简介:摘要目的探讨麦冬皂苷D联合沉默环氧合酶-2(COX-2)基因对人胰腺癌BxPC-3细胞增殖、迁移、侵袭的影响。方法将BxPC-3细胞分为空白对照组、麦冬皂苷D高剂量组(40 μmol/L)、中剂量组(20 μmol/L)、低剂量组(10 μmol/L);将沉默COX-2后的细胞分为空白组、COX-2抑制组(50 pmol/ml siRNA-COX-2)、麦冬皂苷D组(20 μmol/L)与联合用药组(麦冬皂苷D 20 μmol/L+50 pmol/ml siRNA-COX-2),采用CCK-8法检测细胞增殖活力,划痕实验检测细胞迁移距离,Transwell法检测细胞侵袭程度,采用实时定量PCR(RT-qPCR)法检测BxPC-3细胞中COX-2基因的相对表达水平,蛋白质印迹法检测BxPC-3细胞中COX-2、缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)、血管内皮生长因子(VEGF)蛋白相对表达水平。结果空白对照组,麦冬皂苷D高、中、低剂量组的细胞增殖率分别为(100.0±4.9)%、(71.8±5.4)%、(80.5±5.8)%和(89.7±5.7)%,细胞迁移距离分别为(279.8±24.0)μm、(141.9±21.2)μm、(168.8±37.1)μm和(224.6±19.9)μm,侵袭数量吸光度(A)值分别为1.107±0.095、0.390±0.030、0.596±0.017和0.826±0.034,差异均具有统计学意义(F=19.770,P<0.001;F=48.270,P<0.001;F=198.400,P<0.001),麦冬皂苷D高、中、低剂量组均明显低于空白对照组(均P<0.05);COX-2基因相对表达水平分别为1.007±0.178、0.387±0.169、0.567±0.142和0.740±0.030,蛋白相对表达水平分别为1.000±0.033、0.654±0.085、0.762±0.110和0.881±0.049,差异均具有统计学意义(F=10.280,P=0.004;F=11.780,P=0.003),麦冬皂苷D高、中剂量组均低于空白对照组(均P<0.05),麦冬皂苷D低剂量组与空白对照组差异均无统计学意义(均P>0.05);选择麦冬皂苷D中剂量(20 μmol/L)作为后续实验浓度。沉默COX-2后,空白组、COX-2抑制组、麦冬皂苷D组和联合用药组的细胞增殖率分别为(100.0±2.8)%、(68.4±6.7)%、(67.7±5.9)%和(57.0±8.5)%,迁移距离分别为(274.4±23.8)μm、(217.0±18.8)μm、(186.2±18.6)μm和(115.7±15.8)μm,侵袭数量A值分别为1.143±0.092、0.791±0.058、0.715±0.026和0.424±0.058,差异均具有统计学意义(F=34.430,P<0.001;F=103.400,P<0.001;F=131.100,P<0.001),各处理组细胞的增殖率、迁移距离、侵袭数量均明显低于空白组(均P<0.001);与COX-2抑制组和麦冬皂苷D组相比,联合用药组细胞增殖、迁移、侵袭能力均被明显抑制(均P<0.05);COX-2抑制组与麦冬皂苷D组相比,仅迁移距离差异有统计学意义(P<0.05)。各组COX-2蛋白相对表达水平分别为0.995±0.037、0.779±0.060、0.806±0.076和0.645±0.079,HIF-1α蛋白相对表达水平分别为1.083±0.104、0.749±0.070、0.736±0.070和0.394±0.016,VEGF蛋白相对表达水平分别为1.016±0.103、0.757±0.090、0.745±0.021和0.603±0.023,差异均具有统计学意义(F=14.650,P=0.001;F=45.220,P<0.001;F=18.180,P<0.001),各处理组3种蛋白表达水平均明显低于空白组(均P<0.05);与COX-2抑制组和麦冬皂苷D组相比,联合用药组COX-2、HIF-1α与VEGF蛋白相对表达水平均显著降低(均P<0.05);COX-2抑制组与麦冬皂苷D组相比,3种蛋白表达差异均无统计学意义(均P>0.05)。结论麦冬皂苷D联合沉默COX-2基因能抑制胰腺癌细胞增殖、迁移与侵袭,其机制可能与抑制COX-2通路并降低HIF-1α、VEGF蛋白表达水平有关。
简介:摘要:电力系统运行下调度自动化技术应用有助于调度工作水平的提高,是当前我国智能电网建设的一部分。文章对电力调度自动化特点进行分析,探讨电力调度自动化技术发展面临问题与应用措施。