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  • 简介:摘要目的探讨雷帕霉素(RAP)激活M2巨噬细胞(type-Ⅱ macrophage)自噬对大肠癌移植瘤放射敏感性的影响。方法经佛波酯(PMA)单独及联合人重组白介素4(IL-4)诱导人单核白血病细胞THP-1分化为M0和M2型巨噬细胞。使用RAP激活M2自噬,设置巴弗洛霉素(bafilomycin A1)下调M2已被激活的自噬作为对照。将大肠癌LoVo细胞接种于BALB/c-nu/nu裸鼠,待形成直径10 mm瘤体后,利用随机数表法,将18只裸鼠分为M2自噬未激活组、激活组和激活后下调组,LoVo细胞单独成瘤为阴性对照组,每组6只。对荷瘤鼠行2次8 Gy X射线局部照射,分析各组间移植瘤放射敏感性的变化。结果M2巨噬细胞标志物Arg-1、CCL-22的相对表达量显著高于M0巨噬细胞(t=78.77、60.02,P<0.05)。M2自噬未激活组瘤体质量、体积和微血管密度(MVD)[(1.93±0.05)g、(2.14±0.06)cm3、36.37±1.04]较阴性对照组[(1.35±0.05)g、(1.77±0.02)cm3、25.69±1.34]显著提高(t=20.07、14.56、10.92,P<0.05);激活M2自噬后,瘤体重量、体积和微血管密度均显著下降[(0.89±0.03)g、(1.24±0.01)cm3、13.60±1.52](t=44.37、40.32、21.43,P<0.05)。利用巴弗洛霉素下调M2自噬后,瘤体质量、体积和微血管密度有所回升[(1.02±0.07)g、(1.37±0.02)cm3、21.06±1.41](t=4.67、13.79、6.23,P<0.05)。与阴性对照组相比,自噬未激活的M2能够抑制Livin和Survivin在瘤体组织中的表达(t=2.64、7.90,P<0.05);RAP激活M2自噬后,可进一步下调上述蛋白的表达(t=5.43、9.39,P<0.05)。利用巴弗洛霉素下调M2自噬后,Livin、Survivin表达量均有所回升(t=2.80、3.17,P<0.05)。结论利用RAP激活M2自噬,可抑制M2促进肿瘤微血管形成的能力,从而抑制移植瘤生长;同时,通过下调大肠癌移植瘤中抗凋亡基因Livin与Survivin的表达,诱导大肠癌移植瘤放疗后凋亡的发生,提高大肠癌的放射敏感性。

  • 标签: 雷帕霉素 M2巨噬细胞 自噬 大肠癌 放射敏感性
  • 简介:摘要目的观察调控肿瘤相关巨噬细胞自噬后对大肠癌移植瘤放疗后凋亡的影响。方法药物诱导人单核白血病细胞THP-1(中国科学院上海细胞研究所)分化为肿瘤相关巨噬细胞(TAM)后,流式细胞术检测表面分子;使用雷帕霉素(RAD001),巴弗洛霉素(Bafilomycin a1)上调、下调TAM自噬,蛋白质印迹法(Western blot)检测自噬相关蛋白表达;TAM与大肠癌LoVo(美国组织细胞库)细胞混合接种于BALB/c-nu/nu裸鼠(苏州大学实验动物中心),分为TAM自噬上调组、下调组、未调组,LoVo细胞单独接种为对照组。对荷瘤鼠行8 Gy局部外照射,比较照光前后瘤体病理改变、瘤细胞凋亡变化。涉及数据应用SPSS 17.0统计软件分析,计量资料以均值±标准差(Mean±SD)表示,统计分析采用单因素方差分析(One-way ANOVA),以P<0.05为差异有统计学意义。结果TAM表面CD68、CD204、CD206[(62.32±1.58)%、(33.49±2.11)%、(52.42±2.65)%]表达显著高于THP-1细胞[(39.69±1.59)%、(8.56±1.25)%、(7.93±0.53)%]和仅由PMA作用得到的未活化巨噬细胞[(49.72±1.82)%、(7.90±1.19)%、(14.39±0.85)%,P<0.05]。自噬相关蛋白LC3BⅠ、Ⅱ、ATGs、Beclin-1表达结果证明,利用药物成功上调,下调了TAM自噬。照光后凋亡检测结果表明,TAM自噬未调节组[(25.18±0.37)%]高于LoVo细胞单独接种组[(13.74±0.61)%],上调组[(41.75±1.15)%]高于LoVo细胞单独接种组,下调组[(19.34±0.72)%]高于LoVo细胞单独接种组;自噬上调组凋亡率[(41.75±1.15)%]高于未调组[(25.18±0.37)%]与下调组[(19.34±0.72)%];免疫组织化学结果显示,存活素(Survivin)与Livin在上调组表达最少;照光后凋亡相关蛋白表达显示:与单独接种组比较,混合接种组p53、Smac表达均升高,而Livin表达下降,上调组下降最为显著;混合接种后MRP4表达显著上升,调控TAM自噬后,LoVo细胞中MRP4表达下降,其中上调组中表达显著降低。结论上调TAM自噬可改变大肠癌细胞凋亡相关蛋白表达,诱导放疗后大肠癌细胞凋亡发生,增强大肠癌细胞的放疗敏感性。

  • 标签: 肿瘤相关巨噬细胞 自噬 大肠癌 放疗 凋亡
  • 简介:  摘要: 随着科学技术的快速发展,我国电力行业正在快速发展。电接地是指在电气设备施工时进行接地连接,防止触电事故,造成人员伤亡。另外,接地可以避免雷电事故,在保障电气安全方面具有重要意义。

  • 标签: 电接地 电气安全 问题