浴锅中加热回流2h。冷却后取出，转移至50mL容量瓶中，洗涤平底烧瓶数次，合并洗涤液，定容，过滤待测，必要时稀释。

1.4仪器参数

色谱柱：Shim-pack GIST C18 30mm ×2.1mm×3μm；雾化器流量：3L/min；加热器流量：3L/min；接口温度：300℃；DL管温度：250℃；加热块温度：400℃；干燥气流量：6L/min；流动相条件见表1，质谱条件见表2；

表1 洗脱程序

Table  elution procedure

表2 质谱参数

Table 2 MS parameter

注：*为定量离子；

图1 松脂素及丁香脂素的MRM质谱图（纵坐标为强度响应）

2结果与讨论

2.1 方法线性范围与检出限

以3倍的信噪比计算检出限，方法的线性方程、线性范围及检出限见表。松脂素和丁香脂素在

0.0800～1.00mg/L的范围内具有良好的线性，相关系数均大于0.995，检出限在0.038～0.068 mg/kg，满足本次实际样品的检测。

表3线性方程、浓度范围及检出限

Table 3Linear equation, concentration range and detection limit

2.2 回收率和精密度

对样品进行加标回收实验，实验结果见表4。回收率分别为92.0%，85.5%，相对标准偏差为2.5%，5.0%，具有较好的回收率和精密度。

表4 回收率和精密度

Table 4 recovery and precision

2.3检出情况统计

对2批次松脂油中木脂素进行检验，结果显示松脂素和丁香脂素均有检出（见表5）。

表5 木脂素检出情况

Table 5 contents of Lignans

3结论

总结以上分析，本研究建立的液相色谱-串联质谱法测定松脂油中木脂素含量的分析方法，具有分析时间短、方法精密度及准确度符合一般要求等特点，满足木脂素的含量测定，为进一步开发松脂油的实用价值提供了较好的技术依据。

参考文献

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