临床微生物检验的快速诊断技术知识知多少

临床微生物检验的快速诊断技术知识知多少

祝婉

（电子科技大学医院    四川成都    610000）

在医学实验当中，临床微生物检验作为重要的组成部分，其应用能够帮助广大的医务人员对于患者的病原微生物感染类型做出迅速的判断，为制定治疗方案提供及时准确的诊疗依据。同时，随着近年来医学技术的不断发展以及诊断检测手段的进步，使得越来越多的快速诊断技术被广泛应用在临床微生物检验工作当中。对此，本文将详细的介绍目前较为常见的快速诊断方法，帮助广大民众对于临床微生物检验有充分的了解和认识。

1. 临床微生物检验价值

临床微生物检验是指通过实验室诊断的方法，对于人体的各种标本，例如痰液、尿液以及血液等标本进行病原微生物检测，对于病原微生物鉴定属、种以及进行有针对性的药物敏感性试验，从而为临床感染性疾病诊断以及治疗提供依据。因此，快速、准确的微生物检验方法对于控制感染以及预防疾病传播和指导临床用药方面，具有重要的应用价值。

2. 传统微生物检验方法的局限性

在过去，临床微生物检验主要采取的培养法，是指将标本接种在培养基上，通过对微生物的生长状况进行类型鉴别。但传统培养方法一般需要数天至数周时间。同时，对于操作人员的技术要求较高。因此，在快速诊断需求方面，传统方法存在诸多的局限性。

3. 快速诊断技术的方法

    近年来，我国免疫学以及分子生物学等学科的快速进步使得临床微生物检验快速诊断方法有了显著的突破，以下是较为常见的快速诊断方法以及原理：

3.1分子生物学技术

3.1.1聚合酶链式反应（PCR）：

在临床微生物检验当中，采取聚合酶链式反应，通过扩增微生物DNA/RNA特定片段进行检测，了解是否存在该微生物。同时，聚合酶链式反应检测方法的应用，具有较高的灵敏度以及特异性，因此，在应用时能够快速、准确的对于患者身体当中的病原微生物种类以及耐药性基因有明确了解。

3.1.2实时荧光聚合酶链式反应（RT-PCR）：

实时荧光聚合酶链式反应的应用，是实时荧光探针技术以及聚合酶链式技术的充分结合。在应用过程当中，可实时、有效的监测目标序列的扩增状况。因此，此技术具有较高的准确度、敏感性以及快速性。实时荧光聚合酶链式反应诊断方法，能够快速检测病原微生物种类以及微生物的耐药性。

3.1.3基因芯片技术：

基因芯片技术的应用及原理，是结合微型阵列芯片上固定的特异性探针，通过采取基因芯片技术，对样本当中的多个微生物感染以及耐药基因进行共同检测。因此，基因芯片技术的应用，发挥高灵敏度、高特异性以及高通量性等诸多应用优势。

3.2质谱技术

   质谱技术当中，MALDI-TOF MS的原理是根据基质辅助激光解剖离子化飞行时间质谱技术。该方法的应用，能够对于微生物进行快速的鉴定。同时，质谱技术也可对于微生物蛋白质谱图进行分析，从而有效地识别微生物的种类以及菌株，因此诊断效果准确且快速。

3.3免疫学技术

3.3.1免疫层析法：

免疫层析法是指，通过试纸条或载玻片上固定特定的抗体或抗原，对微生物感染样本进行检验。免疫层析法在操作过程当中，具有简单、快速以及省时省力等诸多应用优点，使得免疫层析法适用于微生物初步筛查工作。

3.3.2免疫荧光法：

免疫荧光法是指使用标记了特异性抗体或抗原的荧光物质，对于样本当中是否存在对应的病原微生物进行检验。免疫荧光法的应用，具有高度的敏感性以及特异性，因此，对于样本当中的病原微生物种类及数量，能够快速的鉴别及诊断。

3.4核酸杂交技术

核酸杂交技术当中，荧光原位杂交（FISH）是常见的方法。荧光原位杂交手段是指使用荧光标记的探针与微生物DNA/RNA进行序列互补以及结合，从而观察真菌或细菌，确定最终的种属。因此，荧光原位杂交的优势是具有较高的敏感度以及特异性。

3.5快速培养技术

3.5.1底物培养：

底物培养是指，通过使用特殊的培养基质，对于微生物代谢进行诱导，从而产生特定底物反应。通过借助上述措施的应用，可快速地鉴定微生物类型，例如，在应用时使用菜单糖培养基，可对于肠球菌属的不同菌株进行快速区分以及鉴别。

3.5.2老化培养：

老化培养方式的应用，其目的是结合不同微生物的生理代谢差异性，可了解到不同菌属的类别并做出迅速的类型评判。

4. 快速诊断技术的挑战

    首先，由于部分快速诊断技术需要使用高端的设备以及试剂，导致成本较高，在部分资源有限的地区应用频率较低。此外，快速诊断技术虽然具有简便且快速的特点，但部分诊断方法仍要求操作人员拥有较强的专业技术。最后，随着抗菌药物的不断应用，部分病原体出现了耐药性，这对于快速诊断技术提出了更高的要求。

综上所述，随着当前我国科学技术的不断发展及创新，不断涌现出新型的微生物检验快速诊断技术，可帮助临床医师在确诊患者感染性疾病时借助微生物检验技术提供的诊断依据为患者制定具有个体化以及针对性的治疗方案。因此，新型临床微生物检验技术的应用，提高了微生物感染诊断的及时性和准确性，为感染性疾病的诊疗带来了更为显著的应用效果以及临床疗效。然而，虽然上述快速诊断技术优势诸多，但在临床应用当中，仍需进一步的研究以及验证，并对于上述新型技术的效果保持关注。相信不久的将来，在临床微生物检验当中，快速诊断技术将发挥更重要的价值，积极地推动医学技术快速发展。