KISS-1、KiSS-1R 及 MMP-9表达与肝细胞癌侵袭转移的关系及意义

KISS-1、KiSS-1R 及 MMP-9表达与肝细胞癌侵袭转移的关系及意义

姜海斌 陈晓峰  初晓艳

承德市中心医院消化内科  067000

摘要：目的：探讨KISS-1、KiSS-1R 及 MMP-9与肝细胞癌侵袭转移的关系。方法：选取我院2022年1-12月48例肝细胞癌患者，将手术治疗期间切除的肝癌样本进行检验，分别利用逆转录聚合酶链反应、改良法构建HCC组织芯片、免疫组织化学染色等方法进行KISS-1、KiSS-1R 及 MMP-9表达的检验，并将检验结果与样本情况进行观察，分析上述指标的表达与肝细胞癌侵袭、转移的关系。结果：通过对KISS-1、KiSS-1R 及 MMP-9进行不同类型组织表达情况的观察后发现，所选患者中，癌组织、静脉癌栓、癌旁组织、远癌组织中，出现KISS-1、KiSS-1R 及 MMP-9不同类型组织表达的情况均有所不同，以癌组织、癌旁组织的、远癌组织表达较多，静脉癌栓中则相对较少。结论：肝细胞癌侵袭转移是癌症发展的必然过程，也是引起患者病情加重的主要原因，通过对肝细胞癌侵袭转移情况与KISS-1、KiSS-1R 及 MMP-9表达观察后发现，肝细胞癌不同病灶位置的表达存在差异，其中癌组织、侵袭、转移过程中，均发现KISS-1、KiSS-1R 及 MMP-9表达，值得重视。

关键词：肝细胞癌；侵袭转移；KISS-1；KiSS-1R；MMP-9

肝细胞癌侵袭转移是其病情发展过程中必经的阶段，也是观察患者病情严重程度的重要指标，临床认为对肝细胞癌侵袭转移进行预测，对改善肝细胞癌的临床治疗有较为重要的意义[1-2]。本文对所选肝细胞癌患者开展KISS-1、KiSS-1R 及 MMP-9干预，现报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

我院2022年1-12月48例肝细胞癌患者，随机分观察组、对照组，48例/组。患者中男38例，女10例，年龄33～61岁，平均年龄（47.18±13.82）岁，病程2～8年，平均病程（5.16±2.84）年。通过Edmondson组织学分析法分级，Ⅰ级27例，Ⅱ级15例，Ⅲ级6例。其中有侵犯32例，无侵犯16例，有转移34例，无转移14例，肿瘤直径≤3cm14例，＞3cm34例，患者均自愿签署同意书，符合医学伦理委员会的要求。

1.2 方法

对所选患者的肝癌病灶样本分别利用逆转录聚合酶链反应、改良法构建HCC组织芯片、免疫组织化学染色等方法进行KISS-1、KiSS-1R 及 MMP-9表达的检验。

样本采集：在患者手术切除肝癌病灶后，立即选取2块样本进行检验。分别做好标记后，将样本1通过液氮速冻，在-70℃的冰柜中保存待检。将样本2利用10%中性福尔马林溶液固定，利用石蜡包埋切片、HE染色处理后进行检验。

检验方法：通过TRIzol说明书，提取人HCC、癌旁、远癌肝组织的RNA。另利用改良法构建HCC组织芯片进行检验，利用特制的模具定位，利用打孔针在蜡块上打孔，并在蜡块内通过取样针进行取样。采取4连续切片取样，采取温水裱片的方式干预，利用经多聚赖氨酸载玻片进行敷贴。采取免疫组织化学染色的方式进行样本处理，利用高压抗原修复，采取EliVision plus二步法，一抗KiSS-1（1:400）、KiSS-1R（1:400）、RMMP-9（1:350），利用PBS阴性对照、DAB显色、苏木素复染方式处理。

