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摘要: 目的 研究乳清蛋白粉对正常小鼠免疫功能的调节作用。方法 本试验以乳清蛋白粉 0.075g/kg·bw/d、0.15g/kg·bw/d、0.45g/kg·bw/d三个剂量经口给予小鼠一个月,进行小鼠细胞免疫功能、体液免疫功能、单核-巨噬细胞功能及NK细胞活性测定。结果 低、中、高剂量组小鼠溶血空斑数、NK细胞活性高于空白对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 乳清蛋白粉具有增强免疫力的作用。
关键词:乳清蛋白粉;免疫;小鼠
乳清蛋白中含有 20 多种的氨基酸,所组成的蛋白质并且属于全价蛋白,其中含有的必需氨基酸含量相比较普通的食用蛋白质明显更高,并且很容易被人体所吸收,被誉之为蛋白之王。由于乳清中含有大量的蛋氨酸及半胱氨酸,其中含有硫氨基酸的物质能够更好地维持人体的抗氧能力和水平。含有乳酸蛋白的物质能够刺激人体的免疫功能提升,降低诱发癌症的发生率,从而降低人体的胆固醇,提高骨骼强度;能够有效提高人体免疫系统,同时抑制癌细胞的形成[1]。谷氨酰胺是淋巴细胞和巨噬细胞在免疫反应过程中的重要底物,高速利用谷氨酰胺生成嘌呤和嘧啶核苷酸有利合成更多的 DNA,使免疫细胞增殖加速。长时间大强度运动后期血糖降低,此时谷氨酰胺主要参与糖异生以维持血糖浓度,谷氨酰胺不能满足免疫细胞的需要,这是运动造成机体免疫力下降的主要原因。乳清蛋白富含谷氨酸等谷氨酰胺前体物质,为糖原异生提供原料,维持谷氨酰胺水平,保护免疫细胞功能[2]。本文通过采用ConA诱导的脾淋巴细胞转化实验和迟发型变态反应检测细胞免疫功能,采用抗体生成细胞测定和血清溶血素测定检测体液免疫功能,采用小鼠碳廓清实验和小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞实验检测单核-巨噬细胞功能,采用乳酸脱氢酶测定法NK细胞活性,研究乳清蛋白粉对正常小鼠免疫功能的调节作用,为评价乳清蛋白粉免疫调节作用提供试验依据。
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 受试物 乳清蛋白粉,人体推荐量是0.9g/d,人体按60kg计,折算乳清蛋白粉每天服用量为15mg/kg BW。
1.1.2 试验内容 按《保健食品检验与评价技术规范》[3]进行增强免疫力动物功能实验。
1.2 方法
试验设0.075g/kg·bw/d、0.15g/kg·bw/d、0.45g/kg·bw/d三个剂量组(分别相当于人体推荐摄入量的5倍、10倍、30倍),另设空白对照组以去离子水代替受试物。小鼠按体重随机分为I、II、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ五个大组,每大组40只小鼠,分成4个剂量组,每个剂量组10只。受试样品用去离子水配制,经口每日一次给予小鼠相应剂量的受试物,小鼠灌胃量为0.1mL/10g·bw。连续灌胃一个月后测定各项增强免疫力功能指标。
2 结果统计
采用SPSS 17.0统计软件进行结果处理。采用单因素方差分析与组间 LSD检验。P<0.05表示差异有统计学意义。
3结果
3.1 对体重和脏器比的影响
试验过程中动物饮水摄食正常,外观无异常。与空白对照组比较,各剂量组小鼠试验前后体重差异无统计学意义(P>0.05),各剂量组小鼠胸腺体比和脾体比差异无统计学意义(P>0.05)。
3.2 对ConA诱导的小鼠脾淋巴细胞转化的影响
乳清蛋白粉各剂量组与空白对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。
表1 乳清蛋白粉对小鼠脾淋巴细胞转化的影响(±s)
剂量(g/kg·bw/d) | 动物数(只) | 加ConA孔与不加ConA孔吸光度的差值 |
0 | 10 | 0.18±0.06 |
0.075 | 10 | 0.20±0.04 |
0.15 | 10 | 0.22±0.05 |
0.45 | 10 | 0.23±0.06 |
3.3 对DNFB诱导小鼠DTH的影响
乳清蛋白粉各剂量组与空白对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。
表2 乳清蛋白粉对DNFB诱导小鼠DTH的影响(±s)
剂量(g/kg·bw/d) | 动物数(只) | 耳壳增重(mg) |
