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  • 简介:摘要目的探究分析淋巴细胞结合增强因子(LEF1)和钙黏蛋白相关蛋白(CTNNB1)表达水平与食管癌细胞周期阻滞、细胞凋亡、放射抵抗的关系及相关作用机制。方法构建LEF1、CTNNB1重组表达质粒和空载质粒,分别转染食管癌细胞,采用RT-PCR实验检测质粒转染效率;分别采用克隆形成实验、CCK8实验、流式细胞周期实验、流式细胞凋亡实验、Western Blot实验检测转染前后食管癌细胞放射抵抗能力、增殖能力、细胞周期变化、细胞凋亡能力的差异。结果pGEX-LEF1+pCMV6-CTNNB1组(下称实验组)食管癌细胞克隆集落细胞存活率明显优于其他各组(P<0.05);实验组细胞在72 h、96 h、120 h时增殖能力明显优于pGEX+pCMV6组、pGEX-LEF1+pCMV6组及pCMV6-CTNNB1+pGEX组细胞(P<0.05);实验组细胞中发生G2期阻滞细胞占比明显优于其他各组(P<0.05);实验组食管癌细胞凋亡比例明显低于pGEX+pCMV6组、pGEX-LEF1+pCMV6组及pCMV6-CTNNB1+pGEX组水平(P<0.05);实验组食管癌细胞中Bax、Caspase3蛋白表达水平明显低于pGEX+pCMV6组、pGEX-LEF1+pCMV6组及pCMV6-CTNNB1+pGEX组水平(P<0.05),实验组细胞中Bcl-2蛋白表达水平明显优于其他各组细胞(P<0.05)。结论LEF1、CTNNB1可通过介导Wnt信号通路,调控放射后食管癌细胞的增殖和G2期细胞阻滞,通过减少细胞凋亡,提高细胞的放射抵抗能力。

  • 标签: Wnt信号通路 淋巴细胞结合增强因子 钙黏蛋白相关蛋白 食管癌 细胞凋亡 放射抵抗
  • 简介:摘要目的探讨磁共振成像(MRI)检查体素内不相干运动(IVIM)成像及纹理分析对直肠癌BRAF基因突变的预测价值。方法采用临床诊断性试验研究方法。收集2016年1月至2021年6月商丘市第一人民医院收治的36例直肠癌患者的临床病理资料;男28例,女8例;年龄为(50±4)岁。36例患者均经病理学检查确诊,经基因检测后,将12例BRAF基因突变型(均为BRAF V600E突变)设为突变组,24例BRAF野生型设为未突变组。患者术前均行MRI检查,采用Function Tool后处理软件分析得到IVIM相关后处理图。观察指标:(1)IVIM参数及纹理参数观察者一致性检验。(2)两组患者MRI检查IVIM参数比较。(3)两组患者MRI检查纹理参数比较。(4)IVIM参数与纹理参数的诊断效能。采用组内相关系数(ICC)评估参数观察者一致性(ICC>0.80为一致性良好),取ICC>0.80参数的平均值进一步分析。正态分布的计量资料以x±s表示,组间比较采用独立样本t检验;偏态分布的计量资料以M(Q1,Q3)表示,组间比较采用Mann-Whitney U检验。计数资料以绝对数表示,组间比较采用χ2检验。等级资料比较采用非参数秩和检验。采用Logistic回归联合纹理参数,采用受试者工作特征(ROC)曲线分析预测性能,并计算灵敏度、特异度。结果(1)IVIM参数及纹理参数观察者一致性检验:两名观察者记录IVIM参数表观扩散系数、扩散相关系数、灌注相关扩散系数、灌注相关参数的ICC值分别为0.91、0.90、0.91、0.89。纹理参数中最小值、最大值、第10百分位数、第25百分位数的ICC值均<0.80,平均值、第50百分位数、第75百分位数、第90百分位数、能量值、熵值、偏度、峰度的ICC值均>0.80。(2)两组患者MRI检查IVIM参数比较:突变组患者MRI检查IVIM参数中扩散相关系数、灌注相关参数分别为(0.70±0.13)×10-3 mm2/s、0.39±0.30;未突变组上述指标分别为(0.79±0.12)×10-3 mm2/s、0.17±0.10;两组患者上述指标比较,差异均有统计学意义(t=-2.17、2.46,P<0.05)。(3)两组患者MRI检查纹理参数比较:突变组患者扩散相关系数图纹理参数中平均值和能量值分别为0.54±0.23和0.00(0.00,0.01);未突变组上述指标分别为0.77±0.34和0.01(0.00,0.01);两组患者上述指标比较,差异均有统计学意义(t=-2.12,Z=-1.35,P<0.05)。(4)IVIM参数与纹理参数的诊断效能。ROC分析结果显示:MRI检查扩散相关系数、灌注相关参数、IVIM参数联合、扩散相关系数图平均值、扩散相关系数图能量值、纹理参数联合曲线下面积分别为0.69[95%可信区间(CI)为0.52~0.84]、0.76(95%CI为0.59~0.88)、0.79(95%CI为0.62~0.91)、0.71(95%CI为0.52~0.85)、0.79(95%CI为0.62~0.91)、0.84(95%CI为0.68~0.94),均小于IVIM参数联合纹理参数曲线下面积0.92(95%CI为0.79~0.99)。结论MRI检查IVIM参数和纹理参数分析可无创预测直肠癌BRAF基因突变状态,且将两者联合诊断的预测效能更优。

  • 标签: 直肠肿瘤 磁共振成像 体素内不相干运动 纹理分析 BRAF