简介：摘要目的探讨组蛋白甲基转移酶果蝇zeste基因增强子同源物2（EZH2）调控脓毒症T淋巴细胞功能失调的作用及机制。方法按随机数字表法将24只雄性C57BL/6小鼠分为假手术组、脓毒症模型组〔盲肠结扎穿孔术（CLP）+二甲基亚砜（DMSO）组〕及EZH2选择性抑制剂干预组（CLP+GSK126组），每组8只。采用CLP法制备脓毒症小鼠模型；假手术组小鼠不结扎穿刺盲肠，其余操作同CLP+DMSO组。CLP+DMSO组及CLP+GSK126组小鼠术后立即分别腹腔注射DMSO或GSK126（10 mg/kg）。术后24 h处死小鼠取肠系膜淋巴结，采用流式细胞仪检测T淋巴细胞EZH2表达、T淋巴细胞凋亡率、细胞增殖标志物ki-67抗原阳性T淋巴细胞（ki-67+）比例、γ-干扰素阳性T淋巴细胞（IFN-γ+）比例、程序性死亡受体-1阳性T淋巴细胞（PD-1+）比例及程序性死亡配体-1阳性T淋巴细胞（PD-L1+）比例。结果与假手术组相比，CLP+DMSO组小鼠肠系膜淋巴结T淋巴细胞EZH2表达升高。与CLP+DMSO组相比，CLP+GSK126组小鼠肠系膜淋巴结CD3+比例升高（0.70±0.02比0.50±0.07，P<0.01），表明抑制EZH2可增加脓毒症小鼠淋巴结T淋巴细胞数量；同时，CLP+GSK126组淋巴结CD4+及CD8+细胞中ki-67+比例显著上升（CD4+：0.74±0.05比0.63±0.04，CD8+：0.82±0.06比0.70±0.04，均P<0.05），表明抑制EZH2可增加脓毒症小鼠淋巴结增殖活性较高的T淋巴细胞比例；另外，CLP+GSK126组小鼠肠系膜淋巴结T淋巴细胞凋亡率与CLP+DMSO组比较差异无统计学意义〔CD4+：（21.53±2.87）%比（20.48±3.21）%，CD8+：（8.34±1.02）%比（7.71±1.38）%，均P>0.05〕，表明抑制EZH2对脓毒症小鼠淋巴结T淋巴细胞凋亡无明显影响。与CLP+DMSO组相比，CLP+GSK126组小鼠肠系膜淋巴结IFN-γ+CD4+、IFN-γ+CD8+比例也显著增加（IFN-γ+CD4+：0.31±0.11比0.14±0.06，IFN-γ+CD8+：0.30±0.10比0.13±0.06，均P<0.05），表明抑制EZH2可增强脓毒症小鼠淋巴结T淋巴细胞IFN-γ分泌能力；同时，CLP+GSK126组小鼠肠系膜淋巴结PD-1+CD8+比例较CLP+DMSO组显著下降（0.092±0.006比0.135±0.004，P<0.01），表明抑制EZH2可降低脓毒症小鼠淋巴结CD8+细胞PD-1的表达量，但对PD-L1+比例无明显影响。结论EZH2参与了脓毒症诱导的T淋巴细胞功能障碍的调控，该作用可能部分通过调节PD-1表达介导。

简介：摘要目的探讨脓毒症患者外周血B淋巴细胞（CD19+B）、记忆B细胞亚群（CD19+CD27+B）上组蛋白甲基转移酶果蝇zeste基因增强子同源物2（enhance of zeste homolog 2, EZH2）动态表达变化规律及其对脓毒症患者预后判断的价值。方法采用前瞻性队列研究，纳入2018年6月至2020年1月在同济大学附属东方医院重症监护病房就诊的脓毒症患者48例，同期来院的40例健康体检者作为对照组。根据患者28 d存活与否将脓毒症组分为死亡组及存活组。采集确诊脓毒症1 d、3 d、7 d共3个时间点血标本（健康对照组于清晨空腹仅抽取1次），收集不同时间点脓毒症组的血常规、IL-6、血气分析等，统计SOFA和APACHE Ⅱ评分。运用流式细胞技术检测研究对象不同时间点CD19+B细胞上EZH2阳性率及平均荧光强度、CD19+CD27+B细胞上EZH2的阳性率并绘制受试者工作特征曲线，计算曲线下面积，评估对判断脓毒症患者28 d死亡的预测价值。结果①脓毒症组确诊后第1、3、7天外周血CD19+B淋巴细胞上EZH2的阳性率和平均荧光强度、CD19+CD27+B淋巴细胞上EZH2表达的阳性率较健康对照组均显著增加，且差异具有统计学意义（P<0.05）。随着时间推移，EZH2在CD19+B淋巴细胞、CD19+CD27+B淋巴细胞上表达水平呈升高趋势。②死亡组第1天CD19+B淋巴细胞上EZH2阳性率明显高于存活组，然而死亡组第3和7天CD19+CD27+B细胞上EZH2的阳性率却明显低于存活组（P<0.05）。③脓毒症患者第1天CD19+B淋巴细胞上EZH2阳性率、APACHEⅡ评分、SOFA评分和IL-6水平均为预测患者28 d死亡的独立危险因素。④APACHE Ⅱ评分的AUC为0.907（95%CI：0.825~0.990），灵敏度为88.89%，特异度为76.67%；SOFA评分的AUC为0.831（95%CI：0.706~0.955），灵敏度为66.67%，特异度为86.67%；CD19+B淋巴细胞上EZH2阳性率的AUC为0.799（95%CI：0.657~0.941），灵敏度为88.89%，特异度为80.77%，灵敏度优于SOFA评分，特异度高于APACHE Ⅱ评分。结论脓毒症患者B淋巴细胞上EZH2高表达，与患者不良预后相关；动态监测脓毒症患者B淋巴细胞上EZH2的表达有一定的临床意义。