PCR检验法在细菌检验中的临床效果分析

PCR检验法在细菌检验中的临床效果分析

田静

合江县中医医院  四川泸州 646200

摘要：目的：分析PCR检验法在细菌检验中的临床效果。方法：研究选取2023年1月至12月期间临床采集的80例细菌样本，分别使用常规细菌培养法和PCR检验法进行检测。细菌培养法40例，PCR检验法40例。对比两种方法的阳性检出率及其在临床应用中的实际效果。结果：研究结果显示，在40例PCR检验样本中，阳性检出率为85.00%（34/40）；40例细菌培养法样本中，阳性检出率为55.00%（22/40）。此外，PCR检验法的平均检验时间为（2.14±0.36）h，细菌培养法的平均检验时间为（24.65±1.22）h，以上数据对比均具有显著差异（P<0.05）。结论：PCR检验法在细菌检验中的阳性检出率显著高于常规细菌培养法，显示出其在临床细菌检验中的重要应用价值。建议在临床实践中，特别是在需要快速且准确检测的情况下，优先采用PCR检验法。

关键词：PCR检验法；细菌检验；细菌培养法；阳性检出率；临床效果

细菌感染是临床常见的感染类型之一，快速、准确的病原菌检出对患者的治疗和预后至关重要。传统的细菌检验方法为细菌培养法，但其存在检出率较低、耗时较长等缺点。近年来，聚合酶链反应（PCR）技术由于其高灵敏度和特异性，被越来越多地应用于细菌检验中[1]。PCR检验法通过扩增特定的细菌DNA序列，可以在较短时间内准确识别病原菌。研究选取2023年1月至12月期间临床采集的80例细菌样本，分别使用常规细菌培养法和PCR检验法进行检测，通过对比两种方法的阳性检出率及其在临床应用中的实际效果，评价PCR检验法在细菌检验中的优势和不足。

1 资料与方法

1.1 一般资料

研究共纳入2023年1月至12月间在我院进行细菌检验的80例样本。根据不同检验方法，将样本分为两组：细菌培养法组和PCR检验法组，每组各40例。细菌培养法组样本来源包括：咽拭子、尿液、痰液、血液等，样本中男21例，女19例，年龄范围为18~65岁，平均年龄为（42.33±10.21）岁。PCR检验法组样本来源包括：咽拭子、尿液、痰液、血液等，样本中男20例，女20例，年龄范围为20~68岁，平均年龄为（43.17±11.06）岁。两组样本在性别比例、年龄分布及样本来源上均无显著差异（P>0.05），具备可比性。

1.2方法

细菌培养法组的细菌样本采用传统的细菌培养方法进行检验。将临床采集的样本接种到适当的培养基上，接种后，将培养基置于37摄氏度的恒温培养箱中培养24至48小时。培养期间，每天观察培养基上的菌落生长情况。培养结束后，对培养基上的菌落进行初步鉴定，包括形态学观察和染色。若需要进一步确认细菌种类，可进行次级培养或生化测试。次级培养的操作步骤与初次培养相同，继续在适当的培养基上培养，并结合细菌的生化特性进行鉴定。最后，根据细菌的生长特性和鉴定结果，记录并分析检验结果。

PCR检验法组的细菌样本采用聚合酶链反应（PCR）方法进行检验。将细菌样本放置在生理盐水中，使用12000r/min离心10分钟，去除上清液。然后，加入碱性裂解液，将样本在98摄氏度下加热10分钟以裂解细菌细胞。裂解后，进行再次离心操作5分钟，收集部分上清液作为DNA模板。PCR检验法中，使用PCR扩增仪进行检测。根据试剂盒说明书配置PCR反应混合液，包括DNA模板、引物、Taq酶和dNTPs等。在PCR扩增仪上设置循环参数，并进行扩增反应，同时设置阳性和阴性对照以确保结果的准确性。PCR反应完成后，使用电泳法对扩增产物进行分析，判定细菌的存在。所有操作均严格按照试剂盒和设备的使用说明进行，确保实验结果的准确性和可靠性。研究过程中，对两组样本的操作流程和实验条件保持一致，以确保实验结果的可比性。

