简介:摘要目的评价低氧诱导因子-1α(HIF-1α)/Bcl-2/E1B-19 kDa相互作用蛋白3(BNIP3)信号通路在右美托咪定减轻小鼠心肌缺血再灌注致脑损伤中的作用。方法清洁级健康雄性C57BL/6小鼠60只,8~10周龄,体重20~30 g,采用随机数字表法分成5组(n=12):假手术组(S组)、心肌缺血再灌注组(IR组)、心肌缺血再灌注+右美托咪定组(IRD组)、心肌缺血再灌注+HIF-1α抑制剂2ME2组(IR-M组)和心肌缺血再灌注+右美托咪定+HIF-1α抑制剂组(IRD-M组)。采用结扎小鼠左冠脉前降支30 min再灌注2 h的方法制备小鼠心肌缺血再灌注致脑损伤模型。IRD组和IRD-M组于缺血前5 min腹腔注射右美托咪定50 μg/kg。IR-M组和IRD-M组缺血前5 min腹腔注射2ME2 15 mg/kg。于再灌注2 h时采集胸主动脉血样,测定血清S-100β蛋白和神经元特异性烯醇化酶(NSE)浓度,随后处死小鼠取海马,采用TUNEL法检测细胞凋亡指数,Western blot法测定HIF-1α、BNIP3、Beclin-1、自噬微管相关蛋白轻链3(LC3)和磷酸化Tau蛋白(p-Tau)表达,计算LC3Ⅱ/Ⅰ比值,HE染色法光镜下观察海马CA1区病理学结果。结果与S组比较,IR组血清S-100β蛋白、NSE浓度和海马细胞凋亡指数升高,海马HIF-1α、BNIP3、Beclin-1和p-Tau表达上调,LC3Ⅱ/Ⅰ比值升高(P<0.05),海马CA1区病理学损伤加重;与IR组比较,IRD组血清S-100β、NSE浓度和海马细胞凋亡指数降低,海马HIF-1α、BNIP3和Beclin-1表达上调,p-Tau表达下调,LC3Ⅱ/Ⅰ比值升高(P<0.05),海马CA1区病理学损伤减轻。与IRD组比较,IR-M和IRD-M组血清S-100β、NSE浓度和海马细胞凋亡指数升高,海马p-Tau表达上调,HIF-1α、BNIP3和Beclin-1表达下调,LC3Ⅱ/Ⅰ比值降低(P<0.05),海马CA1区病理学损伤加重。结论HIF-1α/BNIP3信号通路参与了右美托咪定减轻小鼠心肌缺血再灌注致脑损伤的过程。
简介:摘要目的评价低氧诱导因子-1α(HIF-1α)/Bcl-2/E1B-19kDa相互作用蛋白3(BNIP3)信号通路在七氟烷减轻大鼠心肌缺血再灌注损伤中的作用及其与自噬的关系。方法SPF级健康成年雄性SD大鼠90只,体重300~350 g,采用随机数字表法分为5组(n=18):假手术组(Sham组)、心肌缺血再灌注组(I/R组)、七氟烷组(SEV组)、HIF-1α抑制剂2ME2组(2ME2组)和2ME2+七氟烷组(MSP组)。采用结扎冠状动脉左前降支40 min再灌注120 min的方法建立大鼠心肌缺血再灌注损伤模型。SEV组于再灌注即刻吸入2.4%七氟烷15 min;2ME2组和MSP组在结扎冠状动脉左前降支前1 h时腹腔注射2ME2 15 mg/kg,其余处理同I/R组或SEV组。于再灌注120 min时处死大鼠取左室心肌组织,采用Western blot法检测HIF-1α和BNIP3表达;电镜下观察自噬小体;DHE法检测ROS活性;TTC法确定心肌梗死面积。结果与Sham组比较,其余4组心肌ROS活性、自噬小体数目和心肌梗死面积增加,I/R组和SEV组HIF-1α和BNIP3表达上调(P<0.05);与I/R组比较,SEV组心肌ROS活性、自噬小体数目和心肌梗死面积减少,HIF-1α和BNIP3表达上调(P<0.05),2ME2组和MSP组心肌ROS活性、自噬小体数目和心肌梗死面积差异无统计学意义(P>0.05),HIF-1α和BNIP3表达下调(P<0.05);与SEV组比较,2ME2组和MSP组心肌ROS活性、自噬小体数目和心肌梗死面积增加,HIF-1α和BNIP3表达下调(P<0.05)。结论HIF-1α/BNIP3信号通路参与了七氟烷减轻大鼠心肌缺血再灌注损伤的过程,与抑制自噬有关。