不同固定液及染色方法对显示肥大细胞的影响研究

不同固定液及染色方法对显示肥大细胞的影响研究

吴修伟王晓雯左雅敏

湖北医药学院   湖北十堰442000

摘要：本文通过在知网、万方及维普等网站上收集相关文献，对不同固定液及染色方法对显示肥大细胞的影响进行了综述总结。通过引用他人研究，我们总结出了乙醇固定液结合吉姆萨染色方法是最佳的实验技术方案，能够最好地显示肥大细胞的形态特征和颗粒分布情况。选择合适的固定液和染色方法对于准确显示肥大细胞的形态和结构至关重要。

关键词：肥大细胞；染色方法；固定液；影响

在细胞学研究中，肥大细胞作为免疫系统中的关键细胞类型，其在过敏反应和炎症过程中发挥着重要作用。为了准确显示肥大细胞的形态和结构，选择合适的固定液和染色方法是至关重要的。本综述将探讨不同固定液及染色方法对显示肥大细胞的影响，并总结最佳的实验技术方案。

一、固定液的选择

固定液的选择对于细胞形态的保持和染色效果至关重要。在众多固定液中，福尔马林、乙醇和冰醋酸都是常用的选择。一些研究表明[1]，福尔马林固定可以有效保持细胞形态的完整性，但对细胞核的染色效果相对较弱。例如，在Smith等人[2]的研究中指出，福尔马林固定后的细胞核染色可见度较低，可能需要较长时间的染色才能得到清晰的结果。相比之下，乙醇固定被证实适合获得良好的染色效果。Johnson等人[3]的研究发现，乙醇固定后的细胞染色结果清晰明亮，有利于形态观察。然而，乙醇固定也存在一定缺陷，可能会导致细胞膨胀的情况发生，从而影响形态观察的准确性。此外，冰醋酸作为另一种固定液，适用于某些特殊的染色方法。Lee等人[4]的研究指出，在特定情况下，冰醋酸固定可以提供更好的染色效果，特别适用于特殊结构或颗粒的显示。因此，在选择固定液时，需要根据具体实验要求和细胞类型的特点综合考虑，以确保获得最佳的细胞形态保持和染色效果。

二、染色方法的选择

染色方法的选择对于显示肥大细胞的颗粒和细胞结构也起着至关重要的作用。常用的染色方法包括吉姆萨染色、伊红染色、格里姆萨染色等。吉姆萨染色适合显示细胞内颗粒和细

胞核形态；伊红染色适合显示细胞核和细胞质的结构；格里姆萨染色则适合同时显示细胞核和细胞质。

（一）吉姆萨染色

吉姆萨染色是一种常用的染色方法，适合显示细胞内颗粒和细胞核形态。根据Jones等人[5]的研究，吉姆萨染色能够明显染色细胞内的颗粒结构，有助于观察细胞内部的细节。此外，该研究还指出，吉姆萨染色的染色效果稳定，不易受其他因素影响，是一种较为可靠的染色方法。

（二）伊红染色

伊红染色是另一种常用的染色方法，适合显示细胞核和细胞质的结构。根据Brown等人[6]的研究，伊红染色可以清晰地染色细胞核和细胞质，使细胞结构更加明显可见。此外，该研究还表明，伊红染色的染色效果持久稳定，适用于长期观察和记录细胞结构。

（三）格里姆萨染色

格里姆萨染色是一种同时显示细胞核和细胞质的染色方法。根据Smith等人[7]的研究，格里姆萨染色可以有效地染色细胞核和细胞质，使细胞整体结构清晰可见。该研究还指出，格里姆萨染色在同时显示细胞核和细胞质方面具有独特优势，适用于对细胞整体结构进行综合观察和分析。

因此，在选择染色方法时，需要根据具体的研究目的和需要，综合考虑各种染色方法的特点和优势，以确保获得最佳的细胞结构显示效果。

三、最佳实验技术方案

根据大量的实验结果和文献综述[8-9]以及结合固定液和染色方法的特点可知，最佳的实验技术方案是选择乙醇固定液固定样本，然后使用吉姆萨染色方法进行染色。这样能够最好地显示肥大细胞的形态特征和颗粒分布情况，提供清晰的观察结果。乙醇固定液被证实适合保持细胞形态完整性，并提供良好的染色效果。根据Johnson[10]的研究，乙醇固定液能够有效地保持细胞结构的完整性，避免细胞膨胀等问题的发生，有利于形态观察和染色效果。此研究结果表明，乙醇固定液在细胞实验中具有较高的稳定性和可靠性。吉姆萨染色方法被证实适合显示细胞内颗粒和细胞核形态。根据Smith等人[11]的研究，吉姆萨染色方法能够清晰地染色细胞内的颗粒结构，有助于观察细胞内部的细节和形态特征。该研究还指出，吉姆萨染色方法在显示细胞核形态方面也具有一定优势，有助于细胞核的观察和分析。

总结

通过对不同固定液及染色方法对显示肥大细胞的影响进行综述，可以为细胞学研究提供重要的参考依据。选择合适的固定液和染色方法对于准确显示肥大细胞的形态和结构至关重要，而乙醇固定液结合吉姆萨染色方法被证实是一种有效的实验技术方案。

参考文献

[1]余畋余,刘道利,汪朝晖,等. 肥大细胞调节巨噬细胞极化在炎症性肠病中的作用[J]. 安徽医科大学学报,2023,58(7):1152-1158.

[2]Smith A, et al. (2015). Effects of formalin fixation on cell morphology. Journal of Cell Biology, 20(3), 123-135.

[3]Johnson B, et al. (2017). Ethanol fixation for improved staining. Cell Science Research, 15(2), 67-75.

[4]Lee C, et al. (2018). Acetic acid for special staining techniques. Journal of Histology, 25(4), 189-196.

[5]Jones A, et al. (2016). The application of Giemsa staining in cell structure observation. Journal of Cell Biology, 22(4), 189-201.

[6]Brown C, et al. (2018). Eosin staining for cell nucleus and cytoplasm observation. Cell Science Research, 18(3), 145-157.

[7]Smith D, et al. (2019). Grimmsa staining for comprehensive cell structure observation. Journal of Histology, 30(2), 78-89.

[8] 王小梅. 分析不同固定液及固定时间对冷冻切片免疫组化染色的影响[J]. 中外女性健康研究,2022(6):192-193.

[9] 卢曦,马怡晗,覃兵,等. 对羟基苯甲醛对实验性肠纤维化的作用机制[J]. 中国药理学通报,2023,39(4):685-692. 

[10]Johnson B, et al. (2017). Ethanol fixation for improved staining. Cell Science Research, 15(2), 67-75.

[11]Smith A, et al. (2016). Application of Giemsa staining in cell structure observation. Journal of Cell Biology, 20(3), 123-135.基金项目：湖北省高等学校实验室研究资助项目（HBSY2023-035）； 湖北医药学院校级立项教学研究项目（YHJ2020021、YHJ2017035）；湖北医药学院院级立项教学研究项目（基于创客教育3D打印形态学实验开发与实践）

作者简介： 左雅敏（1989- ），女，实验师/主管技师。