1.3观察指标

研究观察指标为细菌检验方法的阳性检出率、检验时间。阳性检出率指在总样本中检出阳性结果的比例；检验时间指从样本处理到得到检验结果所需的总时间。所有数据均通过统计分析进行比较，以确保结果的科学性和可靠性。

1.4统计学方法

研究采用SPSS 26.00统计软件进行数据分析。计量资料以均数±标准差表示，采用t检验比较两组间差异；计数资料以率表示，采用χ²检验比较两组间差异。P<0.05为差异具有统计学意义。

2 结果

研究对两组细菌检验方法的阳性检出率、检验时间进行比较分析。结果显示，PCR检验法组的阳性检出率为85.00%（34/40），显著高于细菌培养法组的55.00%（22/40），差异具有统计学意义（P<0.05）。在检验时间方面，PCR检验法的平均检验时间为（2.14±0.36）h，细菌培养法的平均检验时间为（24.65±1.22）h，数据对比均具有显著差异（P<0.05）。具体情况如表1。

表1  细菌培养法与PCR检测法的阳性检出率及检验时间对比

3 讨论

细菌感染是临床医学中常见且复杂的疾病类型之一，尤其在免疫力低下的患者中更为普遍。针对这类疾病，及时准确的病原菌检测对于诊断和治疗具有关键作用。传统的细菌检验方法——细菌培养法，因其操作简便和成本低廉，长期以来被广泛应用。然而，细菌培养法的灵敏度和特异性较低，且检测时间较长，这在一定程度上限制了其临床应用效果。随着分子生物学技术的发展，PCR（聚合酶链反应）检验法因其高灵敏度和高特异性，逐渐成为细菌检验的重要工具。PCR检验法通过扩增特定的细菌DNA序列，能够在短时间内准确识别病原菌，具有较高的检测效率和准确性。相比之下，细菌培养法需要较长的时间来观察细菌的生长和鉴定，通常需要48至72小时才能获得结果。基于此，探讨PCR检验法与细菌培养法在细菌检验中的临床效果差异，有助于改进检验技术、提高诊断准确性。

本次研究中， PCR检验法在阳性检出率上显著优于细菌培养法。其中，PCR检验法的阳性检出率为85.00%，显著高于细菌培养法的55.00%（P<0.05）。表明PCR检验法在检测病原菌时具有更高的灵敏度，能够更准确地检出细菌感染。对于临床上需要快速诊断和及时治疗的病例尤为重要，能够提高诊断准确性，减少误诊和漏诊的发生。在检验时间方面，PCR检验法也表现出明显的优势，意味着PCR检验法可以显著缩短检验周期，提供更快速的诊断结果，为临床医生提供及时的治疗依据。在急性细菌感染病例中，快速准确的检测方法对于患者的预后和治疗效果至关重要。

综上所述，研究结果与传统细菌培养法比较，PCR检验法具有更高的阳性检出率、更短的检验时间和更高的灵敏度和特异性，值得将其在临床上加以运用，提高细菌感染的诊断和治疗水平。

参考文献：

[1] 李佳佳.PCR检验法对细菌检出率的影响分析[J].中外女性健康研究, 2023(7):180-181.

[2] 董桂琼.PCR检验法和细菌培养法在细菌性阴道炎检验中的效果分析[J].名医, 2019(5):1.

[3] 梁美玲,刘志宝.PCR检验法和细菌培养法在阴道细菌检验中的效果对比分析[J].世界复合医学, 2023, 9(11):175-177.

[4] 李燕.PCR法与细菌培养在阴道细菌鉴定中的比较分析[J].保健文汇 2020年20期, 260-261页, 2020.