血细胞检测中单核细胞异常结合散点图分析在恶性血液病中的诊断价值

血细胞检测中单核细胞异常结合散点图分析在恶性血液病中的诊断价值

王顺英1  开金龙1 赵娟 1   虎淑妍 2

1.甘肃省庆阳市中医医院检验科，2.甘肃省庆阳市人民医院检验科，甘肃 庆阳 745000

【摘要】：目的：探讨血细胞检测中单核细胞异常结合散点图分析在恶性血液病中的诊断价值。方法：采用SYSMEX XN2800血常规检测及血细胞分类计数（DIFF）散点图异常报警信息，选择庆阳市地区2022年6月-2023年6月收治的101例初发恶性 血液病住院患者血常规进行分析。结果：101例恶性血液病中，76例（75.2%）单核细胞比例增高29例（28.7%）淋巴细胞比例增高 ，101例（100%）DIFF散点图异常，45例（44.5%）白细胞增高，32例（31.6%）白细胞减少，血红蛋白全部减低，17例 （16.8%）血小板增高，59例（58.4%）血小板减低，进行血涂片复检，原始细胞符合率为69.3%，未成熟粒细胞符合率为 44.6%，散点图异常提示符合率100%，后对101例进行骨髓形态学、外送骨髓流式细胞学、骨髓活检、细胞遗传学确诊为新发恶 性血液病，其中急性髓系白血病包括急性早幼粒细胞型和急性淋巴细胞型，而慢性淋巴细胞白血病为慢性淋巴细胞型髓系白血 病、慢性粒细胞白血病患者DIFF散点图具有各自明显的特点。其他疾病类型的DIFF散点图特征不明显。结论：血细胞检测中及 散点图异常在恶性血液病诊断中具有非常重要作用。

【关键词】：血细胞计数、单核细胞、散点图、

恶性血液病是由于骨髓造血功能异常引起的一系列复杂临床表现，最常见的恶性疾病如白血病、骨髓增生异常综合征（MDS）、骨髓增值性疾病（MPN）、骨髓瘤、淋巴增值性疾病（LPL）等[1]。患者临床常表现为不同程度贫血、全血细胞减少、三系增多、发烧、出血、肝脾肿大、疼痛、浅表淋巴结肿大等[1-2]。患者在出现上述症状时通常寻求就诊，而血常规是最早必需进行的检验项目。准确的血常规检测和外周血涂片分类对于血液病诊断有至关重要的作用。本研究101例来院就诊患者发现，血常规检查结合散点图分析有助于白血病等恶性病的判断，这与秦跃红[3]文献报道一致。血细胞计数 是一项常规临床检查项目，为早期诊断恶性血液病提供了重要数据。血常规检查结合DIFF散点图异常报警可用于推动片复检 ，迅速为临床提供可靠数据，同时探讨散点图在恶性血液病中的诊断价值。

1材料与方法

1.1临床资料：从2022年6月到2023年6月，我们研究了我院初次就诊并确诊为恶性血液病的101名住院患者。男性患者49例，女性患者52例，平均年龄39岁。患者均通过骨髓形态学、外送骨髓流式细胞学、 骨髓活检和细胞遗传学检查被确诊为新发白血病，并且符合血液病诊断标[4]。1.2检测仪器 ： 采用日本SYSMEX XN-2800分析仪，原装配套试剂、瑞士-姬姆萨染料。

1.3检测方法

1.3.1采集静血2mlEDTA-K2抗凝，用SYSMEX XN-2800分析仪完成常规检测。 1.3.2外周血图片细胞学检查：对血细胞计数和散点图异常标本进行外周血推片，推片后晾干，在玻片上先滴加瑞氏姬姆萨染液A液5-6滴，覆盖血摸，待一分钟后加入瑞氏吉姆萨B液10-12滴，静置染色50分钟，用流动水冲洗染液，待晾干后进行镜检。

1.3.3骨髓涂片处理：染色操作与外周血涂片一样，也可以和外周血可以同时进行染色

 1.3.4.骨髓流式细胞学检查：骨髓液实验前处理后，用贝克曼500流式细胞仪进行监测，对不同抗体进行组合分析。

1.3.5 细胞遗传学细胞检查：骨髓液经培养、收获、滴片、染片、镜下分析，分析20个分裂象，并结合流式细胞学，骨髓活检综合判断。

1.4散点图区域判读及血细胞复检标准

1.4.1白细胞散点图通过利用光学检测器对血液中的有核细胞进行半导体激光束以及采用流式细胞计数原理进行检测，主要检测前向散射域，通过测量三个参数如前向散射光（FSC）、侧向散射光（SSC）和侧向荧光（SFL），计算机通过这三个参数数值绘制出散点图和直方图的平面图。结合血常规分析散点图和直方图。分析散点图时根据侧向散射光和前向散射光分为淋巴区域、粒细胞区域、单核区域、嗜酸性粒细胞区域和嗜碱性粒细胞区域。细胞根据大小，荧光强度散射在各自细胞区域。紫红色标记淋巴细胞群，绿色标记单核细胞群、淡蓝色标记粒细胞群，红色标记嗜酸性粒细胞群，黄色标记嗜碱性粒细胞群[5]。直方图是血细胞根据电阻抗原理得到的一种线性分析图，根据细胞大小呈现接近正态分布的图形，主要用于贫血的判断。

1.4.2复检标准：无白细胞分类结果；白细胞计数异常表现为：WBC＜2.0x10*9L或＞30x10*9L；白细胞自动分类异常表现为 ：中性分叶粒细胞＞ 85%，淋巴细胞＞70%，单核细胞＞30%，嗜酸性粒细胞＞ 15%;血红蛋白（HB）60g/L以下；血小板 （pLT）在30X10*9L以下

