简介:摘要目的高氧治疗是某些新生儿疾病中不可或缺的治疗措施,长期治疗性高氧可能对肠上皮细胞产生严重的损伤作用,该研究探讨高氧是否通过活性氧(reactive oxygen species,ROS)促进肠上皮细胞凋亡信号调节激酶1(apoptosis signal-regulating kinase 1,ASK1)和P38的表达。方法体外用不同浓度的过氧化氢(hydrogen peroxide,H2O2)(100 μmol/L、200 μmol/L和400 μmol/L)和85%氧气分别处理人结肠癌细胞系Caco-2细胞,免疫荧光检测ASK1表达,Western Blot和Real-time PCR方法检测P38和p-P38表达。结果随着H2O2浓度的增加ASK1的荧光强度逐渐增强,高氧组ASK1荧光强度明显强于对照组和H2O2处理组。随着H2O2浓度(100 μmol/L、200 μmol/L、400 μmol/L)的增加,P38蛋白相对表达量(0.21±0.02、0.28±0.13、0.44±0.07)和p-P38蛋白相对表达量(0.09±0.02、0.19±0.03、0.37±0.07)逐渐升高,200 μmol/L和400 μmol/L H2O2组P38 mRNA(4.03±0.68、3.94±0.71)表达明显高于100 μmol/L H2O2组(3.05±0.47)(P<0.01)。高氧组P38蛋白、p-P38蛋白以及P38 mRNA相对表达量明显高于H2O2组(P<0.01)。与对照组相比,高氧组和H2O2组P38、p-P38蛋白以及P38 mRNA明显升高(P<0.01)。结论高氧和H2O2干预下,肠上皮细胞ASK1、P38和p-P38的表达均增加,表明ROS参与高氧诱导ASK1的活化进而激活下游P38,对肠上皮细胞产生损伤。