0 | 10 | 11.0±1.1 |
0.075 | 10 | 11.5±1.4 |
0.15 | 10 | 11.7±1.5 |
0.45 | 10 | 11.9±1.3 |
3.4 对小鼠溶血空斑数的影响
乳清蛋白粉低、中、高剂量组小鼠溶血空斑数均高于空白对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。
表3 乳清蛋白粉对小鼠溶血空斑数的影响(±s)
剂量(g/kg·bw/d) | 动物数(只) | 溶血空斑数(103个/全脾细胞) |
0 | 10 | 10.6±2.5 |
0.075 | 10 | 15.9±2.8* |
0.15 | 10 | 16.4±2.7* |
0.45 | 10 | 17.8±2.4* |
(*表示与对照组比,P<0.05)
3.5 对小鼠血清半数溶血值(HC50)的影响
乳清蛋白粉各剂量组与空白对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。
表4 乳清蛋白粉对小鼠血清半数溶血值(HC50)的影响(±s)
剂量(g/kg·bw/d) | 动物数(只) | HC50 |
0 | 10 | 123±16 |
0.075 | 10 | 133±18 |
0.15 | 10 | 140±14 |
0.45 | 10 | 144±15 |
3.6 对小鼠碳廓清能力的影响
乳清蛋白粉各剂量组与空白对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。
表5 乳清蛋白粉对小鼠碳廓清能力的影响(±s)
剂量(g/kg·bw/d) | 动物数(只) | 吞噬指数a |
0 | 10 | 4.83±0.52 |
0.075 | 10 | 5.21±0.55 |
0.15 | 10 | 5.28±0.60 |
0.45 | 10 | 5.40±0.59 |
3.7 对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞的吞噬百分率及吞噬指数的影响
乳清蛋白粉各剂量组与空白对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。
表6 乳清蛋白粉对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞吞噬率及吞噬指数的影响(±s)
剂量(g/kg·bw/d) | 动物数(只) | 吞噬百分率(%) | 吞噬指数 |
0 | 10 | 22.1±4.4 | 0.37±0.07 |
0.075 | 10 | 23.9±4.1 | 0.39±0.06 |
0.15 | 10 | 24.8±4.5 | 0.40±0.06 |
0.45 | 10 | 25.6±4.2 | 0.42±0.05 |
3.8 对小鼠NK细胞活性的影响
乳清蛋白粉低、中、高剂量组小鼠NK细胞活性均高于空白对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。
表7 乳清蛋白粉对小鼠NK细胞活性的影响(±s)
剂量(g/kg·bw/d) | 动物数(只) | NK细胞活性(%) |
0 | 10 | 27.1±4.1 |
0.075 | 10 | 37.5±4.5* |
0.15 | 10 | 39.7±4.2* |
0.45 | 10 | 42.3±4.7* |
(*表示与对照组比,P<0.05)
4 结论
本实验结果显示,空白对照组、乳清蛋白粉各剂量组小鼠体重、小鼠胸腺体比和脾体比无明显变化。与空白对照组比较,乳清蛋白粉低、中、高剂量组小鼠溶血空斑数均高于空白对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。乳清蛋白粉低、中、高剂量组小鼠NK细胞活性均高于空白对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。表明乳清蛋白粉对正常小鼠免疫功能具有增强作用。
参考文献
[1]陈泽珊.乳清蛋白的功能特性分析及在乳制品中的应用研究[J].食品安全导刊, 2021, (30): 186-187.
[2]关璐,李跃敏.乳清蛋白与运动营养[J].四川体育科学, 2003, (04): 17-19.
[3]《保健食品检验与评价技术规范》2003版.