[6]。

2  结果

2.1 101例恶性血液病中，76例单核细胞比例增高，29例淋巴细胞比例增高，101例散点图异常，45例WBC增高，32例WBC减少，HB全部减低，20例PLT增高，59例PLT减低。M1 6例，M2 33例，M3 2例，M4 1例，M5 4例，M6 1例，ALL 10例，CLL 5例，CML 17例，MDS 7例，MM 12例，淋巴瘤2例，转移癌1例，见表1

表1 101例血液病患者血细胞检测情况

注：原始粒细胞未分化型（M1）：原始粒细胞部分分化型（M2）；急性早幼粒细胞白血病M3）；急性粒-单核细胞白血病（M4）；急性单核细胞白血病（M5）；急性红白血病表示为（M6）；急性淋巴细胞白血病表示为（ALL）；慢性淋巴细胞白血（CLL）；慢性粒细胞白血病（CML）；骨髓增生异常综合征（MDS）；多发性骨髓瘤表示为（MM）

2.2幼稚细胞、有核红细胞、贫血、血小板直方图分析

表2 101例患者幼稚细胞、有核红细胞、贫血、血小板直方图情况

  原始细胞符合率为69.3%，未成熟粒细胞符合率为44.6%，有核红细胞符合率为69.3%，血红蛋白100%减低。血小板符合率77.2%。

2.3 单核细胞区间分布特点

表3 单核细胞区间分布特点

76例单核细胞比例增高中，36例单核细胞比例在9%-20%之间，30例在21%-50%之间，9例在51%-90%之间，1例在81%-93%之间。2.1%-8%正常比例的14例白血病分别为CLL、CML、MM.  CLL为成熟淋巴细胞，散点图聚集在淋巴区域，单核区域细胞数正常。CML外周血细胞特点为中晚幼粒细胞增生为主，单核区域正常。MM为多发性骨髓瘤，外周血特点淋巴细胞比例增高，红细胞崏钱状排列，原始 、幼稚或成熟浆细胞在外周血比例低。

2.4单核细胞增高及散点图异常报警信息

101例患者中76例出现单核细胞增高，通过报警提示及推片复检，都为原始细胞。29例提示淋巴细胞增高，通过散点图报警提示及推片复检，10例ALL，19例为原始细胞，通过流式细胞学、分子生物学确诊为M1和M2。17例单核细胞比例正常，而散点图异常的，通过外周血推片及外送骨髓活检基因检测，确诊为慢性粒细胞白血病。

2.5部分恶性血液病患者散点图特征

         A                   B                   C

D                 E                F

注：A图 健康人 B图 异常散点图 C 慢性淋巴细胞白血病 D图急性淋巴细胞白血病 E图急性髓系白血病 F图慢性粒细胞白血病

3.讨论

随着社会发展人们生活节凑加快，社会压力增大，白血病在生活当中也多见，恶性血液病是因为造血干细胞增殖失控，某一幼稚细胞未能进行分化成熟，停留在某一时期就会出现相对应的某种恶性病[1、5]。临床贫血、出血多见。本次研究显示，101例恶性血液病中，白血病占73.3%。其中，WBC增高占42.5%，减少者占27.7%，HB减低占100%，PLT减 少占58.4%，散点图异常占100%。因此，在临床工作中，应当综合分析散点图报警信息。对于101例恶性血液病患者，通过首先从散点图异常入手推片复检，可发现异常细胞，为临床诊断提供了重要参考价值。尽管患者的散点图各有不同，但ALL、CLL、M3、CML这几类疾病散点图还是有一定特点，与文献[2、9]的报道一致。例如，在ALL中，由于原始和幼稚淋巴细胞比例增高，散点图显示淋巴细胞区域和单核细胞区域界限不清，甚至出现融合，当这群细胞超过计算机设定的阈值后会呈现大量灰色图形，并且有向上抬的趋势；CLL是以成熟淋巴细胞增生为主，散点图中淋巴细胞区域聚集且向单核细胞区域延伸；M3为异常早幼粒细胞增生为主，会出现粒单融合现象。CML以中晚幼粒细胞增生为主，粒细胞区域浓集且范围增大出现向上抬的图形，并且嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞也有抬升这是慢粒的特征之一，这与文献[10]报道一致。我们平时在工作中看到单核细胞增高，推片后发现并非为真性单核细胞增高，而是原始细胞，幼稚细胞，所以单核细胞增 高是假性增高，单核细胞增高的散点图也很有特点，慢性粒细胞白血病散点图，外周血五类细胞区域均可见异常，尤其嗜碱性 粒细胞、嗜酸性粒细胞区域会增大并且有向上抬高，这是由于慢粒外周血嗜碱性粒细胞、嗜酸性粒细胞不断增高而且会出现幼 稚细胞原始。有些散点图提示单核细胞增高同时伴淋巴细胞增高，需要推片复检发现原始粒细胞比例增高，而原始粒细胞胞体 大小和淋巴细胞大小基本相近，仪器归到淋巴细胞区域，但是原始细胞属于未成熟细胞，DNA/RNA含量比较高，FSC荧光强度高 ，所以在散点图显示淋巴区域细胞变大并向上抬高。急性早幼粒细胞散点图会出现粒单融合现象，散点图显示粒细胞区域位置 比正常粒细胞区域抬高，抬高到单核细胞区，蓝色细胞群和绿色细胞群粘连在一起，这是由于异常早幼粒细胞属于原始细胞 ，胞体大小跟单核细胞相近，并且异常早幼粒细胞爆浆颗粒增粗增多。因此在日常工作中，多注意血常规DIFF报警信息，并且分析散点图，从散点图中寻找更多信息并及时推复检，及时跟临床沟通，为临床临床提供更准确的数据。

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