检验结果分析：在细胞胞质进行KiSS-1、MMP-9、KiSS-1R蛋白定位，如呈现阳性，则会产生棕黄色颗粒状产物，利用显微镜对样本定位区域进行观察和拍照，在400倍视野下进行阳性区域拍照，并利用彩色图像分析系统测定阳性区域的积分吸光度（IOD），选取5个视野进行相对表达量的取值，取取值的对数进行半定量分析。

1.3 疗效判定

观察KISS-1、KiSS-1R 及 MMP-9表达与肝细胞癌侵袭转移的关系。

1.4 统计学分析

使用SPSS 27.0分析数据，计数资料和计量资料分别以（%）、（x±s）表示，并分别进行2和t检验，均以P＜0.05表示差异有统计学意义。

2 结果

通过对KISS-1、KiSS-1R 及 MMP-9进行不同类型组织表达情况的观察后发现，所选患者中，癌组织、静脉癌栓、癌旁组织、远癌组织中，出现KISS-1、KiSS-1R 及 MMP-9不同类型组织表达的情况均有所不同，以癌组织、癌旁组织的、远癌组织表达较多，静脉癌栓中则相对较少。

表1KISS-1、KiSS-1R 及 MMP-9不同类型组织表达情况（%）[n（%）]

3 讨论

肝细胞癌侵袭转移对患者的生命安全威胁性较强，对其侵袭、转移情况进行观察和针对性治疗，是临床对肝细胞癌诊治工作的难点[3-4]。通过临床研究显示，KISS-1、KiSS-1R 及 MMP-9在不同病情阶段的癌症裸鼠体内的数目存在差异，并由此推断KISS-1、KiSS-1R 及 MMP-9等属于肿瘤转移抑制基因，针对肝细胞癌进行上述指标的观察，发现在侵袭转移过程中，上述指标也存在较大的变化

[5-6]。

实验表明，通过对KISS-1、KiSS-1R 及 MMP-9进行不同类型组织表达情况的观察后发现，所选患者中，癌组织、静脉癌栓、癌旁组织、远癌组织中，出现KISS-1、KiSS-1R 及 MMP-9不同类型组织表达的情况均有所不同，以癌组织、癌旁组织的、远癌组织表达较多，静脉癌栓中则相对较少，说明KISS-1、KiSS-1R 及 MMP-9在肝细胞癌的侵袭、转移当中均有参与。

综上所述，肝细胞癌侵袭转移过程中，KISS-1、KiSS-1R 及 MMP-9彼此作用，因此可通过监测相关指标，预测肝细胞癌的侵袭、转移趋势。

参考文献：

[1]王静璇,刘红悦,庄志征,等.MMP-9抑制剂对人口腔鳞状细胞癌细胞系CAL27生物学行为影响机制的研究[J].口腔颌面外科杂志,2023,33(06):363-369.

[2]李丽,胡筱,曹主根.卡瑞利珠单抗联合化疗治疗老年非小细胞肺癌患者的临床疗效及对血清CY211、MMP-9表达的影响[J].临床和实验医学杂志,2023,22(22):2380-2383.

[3]陈君,尚红娟,疏云.ERK-VEGF/MMP-9信号通路对肝癌HepG2细胞不良生物学行为的调控作用[J].现代肿瘤医学,2023,31(24):4491-4496.

[4]魏伦收,索智敏,孙新房,等.血清中MMP-9及Ep-CAM水平在食管黏膜病变中的临床意义[J].实验与检验医学,2023,41(05):596-598.

[5]张璇,宋红林,王秀丽,等.血清STIP1、MMP-9、HMGB1表达水平与卵巢癌患者相关病理学参数的相关性及联合检测临床意义[J].医学理论与实践,2023,36(12):2094-2096.

[6]张丽君,石皓,姜卓言,等.MicroRNA-122-5P通过靶向MMP-9抑制TPA诱导的SW480细胞侵袭迁移能力[J].河北医学,2023,29(01):86-91.

本课题来源于2023年承德市科技计划项目（编号：202303A171）