简介：摘要目的检测真核翻译起始因子4γ1(EIF4G1)在胰腺癌中的表达，并探究其促进胰腺癌细胞增殖的相关机制。方法利用在线数据库分析EIF4G1在肿瘤中的表达量与预后意义；实时荧光定量聚合酶链式反应检测人胰腺癌细胞系的EIF4G1表达水平。慢病毒转染构建EIF4G1低表达细胞系，分别为敲减#1，敲减#2与对照；慢病毒转染构建EIF4G1过表达细胞系，为过表达与空载；细胞计数试剂盒(CCK-8)实验与克隆形成实验检测胰腺癌的增殖能力；蛋白印迹法检测EIF4G1敲减后哺乳动物雷帕霉素靶蛋白信号(mTOR)通路的变化，组间比较选择t检验。结果多个数据库显示EIF4G1在胰腺癌中表达量升高，与胰腺癌的不良预后有关；低表达组PANC-1在第5天的吸光度显著低于对照组(0.85±0.03、0.92±0.05比1.35±0.04，t＝22.160、14.670，P<0.01)；低表达组PA-TU-8988T在第5天的吸光度显著低于对照组(1.00±0.05、0.99±0.04比1.99±0.07，t＝26.740、29.390，P<0.01)；低表达组PANC-1的克隆形成数目著低于对照组(91.00±7.55、107.00±7.00比147.70±21.83，t＝4.250、3.070，P<0.05)，低表达组PA-TU-8988T的克隆形成数目著低于对照组(137.00±16.09、147.30±13.50比222.70±18.50，t＝6.050、5.700，P<0.01)；过表达组MIA PaCa-2在第5天的吸光度显著高于对照组(1.55±0.14比1.21±0.10，t＝4.360，P<0.01)；过表达组BxPC-3在第5天的吸光度显著高于对照组(1.03±0.01比0.69±0.07，t＝10.840，P<0.01)；过表达组MIA PaCa-2的克隆形成数目显著高于对照组(127.30±14.57比81.33±10.26，t＝4.470，P<0.05)；过表达组BxPC-3的克隆形成数目显著高于对照组(105.70±13.58比47.00±7.55，t＝6.540，P<0.01)。低表达组PANC-1细胞的p-mTOR含量低于对照组PANC-1细胞(1.00±0.12比0.55±0.19、0.54±0.19，t＝3.480、3.450，P<0.05)；低表达组PA-TU-8988T细胞的p-mTOR含量低于对照组PA-TU-8988T细胞(1.00±0.05比0.57±0.14、0.49±0.09，t＝5.140、8.410，P<0.01)。结论EIF4G1在胰腺癌中上调，可能通过mTOR通路促进胰腺癌的增殖。

简介：摘要目的通过生物信息学探讨几丁质酶3样1蛋白(CHI3L1)在胃癌中的作用及其临床意义。方法利用Oncomine、基因表达谱交互分析(GEPIA)和Kaplan-Meier Plotter等数据库探讨CHI3L1在胃癌中的表达及其与患者生存之间的关系。利用Methsurv数据库分析CHI3L1启动子和CpG位点甲基化水平及其与胃癌临床病理特征的相关性。通过LinkedOmics分析胃癌中CHI3L1共表达网络并进行基因本体和京都基因(GO)和基因组百科全书(KEGG)富集分析。通过分析肿瘤免疫估计资源(TIMER)和肿瘤免疫系统交互数据库(TISIDB)数据库探讨CHI3L1与胃癌免疫浸润之间的关联。体外实验使用细胞计数试剂盒(CCK-8)、Transwell、蛋白质印迹法(Western blot)等方法进一步验证CHI3L1在胃癌中的生物学功能。结果Oncomine数据库和GEPIA数据库均示CHI3L1在癌组织的表达水平高于正常组织(P<0.05)，Kaplan-Meier Plotter数据库也显示CHI3L1表达在胃癌组织中显著增高(P<0.05)并与较低的总体生存率相关(P<0.01)。胃癌组织中CHI3L1的启动子和大部分CpG位点(cg19081101、cg04361579和cg14085262)甲基化水平显着高于正常组织且与患者的生存明显相关。GO和KEGG分析显示CHI3L1共表达相关性较高的前50个基因主要参与免疫反应与代谢调节。在免疫浸润方面，胃癌患者肿瘤组织中CHI3L1表达与CD8+细胞、B淋巴细胞、树突状细胞和嗜中性粒细胞浸润显著相关。在体外实验中，CHI3L1不仅被证明作为癌基因促进细胞增殖和转移，且促进PD-L1的表达。结论CHI3L1的表达上调和甲基化突变位点可能有助于预测胃癌患者的不良预后，CHI3L1能够调控胃癌免疫抑制微环境。

简介：摘要目的探讨严重急性呼吸综合征冠状病毒2(severe acute respiratory syndrome coronavirus 2，SARS-CoV-2)感染患者的血液标本经不同灭活和储存处理后，SARS-CoV-2总抗体稳定性的变化，从而论证以56 ℃，60 min加热作为患者血液标本安全有效的灭活方法的可行性。方法选取2020年2月24日至2020年3月30日深圳市第三人民医院收治的47例2019新型冠状病毒肺炎(corona virus disease 2019，COVID-19)确诊患者，另外选取同期因其他疾病入院的已排除患有COVID-19可能的33例住院患者。抽取两组研究对象的肘静脉乙二胺四乙酸(ethylene diamine tetraacetic acid，EDTA)抗凝血液，应用化学发光微粒子免疫检测法检测56 ℃，30 min灭活前后和60 min灭活前后血浆SARS-CoV-2总抗体水平，并在指定时间点检测SARS-CoV-2总抗体，进一步比较不同灭活处理方式及不同储存时间对SARS-CoV-2总抗体的影响。结果56 ℃，30 min灭活前后和60 min灭活前后，血浆样本中SARS-CoV-2总抗体检测阳性结果一致率分别为96.15%和100%，灭活前后总抗体样本临界指数(cut-off index，COI)值的Pearson相关系数分别为0.9965(95% CI：0.9920~0.9984，P<0.05)和0.9981(95% CI：0.9962~0.9990，P<0.05)。血浆样本经先离心再灭活处理与先灭活再离心处理，SARS-CoV-2总抗体阳性结果一致率为100%，两组总抗体COI值的Pearson相关系数为0.9995(95% CI：0.9950~0.9999，P<0.05)。未灭活样本4 ℃储存30 d；56 ℃，30 min或60 min灭活样本4 ℃储存10 d，SARS-CoV-2总抗体COI值均未出现显著性变化。结论56 ℃，30 min或60 min灭活处理血浆样本及灭活后4 ℃储存10 d，未灭活4 ℃储存30 d均不会对SARS-CoV-2总抗体的检测结果造成影响。