简介：摘要目的研究2018年4月至2019年3月济南市急性呼吸道感染病例中人鼻病毒、呼吸道合胞病毒及人腺病毒的感染情况及流行病学特点，并对分离出的人腺病毒做全基因组序列分析。方法采集2018年4月至2019年3月济南市第四人民医院、山东大学齐鲁儿童医院、章丘区人民医院的急性呼吸道感染住院病例患者的鼻/咽拭子样本共计1 969份，采用实时荧光定量PCR的方法检测样本中呼吸道相关病原体，包括人鼻病毒、呼吸道合胞病毒及人腺病毒的阳性率，并对分离出的7株腺病毒阳性标本进行测序，以确定腺病毒型别，并构建基因进化树进行分析。结果在收集的1 969份标本中，3种呼吸道病毒阳性病例共计242例，阳性检测率为12.30 %(242/1969)，鼻病毒阳性率为3.00%(59/1969)、呼吸道合胞病毒阳性率为6.30 %(124/1969)、腺病毒阳性率为3.86%(76/1969)。不同年龄段间鼻病毒检出率差异无统计学意义(Fisher精确检验值8.376，P＝0.720)，不同年龄段间呼吸道合胞病毒、腺病毒检出率差异均有统计学意义(χ2＝19.28、12.16；P＝0.001、0.016)。不同性别间腺病毒检出率差异具有统计学意义(χ2＝14.33，P<0.001)，不同性别间鼻病毒阳性率和呼吸道合胞病毒阳性率均无统计学意义(χ2＝0.30、2.90，P＝0.862、0.089)。比较不同月份间三种病毒核酸阳性率，发现鼻病毒、呼吸道合胞病毒和腺病毒的检出率分别在10月份、12月份、11月份达到最高(分别为8.61%、26.50%和8.84%)。对测序的7株腺病毒阳性标本构建基因进化树后发现其均为HAdV-2型。结论2018年4月至2019年3月济南市急性呼吸道感染相关的人鼻病毒、呼吸道合胞病毒及人腺病毒在不同组别间有不同的流行病学特点，为急性呼吸道感染的早期预防和临床治疗提供参考依据。

简介：摘要目的分析2021—2022年度山东省流感流行分布特征、流行毒株病原学及其血凝素（HA）基因特性。方法收集2021—2022年度山东省流感样病例（ILI）哨点监测数据，进行描述性分析；采用荧光定量PCR核酸检测、病毒分离方法对采集的ILI标本开展检测，分析不同时间流感病毒的分布，按每市选取3株病毒进行基因测序，进行HA基因进化分析。结果2021—2022年度，山东省54所流感监测哨点医院共报告ILI 528 263例，ILI就诊比例为4.07%，0~4岁ILI最多，为45.86%；呈冬春季流行高峰，最高峰为2021年第52周（6.62%）。共对26 754份标本开展了核酸检测，阳性率27.10%，均为B型Victoria系流感病毒，PCR阳性率高峰为2021年第49周（63.78%）；共报告ILI聚集性或暴发疫情295起，经实验室确诊269起为流感病毒阳性，以小学发生的疫情为主，2021年12月份报告疫情数最多。基因进化分析显示：HA基因与2020—2023年度推荐的疫苗株遗传距离均较近，介于98.6%~99.5%，且分成2个分支（V1A.3a.1，V1A.3a.2）。结论2021—2022年度，山东省流感流行高峰在12月，毒株型别单一，流感病毒阳性率和暴发疫情报告数均较高，毒株与WHO疫苗推荐株HA基因同源性较好，但整体上流感病毒群体免疫屏障较弱。

简介：摘要：在现代技术支持下，相应优化和完善了建筑施工技术，人们对于建筑施工的要求持续提升，必须全面提升工程建设质量，确保计算科学性，以此满足业主需求。在建筑工程建设中，开始广泛应用大体积混凝土结构施工技术。然而大体积混凝土结构施工技术，极易产生裂缝问题，必须做好科学分析和研究，制定标准处理策略。同时要全面分析大体积混凝土结构技术，讨论技术的具体应用问题。

简介：摘要目的构建并拯救增强型绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein, EGFP)标记的EGFP-EV-A71重组病毒。方法利用重叠PCR技术，以pMD19T-SDLY107全长质粒为模板，将2A蛋白酶识别序列加入到结构蛋白VP4的5′端；以pEGFP-N1质粒作为模板，扩增获得EGFP目的片段，将其插入到上述重组质粒中，得到重组质粒pMD19T-107-EGFP。经酶切和体外转录后，转染横纹肌细胞肉瘤(RD)，拯救获得重组病毒EGFP-EV-A71。采用Karber法计算细胞培养半数感染量(CCID50)以测定病毒滴度。利用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测不同时间点的病毒复制水平，并绘制病毒复制曲线，比较重组病毒与母本病毒的复制力有无差异。乳酸脱氢酶(LDH)和细胞增殖(CCK-8)实验分别测定被感染细胞的细胞损伤率和存活率。结果包含EGFP的重组EV-A71感染性cDNA克隆被成功构建；转染RD细胞后，出现典型的细胞病变并且表达出较强的绿色荧光；重组病毒与母本病毒具有相似的复制动力学特征和致细胞病变效应。结论成功拯救了EGFP标记的重组病毒EGFP-EV-A71。